急性应激后大鼠胃肠道病理变化及其菌群ERIC-PCR图谱分析

研究基于水浸束缚应激法建立大鼠急性应激模型的可行性并观察大鼠胃、回肠、盲肠、结肠病理学变化及其菌群图谱变化规律。选取健康雄性SD大鼠为研究对象,随机分为对照组和模型组。对照组正常饲养,模型组采用异氟烷吸入麻醉后置于自制束缚笼,待其苏醒后于23±2℃水浴5 h,造模前后记录大鼠的体重并于造模后依次进行旷场实验和强迫游泳实验。最后脱臼处死并收集胃、回肠、盲肠、结肠组织及其内容物,分别进行HE染色和ERIC-PCR扩增鉴定,采集图像并对比分析急性应激前后大鼠胃肠道病理变化及其菌群图谱分布规律。与对照组相比,造模前后大鼠体重基本无变化、穿越次数显著降低、直立次数显著降低、理毛次数显著降低、强迫游泳不动时间显著延长。同时,造模前后大鼠胃粘膜及肠道微绒毛等结构保存完好,无细胞核深染等,胃肠道菌群均出现明显变化的特征条带。建立了大鼠急性应激模型,结合HE染色及ERIC-PCR技术为基于大鼠急性应激模型研究肠道菌群图谱特征及变化规律等提供了重要参考。     

慢性避水应激大鼠肠道菌群和ROS的变化

目的探讨应激诱导的内脏高敏感大鼠中肠道菌群及活性氧簇(ROS)的变化。方法建立慢性避水应激大鼠模型,分为应激组和对照组(每组6只)。腹部回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)方法评估大鼠内脏敏感性。免疫荧光和ELISA方法检测肠道和血液中ROS的表达水平。粪便进行16S rDNA菌群测序分析。细胞培养方法检测大鼠结肠黏膜菌群代谢产物对巨噬细胞ROS生成的影响。结果慢性避水应激能诱导大鼠内脏敏感性增高。与对照组相比,应激组大鼠肠道和血液中ROS表达均增加,不同水平上肠道菌群都有所变化,生物多样性下降。Spirochaetia菌的丰富度与ROS的表达呈负相关。应激组大鼠结肠黏膜菌群诱导巨噬细胞产生更高水平的ROS。结论应激诱导大鼠肠道菌群发生紊乱引起ROS生成增加并存在相关性。     

应激所致肠功能紊乱大鼠模型的建立及内源性标志物的评价

目的探讨应激所致肠功能紊乱大鼠模型建立和评价的方法。方法 SD大鼠随机分为肠功能紊乱模型组和正常组,模型组采用慢性束缚＋过度疲劳＋饮食失调法造模,3周后取血,用酶联免疫法（ELISA）试剂盒在血清测GAS、IL-2,在血浆中测ACTH、MTL、SS。结果模型组大鼠3周后与正常组相比,外观行为发生明显变化,体重和肝脾重量显著降低,生物标志物水平降低。结论通过慢性束缚＋过度疲劳＋饮食失调法可以建立稳定的应激肠功能紊乱大鼠模型,GAS、IL-2、ACTH、MTL、SS等内源性物质可作为模型的评价指标。     

慢性束缚应激对SD和Wistar大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨慢性束缚应激对Wistar、SD两种品系大鼠学习记忆能力的影响,为应激模型中实验动物的选择提供依据。方法对两种品系大鼠(Wistar、SD)采用每天束缚10 h,束缚28 d建立慢性应激模型。采用物体认知新物体识别实验和Morris水迷宫空间学习、工作记忆行为学检测方法,观察束缚应激对两种品系实验动物学习记忆能力的影响。结果束缚28 d后,物体识别实验中,Wistar、SD模型组的辨别指数(discrimination index,DI)均低于对照组,但只有SD两组间差异存在显著性(P0.05);水迷宫空间学习阶段,SD模型组潜伏期高于对照组,第5天差异有显著性(P0.05),而Wistar模型组与对照组间的潜伏期没有差异;水迷宫工作记忆阶段,SD大鼠模型组与正常组比较,潜伏期显著增加(P0.05),Wistar模型大鼠的潜伏期与对照组比较没有显著差异。结论新物体识别实验和水迷宫实验,这两种反应动物不同学习记忆能力的行为学实验结果都表明,慢性束缚应激(10 h,28 d)对SD大鼠学习记忆能力的损伤较Wistar大鼠明显。SD大鼠可能更适合作为慢性应激所致学习记忆损伤动物模型。     

螺旋藻对慢性应激大鼠结肠菌群和体重的影响

目的观察螺旋藻对慢性应激大鼠结肠菌群和体重的保健作用。方法采用SD大鼠慢性应激模型,实验期为7周。用平板计数法检测大鼠肠道菌群。结果慢性应激大鼠粪便中发生明显的以双歧杆菌数量下降为特征的菌群失调现象,进食含5%螺旋藻饲料的大鼠粪便中双歧杆菌数量显著增加,肠杆菌相应减少,体重相应增加。结论在慢性应激条件下,饲喂螺旋藻能够有效维持大鼠肠道微生态平衡,促进大鼠生长。     

慢性应激所致抑郁大鼠Treg细胞和Th17细胞表达水平的变化

目的：了解慢性应激所致抑郁大鼠外周血Treg细胞和Th17细胞比例的变化。方法：筛选16只同质性均一的健康成年雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为正常对照组和模型组（n=8）。正常对照组不给予任何干预处理,模型组采用慢性不可预知温和刺激（CUMS）和孤养法来制备抑郁模型。在造模的第7天、14天、21天运用蔗糖水偏好实验、旷场实验和体重变化率进行行为学评估,采用流式细胞术（FCM）检测两组大鼠外周血Treg细胞与Th17细胞比例的变化。结果：与正常组相比,应激第7天,抑郁组体重变化率及旷场评估结果无明显差异,应激第14天、21天,抑郁组体重变化率及旷场各项结果明显低于正常组（P<0.05,P<0.01）。应激第7天、14天,抑郁组蔗糖水偏好指数较正常组无明显差异;应激第21天,抑郁组蔗糖水偏好指数明显低于正常组（P<0.01）。应激第7天、14天,抑郁组Treg细胞水平与正常组比较无明显差异,应激第21天,抑郁组Treg细胞水平显著低于正常组（P <0.01）。应激第7天、14天、21天两组Th17细胞水平无显著差异。结论：慢性应激所致抑郁大鼠的Treg细胞水平降低,可能影响机体的免疫功能。     

水浸束缚应激模型在小鼠结肠损伤研究中的探索与实践

目的 探索不同造模时间对水浸束缚应激(water immersion restraint stress, WIRS)模型小鼠结肠损伤程度的影响，对比研究病理损伤程度和肠道菌群构成。方法 本研究共用34只KM小鼠，首先将18只小鼠随机分为对照组和WIRS4 h、12 h、24 h、36 h、48 h组，造模结束后，通过HE染色观察不同造模时间的结肠损伤程度。评估出较优的造模时间后，将16只小鼠随机分为对照组和WIRS24 h组，使用ELISA法检测结肠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)含量，使用16S rRNA测序检测结肠内容物的菌群组成改变。结果 WIRS各组结肠腔均出现不同程度弥漫性充血和泛红，HE染色显示WIRS小鼠出现炎症细胞浸润等病理改变。WIRS24 h组损伤较明显，与WIRS36 h、48 h组相比小鼠成活率高，TNF-α、IL-6、IFN-γ水平均显著升高(P<0.0001)。与对照组相比，WIRS24 h组小鼠结肠菌...     

茶籽皂苷对高脂血症大鼠肠道菌群的影响研究

本实验旨在研究茶籽皂苷对高脂血症大鼠肠道菌群的影响。60只雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组(10只,C组)和造模组(50只)。C组饲喂基础饲料,造模组饲喂高脂饲料。造模成功后,将造模组大鼠按体重随机分为模型对照组(H组)、阳性对照组(P组)、茶籽皂苷高、中、低剂量组(TSH组、TSM组、TSL组),并进行灌胃。灌胃4周后,用16S rRNA测序技术检测茶籽皂苷对肠道菌群的影响。结果显示:与C组相比,H组大鼠肠道菌群的丰度和多样性显著降低,其群落结构从门到属均发生显著变化。灌胃茶籽皂苷后,肠道菌群的丰度以及从门到属的群落结构也均得到有效调节,有益菌群相对丰度提升,致病菌群得到抑制。结果表明茶籽皂苷对由高脂饲料诱发的高脂血症大鼠的肠道菌群起到正向调节作用。     

疏肝、健脾、补肾复方对慢性束缚应激大鼠行为学和免疫功能的影响

目的　研究慢性束缚应激时大鼠行为学和免疫功能的变化以及疏肝、健脾、补肾三种中药复方对其影响。方法　用特制束缚架连续束缚 2 1d(或 7d) ,每天 3h的方法制作大鼠束缚应激模型 ,观察大鼠行为学和免疫功能的变化。结果　慢性束缚应激后 ,大鼠的行为学发生了明显的变化 ,血清IL - 1β 上升 ,IL - 2和IL - 6下降 ,并且随着束缚时间的延长变化越明显。结论　逍遥散、四君子汤和金匮肾气丸能改善大鼠行为学的变化 ,明显增强慢性束缚应激大鼠的免疫功能。     

前扣带皮层区域磷酸激酶Czeta在弗氏安全佐剂致炎性痛大鼠情绪反应中的作用

目的观察CFA致炎性痛模型大鼠的情绪反应,探讨前扣带皮层(ACC)磷酸激酶Czeta(PKCzeta)与炎性痛大鼠情绪反应的关系。方法 24只清洁级雄性SD大鼠随机分为空白对照组和模型对照组。足底皮下注射弗氏完全佐剂建立慢性炎性痛模型。动态观察各组大鼠造模前(base)、造模后3、7、14、21和28 d的体重和痛阈变化;观察造模后14、21、28 d所有大鼠在高架O迷宫中的总运动距离、开放臂运动距离、开放臂进入次数和开放臂停留时间百分比。观察造模后14、29 d所有大鼠在旷场中的总运动距离、中央象限运动距离、中央象限进入次数和中央象限停留时间。采用免疫印迹法检测造模后14 d和29 d健侧和患侧ACC区域PKCzeta蛋白表达。结果各个时间点两组大鼠体重差异无显著性(P0.05)。造模前,两组大鼠痛阈差异无显著性(P0.05);造模后1 d,模型对照组大鼠痛阈显著降低(P0.05),且在整个实验过程中均显著低于空白对照组(P0.05)。与空白对照组比较,模型对照组大鼠于模后28 d开放臂运动距离和开放臂停留时间百分比显著减少(P0.05),于模后29 d中央象限运动距离和中央象限进入次数明显减少(P0.05)。造模后29 d,模型对照组大鼠患侧ACC区域PKCzeta蛋白表达明显多于空白对照组(P0.05)。且开放臂运动距离、开放臂停留时间百分比、中央象限运动距离、中央象限进入次数与患侧PKCzeta蛋白表达变化呈负相关。结论 CFA诱导的慢性炎性痛大鼠可出现异常情绪行为;慢性炎性痛情绪样行为可能与ACC区域PKCzeta的高表达相关。     

复合因素建立亚健康小鼠模型

目的:复合因素建立与临床症状相似的亚健康小鼠模型。方法:采用强迫游泳、睡眠剥夺、装管束缚、夹鼠尾应激建立亚健康小鼠模型,通过小鼠外观、行为学数据及病理检测鉴定模型是否成功。结果:造模结束后,模型组小鼠外观、体重、自主活动量、避暗次数、绝望时间、力竭游泳时间与对照组小鼠相比差异显著(P0.05),病理结果显示模型组小鼠未见异常。结论:复合因素成功建立亚健康小鼠模型。     

黄酒对慢性应激大鼠肠道微生物的影响

目的 探讨黄酒对慢性应激大鼠肠道微生物的影响.方法 将45只SD大鼠制成慢性应激模型,并随机分为正常对照组、慢性应激对照组和慢性应激黄酒组.正常对照组、慢性应激对照组仅给予正常饲料喂食,慢性应激黄酒组饲料中每日添加酒精度为15.0％ (v/v)的黄酒5 mL,6周后处死大鼠,取肠道内容物做肠道乳酸菌、大肠埃希菌及真菌等微生物培养,数据采用统计学方法分析.结果 黄酒不影响大鼠的血糖变化,与正常对照组相比,慢性应激对照组乳酸菌明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01),大肠埃希菌和真菌数量增加,差异亦有统计学意义(P＜0.05);慢性应激黄酒组乳酸菌增多,差异有统计学意义(P＜0.05),大肠埃希菌和真菌数量减少,比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 慢性应激状态下,肠道微生物发生明显的变化,适量饮用黄酒能增加肠道益生菌,减少肠道致病菌或条件致病菌,维持肠道微生态平衡,对肠道微生物有一定的调节作用.     

艾灸干预不同穴位对束缚应激模型大鼠心理行为改变的影响

目的:观察艾灸不同穴位对束缚应激模型大鼠行为学改变的影响,进一步探讨艾灸对束缚应激所致心理行为改变的作用规律。方法:将35只雄性Wistar大鼠按分层随机法分为正常组、束缚应激模型组、艾灸百会(GV20)组、艾灸关元(CV4)组、艾灸足三里(ST36)组,每组各7只。除正常组外,余各组均采用自制布袋束缚大鼠30 min,每日1次,共20次,制备束缚应激大鼠模型,于造模第2天各治疗组捆绑固定后给予艾炷灸3壮,正常组及模型组捆绑束缚20 min,隔日一次,共10次。于造模前、造模后,治疗5次、10次分别采用高架十字迷宫检测各组大鼠开放臂进入次数比例(OE%)及开放臂停留时间比例(OT%)的变化。结果:①与造模前比较,艾灸百会(GV20)组大鼠造模后、治疗10次后OE%均降低明显,治疗5次后OT%升高明显,均有显著性差异(P<0.05),艾灸关元(CV4)组大鼠造模后OT%降低明显,有显著性差异(P<0.05),艾灸足三里(ST36)组大鼠造模后OE%和OT%、治疗10次后OE%均明显降低,均有显著性差异(分别为P<0.05,P<0.05,P<0.01);与造模刚结束比较,艾灸百会(GV20)组大鼠治疗5次后OE%与OT%均升高明显,均有显著性差异(P<0.05),艾灸关元(CV4)组大鼠治疗10次后OT%升高明显,有显著性差异(P<0.01),艾灸足三里(ST36)组大鼠治疗5次后OE%、治疗10次后OT%均明显升高,有显著性差异(分别为P<0.01,P<0.05);与治疗5次比较,艾灸百会(GV20)组、足三里(ST36)组大鼠治疗10次后OE%明显降低,艾灸关元(CV4)组大鼠治疗10次后OE%和OT%升高明显,均有显著性差异(P<0.05)。②与艾灸百会(GV20)组比较,艾灸关元(CV4)组与艾灸足三里(ST36)组大鼠在治疗5次、10次后OE%和OT%呈不同程度的升高或降低趋势,未见显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸不同穴位可一定程度改善慢性束缚应激所致大鼠焦虑心理行为的变化;关元(CV4)、百会(GV20)、足三里(ST36)三穴均表现出一定抗焦虑效应,百会(GV20)穴在治疗早期效果显著,足三里(ST36)穴的疗效肯定,而关元(CV4)穴在长期治疗中效应更为稳定、明显,具有相对特异性。     

小檗碱对肠易激综合征大鼠肠道菌群的影响

目的通过口服小檗碱(Berberine,BBR)治疗大鼠肠易激综合征(IBS),初步研究小檗碱对IBS大鼠肠道菌群的影响。方法用避水应激试验制作大鼠IBS模型,分别给予模型大鼠小剂量(25mg/kg)小檗碱、大剂量(100mg/kg)小檗碱和利福昔明干预治疗10d,检测大鼠肠道菌群丰度、生物多样性及菌群结构组成的变化。结果避水应激试验造模后模型组大鼠排便次数增多、腹外斜肌EMG明显升高,肠道可见微炎症表现。小檗碱干预后,IBS大鼠排便增多情况、内脏高敏感性和肠道微炎症情况均显著改善,其中大剂量小檗碱组优于小剂量组。经小檗碱干预后,大鼠肠道菌群多样性显著降低,大剂量小檗碱抑菌作用强于小剂量小檗碱。大剂量小檗碱可显著提高IBS大鼠肠道乳杆菌科细菌的比例,同时降低肠杆菌科细菌的比例。结论小檗碱可以显著降低IBS大鼠内脏高敏感性,改善肠道微炎症,减少IBS大鼠排便增多症状。小檗碱可以调节肠道菌群丰度和多样性,且剂量越大,抑菌作用越明显。肠道乳杆菌科细菌在小檗碱治疗肠易激综合征的过程中可能起一定作用。     

逍遥散对CUMS模型大鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的:观察逍遥散对慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠的行为学及脑内单胺类神经递质含量的影响。方法:应用慢性温和不可预知应激程序对大鼠进行为期11周的造模,造模后3周,分别采用逍遥散(19.5g/kg、25.0g/kg)和丙咪嗪(15.0mg/kg)对模型大鼠进行为期8周的治疗。实验进程中,定期测定大鼠体重、糖水消耗量;应用开场实验测定大鼠爬行格子数和站立次数;造模、治疗结束后处死大鼠,解剖分离大鼠皮层和海马部位,采用荧光分光光度法测定5-HLAA、5-HT、DA和NE含量。结果:与正常对照组比较。大鼠造模后3周糖水消耗量、爬行格子数和站立次数均明显减少(P<0.01);与模型对照组比较,逍遥散19.5、25.0g/kg连续给药2周能显著增加糖水消耗量,但给药4周、7周对糖水消耗量影响不明显;与模型对照组比较,逍遥散25.0g/kg连续给药7周,对大鼠体重、爬行格子数和站立次数表现出提高趋势(P>0.05),逍遥散25.0g/kg连续给药8周,能明显提高模型大鼠皮层部位5-HT含量及海马部位5-HIAA含量(P<0.05,P<0.01)。结论:逍遥散对CUMS抑郁模型大鼠表现出抗抑郁作用,作用机制与影响脑内单胺类神经递质5-HT活性有关。     

二甲双胍对慢性应激大鼠抑郁行为的影响

目的:观察二甲双胍对慢性不可预测性温和应激大鼠抑郁行为的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为4组(n=10):对照组(CON组)、二甲双胍组(MET组)、模型组(CUMS组)、模型+二甲双胍组(CUMS+MET组),采用慢性不可预测性温和应激(CUMS)方法,用3周时间建立大鼠抑郁模型。造模完成后,两个二甲双胍组腹腔注射二甲双胍(100mg/kg),对照组和模型组注射等量的生理盐水,每天1次,连续2周。之后检测大鼠体重增长变化、糖水嗜好、强迫游泳和悬尾不动实验、旷场实验等大鼠行为学的改变,采用尼氏染色观察大鼠海马形态结构变化。结果:与对照组比较,CUMS组大鼠体重增长明显减慢(P<0.05),糖水偏爱率明显降低(P<0.05),强迫游泳和悬尾不动实验中不动时间明显延长(P<0.05),旷场实验中自发活动明显减少(P<0.05),大鼠海马的形态结构有所变化,证实CUMS抑郁模型建立成功。与CUMS组比较,二甲双胍处理后对大鼠的体重无明显影响,但能明显改善CUMS抑郁模型大鼠的糖水摄入、不动时间和自发活动(P<0.05),并能修复CUMS大鼠海马的异常形态结构变化。结论:二甲双胍对CUMS诱导的大鼠抑郁行为具有明显的改善作用,为临床糖尿病并发抑郁症的患者提供新的治疗手段。     

主动脉弓缩窄术诱导心力衰竭大鼠的肠道菌群变化特征

目的 探讨主动脉弓缩窄术（TAC）诱导心力衰竭（简称心衰）大鼠的肠道菌群变化特征。方法 将30只SD大鼠分为空白组（Norm组）、模型组（Mod组）和假手术组（Sham组），每组6只。Mod组大鼠采用TAC术制备为慢性心衰大鼠，对Sham组大鼠仅予开胸后缝合处理，Norm组则不予任何处理。造模10周后，采用超声心动图测量三组大鼠心功能情况，ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平，心肌和小肠组织行HE染色，收集肠道内容物行16S rRNA测序。结果 与Sham组相比，Mod组左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）明显下降（P<0.01）,NT-proBNP明显升高（P<0.01）。α-多样性分析显示，与Sham组比较，Mod组大鼠的OTU数量增加。PCoA分析显示，Mod组和Norm组菌群明显分开，Norm组和Sham组菌群分离不明显。在属水平上，与Sham组相比，Mod组埃希菌-志贺菌属（Escherichia-Shigella）、Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia、棒状杆菌属（Cor...     

低聚果糖对慢性应激小鼠抑郁样行为及 肠道菌群的影响

目的探讨低聚果糖(FOS)对慢性应激小鼠的抑郁样行为及肠道菌群的影响。方法选取8周龄健康雄性ICR小鼠随机分成3组,C组小鼠每天给予正常护理,S组和SF组小鼠每天随机给予1～2种应激源,持续8周,SF组小鼠在应激造模的同时经食物补充FOS。在造模4周和8周后,分别通过强迫游泳、蔗糖偏好试验评估各组小鼠抑郁样行为。造模结束后通过Western blot试验检测小鼠大脑皮层内糖皮质激素受体(GR)的表达,并收集结肠内容物进行16SrDNA扩增子测序分析。结果应激造模8周后,C、S和SF三组小鼠的肠道菌群组成存在明显差异;与C组相比,S组小鼠强迫游泳的不动时间显著增加(t=3.970,P=0.0009),蔗糖偏好率显著降低(t=3.890,P=0.0011),脑内GR的表达显著降低(t=4.311,P=0.0125);与S组相比,SF组小鼠强迫游泳的不动时间显著缩短(t=3.495,P=0.0026),蔗糖偏好率和脑内GR表达有增加趋势。结论益生元FOS可调节肠道菌群,改善慢性应激诱发的精神情绪异常。     

焦虑性抑郁模型大鼠脑区单胺递质含量与神经因子表达的变化

目的研究焦虑性抑郁模型大鼠海马、杏仁核、前额叶皮质内单胺递质的含量变化及脑内神经营养因子的表达趋势,探讨其可能的发病机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组、溶媒对照组、焦虑模型组、抑郁模型组、焦虑性抑郁模型组,每组12只。采用慢性束缚应激联合皮质酮注射的方法建立焦虑性抑郁大鼠模型,造模时间为21 d,造模结束后采用高架十字迷宫测试,旷场实验,强迫游泳实验评价大鼠的焦虑和抑郁样行为,HPLC-ECD法检测大鼠海马、杏仁核、前额叶皮质的单胺递质5-HT、NE、DA含量,蛋白印迹法检测大鼠各脑区神经营养因子BDNF、NT-3的含量。结果焦虑性抑郁模型组大鼠在进入开臂的时间、次数、旷场中自主活动次数均与焦虑组相当,与对照组及抑郁组比较差异有显著性(P0.01或P0.05),在强迫游泳中的不动时间显著增加,与对照组及焦虑组对比差异有显著性(P0.01);同时,与对照组比较,焦虑性抑郁模型组大鼠海马5-HT、杏仁核及前额叶皮质区的5-HT和NE含量均显著下降(P0.01或P0.05);此外,与对照组比较,焦虑性抑郁模型组大鼠各脑区BDNF、NT-3含量显著下降(P0.01或P0.05),同时与焦虑组比较,BDNF含量显著下降(P0.05)。结论焦虑性抑郁模型组大鼠具有显著的焦虑及抑郁样行为,其发病机制可能与脑内海马、杏仁核、前额叶皮质区域的单胺递质含量降低及神经营养因子BDNF、NT-3表达下调有关。     

慢性应激抑郁状态对大鼠外周神经内分泌因子生物节律的影响

目的：探讨慢性不可预见性应激状态下大鼠外周神经内分泌因子昼夜节律的表达特点。方法：成年雄性SD大鼠60只,随机分为模型组和对照组（n=30）,采用束缚、摇晃、鼠笼倾斜、湿垫料、冷刺激、拥挤（整夜）、断食或断水、夹尾、昼/夜颠倒等慢性不可预知性温和刺激结合孤养方式,每天暴露于2种应激原中饲养21 d,建立抑郁症模型。测定应激前后大鼠糖水偏爱、旷场行为及高架十字迷宫行为学变化。连续24 h分6个时间点（ZT1、ZT5、ZT9、ZT13、ZT17、ZT21）处死动物取血,每个时间点处死5只大鼠。放免法测定6个时间点血清促肾上腺皮质激素（ACTH）含量,ELISA法测定6个相同时间点血浆皮质酮（CORT）、褪黑素（MT）、血管活性肠肽（VIP）含量,采用单一余弦法比较2组大鼠上述各指标的节律周期、振幅、峰值相位、中值的变化特点。结果：与对照组相比,模型大鼠体重增加值明显降低（P<0.01）,各项行为学评分均显著减少（P<0.01）。慢性应激至抑郁样行为充分表达后,血浆ACTH、CORT的相位完全相反,时相大幅度提前,含量波动幅度减小,昼夜分泌节律紊乱;MT的24 h分泌节律完全丧失且整体水平下降,表达量显著降低;VIP虽仍存在24 h节律,但振幅明显降低,峰相位也延迟6 h,且表达量显著提高。结论：慢性应激抑郁状态可导致大鼠外周神经内分泌激素的近日节律非同步于SCN,表现为昼夜节律性和激素分泌量的异常。