间歇性低氧对大鼠心室肌细胞短暂外向电流的影响

利用全细胞膜片箝方法研究间歇性低氧后左、右心室肌细胞短暂外向电流（Ｉｔｏ）的变化,以探讨间歇性低氧增强心肌电稳定性的离子机制。大鼠间歇性暴露于低氧环境２８ｄ（Ｈ２８,６ｈ／ｄ）后,右心室肌细胞的Ｉｔｏ密度较常氧对照组明显增加（１６１８±４６１比６３２±１３５ｐＡ／ｐＦ,Ｐ＜００５）,而左心室肌细胞Ｉｔｏ密度与对照组无明显差异。间歇性低氧暴露４２ｄ（Ｈ４２）动物,其左、右心室肌细胞Ｉｔｏ密度与对照组无明显差异。Ｉｔｏ激活、失活和恢复动力学变化主要表现为Ｈ４２组左、右心室肌细胞的稳态失活曲线明显向负电压方向移位。左心室细胞的半数失活电压（－３８９±２３）ｍＶ与对照组（－３２８±５９）ｍＶ比较,具有显著性差异（Ｐ＜００１）;右心室细胞的半数失活电压（－４１９±４５）ｍＶ与对照组（－３３５±３５）ｍＶ比较,具有显著性差异（Ｐ＜０００１）。据此可推断,Ｉｔｏ密度的改变可反映心室在低氧早期阶段的不同动力学反应。失活动力学改变参与间歇性低氧心脏保护机制     

地塞米松对大白鼠海马兴奋性神经元和抑制性神经元的影响

为了探讨糖皮质激素对海马兴奋性神经元和抑制性神经元的作用,本实验将地塞米松注入大白鼠侧脑室,２ｈ 后经Ｎｉｓｓｌ染色法、免疫组织化学方法和细胞计数法观察了海马谷氨酸免疫反应性（ＧｌｕＩＲ）神经元和γ氨基丁酸免疫反应性（ＧＡＢＡＩＲ）神经元的变化。结果显示：（１）ＣＡ１、ＣＡ３ 和ＳＧ区的ＧｌｕＩＲ神经元明显增多,特别是ＣＡ１ 区。经细胞计数统计分析表明,与对照组相比ＣＡ１ 有极显著性差异（Ｐ＜ ０００１）,ＣＡ３区有显著性差异（００１＜ Ｐ＜ ００５）,ＳＧ处无明显差异（Ｐ＞ ００５）。（２）与对照组相比,ＧＡＢＡＩＲ神经元无明显变化。结果表明,糖皮质激素有增加海马谷氨酸能神经元的作用。尽管γ氨基丁酸能神经元无明显变化,并不表明糖皮质激素对其无影响     

乳杆菌DM8909对金黄色葡萄球菌与阴道上皮细胞粘附影响的研究

本文对乳杆菌ＤＭ８９０９对阴道主要致病菌金黄色葡萄球菌与阴道上皮细胞的粘附影响作了补充实验。将等量ＤＭ８９０９液与金黄色葡萄球菌液同时与上皮细胞粘附进行了观察。结果表明,体外试验中,在ｐＨ７２情况下,乳杆菌与葡萄球菌同时加入时葡萄球菌粘附数量比葡萄球菌单独粘附少（Ｐ＜００１）,乳杆菌与金葡菌粘附数量相差不大（Ｐ＞００５）;乳杆菌与金葡菌先于ｐＨ４５下作用８１２ｈ,然后与上皮细胞同时孵育２小时,粘附的乳杆菌与金葡菌量比ｐＨ７２时均有减少,而金葡菌量比其单独粘附明显减少（Ｐ＜００１）,且明显少于乳杆菌（Ｐ＜００１）。说明乳杆菌能抑制葡萄球菌对阴道上皮细胞的粘附     

妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关关系的研究

为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｓＶｉｒｕｓ２,ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌａｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ）的感染及其相关关系,我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４８例患有性病、生殖道感染的妇女和３９例正常妇女进行了下生道ＨＳＶ２、ＨＰＶ的检测。ＨＳＶ２在实验组和对照组妇女中的感染率分别是７２９％和２５６％,两组有极显著性差异（Ｐ＜００１）;ＨＰＶ在实验组和对照组妇女中的感染率分别是５３３％和３３３％,两组无显著性差异（Ｐ＞００５）;两组中ＨＳＶ２、ＨＰＶ双阳性率分别是４５８％（２２／４８）和２３１％（９／３９）,有显著性差异（Ｐ＜００５）;在两组共８７份标本中,ＨＳＶ２和ＨＰＶ双阳性者占３１例,阳性率是３５６％。统计学分析表明：ＨＳＶ２和ＨＰＶ感染之间有极显著的相关性（Ｘ２＝２４０８,Ｐ＜００１）。研究表明：患有生殖系感染和性病妇女其ＨＳＶ２或ＨＰＶ和ＨＳＶ２混和感染的机率显著高于正常妇女,ＨＳＶ２和ＨＰＶ的感染具有协同作用。由于这两种病毒均与宫颈癌的发生有关,它们在生殖道中感染的相互作用机理有待于进一步研究。     

高压消毒蒸锅在石蜡切片免疫组织化学反应抗原恢复中的应用

将石蜡切片浸泡于１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ缓冲液（ｐＨ８．０）中,置入高压消毒蒸锅处理（１２０℃,１０３ｋＰａ）１０ｍｉｎ,以恢复组织中因甲醛固定而被封闭的抗原。结果表明,一些常规免疫组织化学反应呈阴性的组织抗原,经本法处理后呈阳性反应;对不经本法处理即呈阳性的组织抗原,可大大提高第一抗体的稀释度或缩短孵育时间。同微波方法相比,本法可一次处理数百张切片,且对切片和组织的形态无明显损害。因此是石蜡切片免疫组织化学反应组织抗原恢复的理想方法     

北京地区184例健康人肠道菌群值的调查

本文对北京地区１８４例７－６９岁健康人的粪便菌群中的肠杆菌、肠球菌、拟杆菌、产气荚膜梭菌、双歧杆菌、乳杆菌等６种细菌进行了培养、计数和鉴定。结果表明：肠杆菌６０７±１８０、肠球菌６１３±１４５、拟杆菌４５７±１７７、产气荚膜梭菌４０６±１５２、双歧杆菌８３２±０９６、乳杆菌７８２±０８６（ＬｏｇＮ／克便）;男性和女性相比,除产气荚膜梭菌男性明显高于女性（Ｐ＜００５）外,其余５种菌均无显著性差异;７－１８岁年龄组肠杆菌极显著地低于平均值（Ｐ＜００１）,６１—６９岁年龄组双歧杆菌明显低于平均值（Ｐ＜００５）;双歧杆菌与肠杆菌之比Ｂ／Ｅ值,７－１８岁年龄组是６１－６９岁年龄组的５７５倍     

捕杀对高原鼢鼠种群年龄结构及繁殖的影响

捕杀高原鼢鼠后,残鼠种群与自然种群年龄结构相比较,５月差异性显著（Ｘ２＝９９７,Ｐ＜００５）;７月和１０月差异极显著（Ｘ２＝１５１３４,Ｘ２＝１５６１２,Ｐ＜００１）。５月,残鼠种群成年Ⅰ组占最大比例（５３４５％）;自然种群成年Ⅱ组占最大比例（４８４４％）。７月,残鼠种群幼年组和亚成年组所占比例之和（３５０６％）明显高于自然种群（２２００％）（Ｐ＜００５）。１０月,残鼠种群近老年组和老年组所占比例之和（９６２％）明显低于自然种群（２３０８％）（Ｐ＜００５）。残鼠种群成年Ⅰ组雌鼠怀孕率（８４６２％）明显高于自然种群（５８３３％）（Ｐ＜００５）;平均胎仔数（３３２）也高于自然种群（２８５）,但差异不显著（Ｐ＞００５）。     

慢性低氧下普通大鼠与低氧敏感大鼠的血液气体变化

普通大鼠（ＳＤ）与低氧敏感大鼠（ＨＳ）经减压舱内模拟海拔５０００ｍ高度下３周低氧,观察到ＳＤ与ＨＳ的Ｈｂ有显著差异,前者高于后者（分别为２７．３±０．６;２４．５±０．８ｇ％Ｐ＜０．０１）。此时ＳＤ血液中的ＰＣＯ２已恢复正常,而ＨＳ血液中的ＰＣＯ２却比ＳＤ血液中的ＰＣＯ２低（分别为４．３±０．１;５．６±０．３ｋＰａＰ＜０．０１）。在慢性低氧初期,ＨＳ的ｐＨ值比ＳＤ明显降低（分别为７．１８±０．０３;７．２９±０．０２,Ｐ＜０．０５）。但随着低氧时间延长ＨＳ的ｐＨ值很快上升并超过ＳＤ（分别为７．２５±０．０２;７．１７±０．０３Ｐ＜０．０５）。两者的血液氧没有明显差异。实验结果提示普通大鼠与低氧敏感大鼠对慢性低氧反应有不同的生理机制。     

牙周微生态与龈沟液pH关系初探

目的：测定和分析健康和病变牙周部位的龈沟液ｐＨ差别。方法：牙周炎、牙龈炎和牙周健康者各１０例,用ｐＨ５５－９０试纸测定龈沟ｐＨ,分析与牙周袋（龈沟）深度和龈下厌氧菌丛的关系。结果：牙周炎组龈沟液ｐＨ普遍较牙龈炎组和牙周健康组高,其ｐＨ均数和标准差为８１０±０５７,牙龈炎组为７１９±０４５,牙周健康组为７１５±０５３,组间有非常显著意义差别（Ｐ＜００１）,其龈沟液ｐＨ与牙周袋深度、龈下菌斑厌氧菌总数呈正相关（Ｐ＜００５）;而牙龈炎组ｐＨ与健康组无显著意义差别（Ｐ＞００５）。结论：龈沟液ｐＨ是反映局部牙周微生态状况的一较好的客观参数,其变化的临床意义值得进一步研究。     

影响干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效因素分析

为了解重组干扰素α２ｂ治疗慢性乙型肝炎疗效的影响因素,对住院治疗的１０８例慢性乙型肝炎进行研究。治疗前所有病例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ均阳性,ＡＬＴ均大于正常值３倍。结果发现,总有效率女性高于男性（Ｐ＜００５）;病程短于３年者明显优于长于３年者（Ｐ＜００１）;ＣＡＨ明显高于ＣＰＨ（Ｐ＜００１）。９例治疗无效者,２例检出前Ｃ区变异;１例野生株和变异株混合感染者疗程结束后表现为无效。４７例治疗无效者（包括部分复发者）,检出干扰素中和抗体２例;结合抗体６例。治疗期间有类流感症状者显效率明显高于无反应者（Ｐ＜００１）;总有效率高于无反应者（Ｐ＜００５）。治疗中ＡＬＴ升高大于基值２倍以上者疗效更好（Ｐ＜００１）。结果表明,干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效的影响因素较多。     

有关检测雌激素、孕激素、雌激素受体和孕激素受体水平的技术性探讨

应用兔抗雌二醇抗体、兔抗孕酮抗体,鼠抗雌激素受体和鼠抗孕激素受体抗体来检测乳腺癌等病例,结果显示,兔抗雌二醇抗体和兔抗孕酮抗体所标记的病例的阳性物主要见于癌细胞胞浆,应用石蜡切片且不经任何方法处理的结果为最好。应用鼠抗雌激素受体抗体和鼠抗孕激素受体抗体和鼠抗孕激素受体抗体的病例,阳性物见于癌细胞的胞核上,但需要用隔水热抗原修复法经较长时间的处理后,方能获得最佳结果。     

DNA氧化损伤的免疫组织化学研究

采用目前公认的DNA氧化损伤标志物8-OHdG的单抗,利用LSAB法研究不同年龄组BALB/C小鼠胸腺和脾脏8-OHdG的生成水平,对免疫组织在衰老过程中DNA氧化损伤的水平进行免疫组织化学研究。以探讨免疫系统的自由基损伤对衰老的影响。结果表明,在胸腺,8-OHdG^ 细胞密度随增龄而增多,并主要位于髓质区;脾脏中的阳性细胞则无明显的增龄性变化,但胸染形态却存在明显差异。本研究结果显示,衰老过程中,免疫细胞内8-OHdG含量发生改变,免疫系统受到了氧自由基的损伤。8-OHdG可作为免疫老化过程中的一种生物标志。     

大鼠小脑缺血再灌注损伤的细胞凋亡及尼莫通的保护作用

采用四血管闭塞法制作全脑缺血再灌动物模型, 再灌后４８ 小时取小脑, 石蜡包埋切片。应用末端转移酶介导的缺口末端标记法原位检测到小脑皮质及小脑核有阳性反应的凋亡细胞, 表明细胞凋亡是迟发性神经元损伤的主要形式。缺血前３０ 分钟给以尼莫通能有效地减少细胞凋亡, 尼莫通对小脑缺血再灌注损伤有显著性保护作用     

EnVision与特异性抗体的一步法免疫组织化学标记

探讨En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果。筛选适合于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体（En Vision）分别与72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂,将两步标记法变为快速微波一步法,并对2100余例各种良性和亚性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大发特异性抗体的特异性和敏感性与标准En Vision法相似,其中46种特异性抗体结果稳定,重复性佳;14种特异必抗体稳定性欠佳,但临用前新配制效果仍较理想;12种不理想,不主张用于此法,结果表明En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术。适用于临床病理快速免疫组化诊断,但对所用的特异性抗体应注意选择。     

鼻咽癌组织中蛋白酶ICH的表达及其与bcl-2的表达关系

探讨蛋白酶ＩＣＨ１ 与凋亡基因ｂｃｌ２ 的关系及在鼻咽癌发生中的作用。应用免疫组化方法对４６例鼻咽癌组织中ＩＣＨ１ （ＩＣＨ１Ｌ和ＩＣＨ１Ｓ） 和ｂｃｌ２ 的表达进行观察。结果发现１１ 例良性病变中２ 例ＩＣＨ１Ｌ阳性, １ 例ＩＣＨ１Ｓ阳性。４６ 例鼻咽癌中１６ 例ＩＣＨ１Ｌ阳性, ２２ 例ＩＣＨ１Ｓ阳性, 阳性率分别为３４８％ 和４７８％ , 各组织学分型间无明显差异（Ｐ＞ ００５）。癌细胞ＩＣＨ１ 表达较良性病变增加, 但ＩＣＨ１Ｌ与良性病变比较无显著性差异 （Ｐ＞ ００５）。良性鼻咽上皮ｂｃｌ２ 阴性。４６ 例鼻咽癌中３８ 例ｂｃｌ２ 阳性, 阳性率为８２６％ , ｂｃｌ２ 表达与组织分型也无明显关系 （Ｐ＞ ００５）。ＩＣＨ１Ｌ与ｂｃｌ２ 呈反向表达关系。提示ＩＣＨ１ 和ｂｃｌ２ 表达异常可能与鼻咽上皮的癌变有关。ｂｃｌ２ 对ＩＣＨ１Ｌ表达可能有影响。     

异丙肾上腺素对大鼠心内神经节中生长抑素(SS)影响的研究

研究异丙肾上腺对心内神经节中肽能神经递质 SS的影响 ,本文在大鼠皮下注射异丙肾上腺素 5 m g/ kg,连续三天 ,固定后取心房后壁 ,用免疫组织化学结合图像分析方法观察大鼠心内神经节中肽能递质 SS的变化。对照组大鼠心内神经节中含有 SS免疫反应 (SS- IR)阳性神经纤维和细胞 ;实验组大鼠心内神经节中 SS- IR阳性神经纤维和神经元的积分光密度均明显减低。结果说明异丙肾上腺素可降低心内神经节中 SS含量 ,提示 ,异丙肾上腺素的正性变时和变力作用可能通过降低 SS的含量来实现。     

人正常腺上皮组织中MUC6基因的表达

应用免疫组织化学和原位杂交方法检测人正常腺上皮中MUC6基因的表达,揭示MUC6基因在正常人腺上皮组织中的分布异质性及其特点.结果显示MUC6基因编码的核心蛋白及其mRNA主要分布于正常胃粘膜胃腺的基底部,上皮细胞无MUC6基因表达,呈细颗粒状,位于细胞核周,胃底、胃窦的表达无区别;十二指肠绒毛上皮内的表达呈弥漫性,均质状,杯状和柱状细胞的表达类似,杯状细胞的粘液滴内未测得MUC6基因产物;空肠、结肠组织中无MUC6基因的表达;胆囊上皮组织内有强阳性MUC6核心蛋白的表达,而宫颈上皮中表达较弱.实验提示MUC6基因的表达存在异质性及器官特异性.     

An antigen retrieval method using an alkaline solution allows immunoelectron microscopic identification of secretory granules in conventional epoxy-embedded tissue sections.

Immunoelectron microscopy using chromogranin A-specific antibodies has been proposed as an efficient technique for identification of secretory granules (SGs) in tumor cells with evidence of apparent neuroendocrine differentiation. Using an antigen retrieval (AR) method, we succeeded in immunolabeling SGs with antibodies in ultrathin sections of routinely processed epoxy-embedded blocks of tissue. Samples of an insulinoma were fixed in 2% glutaraldehyde, postfixed in 1% OsO(4), and embedded in epoxy resin. Ultrathin sections were immunostained with chromogranin A-specific antibodies and gold-conjugated second antibodies. There was no significant labeling in the absence of AR. Neither etching with sodium metaperiodate nor microwave irradiation of ultrathin sections in citrate buffer (pH 6.0) or in EDTA buffer (pH 8.0) was effective in improving the efficiency of immunolabeling. However, ultrathin epoxy-embedded sections that were microwaved in alkaline solution (pH 10) were adequately labeled (5.2 +/- 0.34 particles per SG). Moreover, considerably improved efficiency of immunostaining was achieved by microwaving sections in alkaline solution (pH 10) with subsequent immunostaining at 60C (12.2 +/- 0.51 particles per SG). This method can also be applied to epoxy-embedded sections obtained from formalin-fixed, paraffin-embedded blocks of tissue and was even valid for an old epoxy-embedded block of tissue prepared 15 years previously.     

Optimizing collagen antigen unmasking in paraffin-embedded tissues

In order to optimize collagen antigen unmasking in paraffin-embedded tissue sections, the effects of various fixatives and duration of fixation in relation to enzyme pretreatment and microwave irradiation for collagen antigen unmasking were studied. A streptavidin--biotin-- peroxidase complex method was used for the immunolocalization of type III and IV collagen antigens. Fixatives and fixation time had significant adverse effects on the immunoreactivity of the antigens. Enzyme pretreatment was found to be superior to microwave irradiation for collagen antigen unmasking. Fixation with paraformaldehyde required shorter enzyme pretreatment and yielded a more enhanced reaction than treatment with formalin and Bouin's fluid. The optimum conditions for type III and IV collagen unmasking were found to be fixation with 4% paraformaldehyde in 0.01 m phosphate-buffered saline, pH 7.4, for up to 3 weeks followed by enzyme pretreatment with 1 mg ml−1 pepsin in 0.01 n hydrochloric acid, pH 2.0, for 30 min (human tissues) or 60 min (rat tissues) at 37°C. It is concluded that collagen antigen unmasking by enzyme pretreatment in tissue sections fixed for a long period of time can be successful if appropriate enzyme(s) and incubation time(s) are employed with regard to the antigen under study and fixative and fixation time used for tissue preparation     

Optimizing collagen antigen unmasking in paraffin-embedded tissues

In order to optimize collagen antigen unmasking in paraffin-embedded tissue sections, the effects of various fixatives and duration of fixation in relation to enzyme pretreatment and microwave irradiation for collagen antigen unmasking were studied. A streptavidin--biotin-- peroxidase complex method was used for the immunolocalization of type III and IV collagen antigens. Fixatives and fixation time had significant adverse effects on the immunoreactivity of the antigens. Enzyme pretreatment was found to be superior to microwave irradiation for collagen antigen unmasking. Fixation with paraformaldehyde required shorter enzyme pretreatment and yielded a more enhanced reaction than treatment with formalin and Bouin's fluid. The optimum conditions for type III and IV collagen unmasking were found to be fixation with 4% paraformaldehyde in 0.01 m phosphate-buffered saline, pH 7.4, for up to 3 weeks followed by enzyme pretreatment with 1 mg ml−1 pepsin in 0.01 n hydrochloric acid, pH 2.0, for 30 min (human tissues) or 60 min (rat tissues) at 37°C. It is concluded that collagen antigen unmasking by enzyme pretreatment in tissue sections fixed for a long period of time can be successful if appropriate enzyme(s) and incubation time(s) are employed with regard to the antigen under study and fixative and fixation time used for tissue preparation