新月弯孢霉原生质体硫酸二乙酯诱变的研究

以经紫外线诱变后获得的氢化可的松转化菌株新月弯孢霉 2 1 50 # 为出发菌株 ,经纤维素酶及溶菌酶作用形成原生质体 ,并对原生质体进行硫酸二乙酯 (DES)诱变 ,然后对大量的再生突变株进行筛选 ,获得高氢化可的松转化率菌株 8 68# ,其氢化可的松转化率较出发菌株提高了 56.8%。     

氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪合成的影响

该研究旨在探讨不同浓度的氢化可的松处理对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,BMECs)增殖、甘油三酯(triglyceride,TAG)合成、脂滴的形成以及乳脂肪合成相关基因表达的影响。采用单因子随机实验设计,以不添加氢化可的松组为对照组,处理组的氢化可的松浓度分别为1、10、100、1 000 ng/m L。各组细胞处理24 h后,通过四甲基偶氮唑盐(thiazoly blue tetrazolium,MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内TAG的含量;使用油红O染色法检测细胞内乳脂球的合成;采用实时定量PCR法检测乳脂合成相关基因的表达。结果表明,氢化可的松处理对BMECs增殖无显著影响(P0.05);与对照组相比,100 ng/m L氢化可的松组能够显著提高TAG的合成量、增加胞内脂滴的形成以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)的基因表达(P0.05);10 ng/m L和100 ng/m L氢化可的松组能够显著上调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、二酰甘油酰基转移酶(diacylgycerol acyltransferase,DGAT)的基因表达(P0.05);1、10、100 ng/m L氢化可的松组能够显著上调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)基因表达(P0.05),且1 ng/m L的促进效果最明显,而1 000 ng/m L则显著抑制了FASN的表达(P0.05)。该研究结果说明,氢化可的松能够促进BMECs乳脂肪合成,且100 ng/m L的剂量对乳脂合成的促进效果最佳。     

当归与激素合用对哮喘小鼠的治疗作用及其机制

目的：探讨当归与激素合用对哮喘小鼠的治疗作用及其机制。方法：取BALB/c小鼠随机分为对照组、血瘀模型组、哮喘模型组、氢化可的松组、当归组、氢化可的松与当归合用组（n=12）。采用卵白蛋白致敏、激发,复制哮喘模型;使用氢化可的松复制血瘀模型。观测当归、氢化可的松及其合用对小鼠血液流变学（全血黏度与血清TXB2含量）和哮喘（哮喘行为学、肺功能、肺指数与肺组织含水量）的影响,采用ELISA法、免疫组化法测定相关细胞因子和HMGB1/TLR4/NF-κB蛋白质的表达水平。结果：8 g/kg当归、0.05 g/kg氢化可的松及其合用可明显缓解哮喘行为学指标,提高肺功能,降低肺指数及肺组织含水量,降低BALF中TNF-α、IL-1β及IL-6水平,抑制肺组织HMGB1、TLR4及NF-κB蛋白质的高表达;当归与氢化可的松合用对提高哮喘小鼠肺功能、降低相关细胞因子（TNF-α、IL-1β及IL-6）水平明显优于单独使用当归组,抑制肺组织中TLR4和NF-κB蛋白质表达的作用优于单独使用当归或氢化可的松。二者合用后可缓解氢化可的松所致的小鼠血清TXB2含量升高、血液粘稠度增加。结论：当归与激素及其合用具有明显的平喘作用,抑制HMGB1/TLR4/NF-κB蛋白质合成是其平喘的机制之一。当归与激素合用改善肺功能的作用更强,可能与加强抑制TLR4/NF-κB合成有关。合用当归可缓解激素在治疗哮喘时引起的血液流变学异常变化。     

氟芬那酸丁酯软膏联合丁酸氢化可的松治疗儿童慢性湿疹及特应性皮炎的疗效

目的:探讨氟芬那酸丁酯软膏联合丁酸氢化可的松治疗儿童慢性湿疹及特应性皮炎的临床疗效。方法:选取我院诊治的110例慢性湿疹及特应性皮炎患儿作为研究对象,使用随机数字表法分为研究组和对照组(各55例),对照组单用丁酸氢可的松软膏治疗,研究组联合应用氟芬那酸丁酯软膏和丁酸氢化可的松软膏,比较两组患儿的治疗效果。结果:研究组治疗后的疾病积分显著低于对照组,P0.05;研究组的治疗总有效率为85.45%,对照组为63.64%,组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:临床治疗儿童慢性湿疹和特应性皮炎,联合应用氟芬那酸丁酯软膏和丁酸氢化可的松,具有显著疗效,且安全性好,值得推广。     

用固定化简单节杆菌细胞转化氢化可的松

前文报道了产3-甾酮-△′-脱氢酶的简单节杆菌固定化细胞的制备及其一般性质。本文将进一步报道该菌的固定化细胞对氢化可的松转化为氢化泼尼松的结果。     

脑炎原虫豚鼠感染模型的实验研究

[目的]建立脑炎原虫感染豚鼠模型,分析白化豚鼠和花色豚鼠在脑炎原虫感染动物模型建立中的异同点。[方法]动物分四组:花色组、白化组、花色应用氢化可的松组、白化应用氢化可的松组,16只/组。发病兔粪便中收集纯化脑炎原虫虫体,灌胃法接种豚鼠,染虫后不同时间点粪便捡虫观察豚鼠染虫率。造模后30天心脏采血,测免疫球蛋白含量,HE染色观察豚鼠主要脏器病变,纯化后虫体行电镜超微结构观察。[结果]接种之后7天内,未用氢化可的松的两组均未检出原虫,用氢化可的松的两组中,白化豚鼠最先在第3天检出,于第6天全部检出,而花色豚鼠最先在第4天检出,在…     

腺嘌呤与氢化可的松大鼠肾阳虚模型造模方法比较

目的比较腺嘌呤诱导与氢化可的松诱导的SD大鼠肾阳虚模型的优劣,从而得到临床症状、生化指标更符合中医“肾阳虚”型的动物模型,以供科研、教学使用。方法雄性SD大鼠100只,随机分成正常组、腺嘌呤造模组及氢化可的松低剂量组、中剂量组、高剂量组各20只,造模成功后检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿液中17-羟皮质类固醇（17-OH）和血浆中甲状腺激素（13、T4）、睾丸酮（T）、雌二醇（E2）及模型大鼠骨密度。结果无论从症状主证方面,还是客观指标方面（除骨密度外）,腺嘌呤诱导的SD大鼠肾阳虚型动物模型在生化指标研究方面均优于氢化可的松诱导组。结论腺嘌呤诱导的肾阳虚证SD大鼠模型在症状主证方面及其相关的生化研究方面优于氢化可的松组。     

简单节杆菌转化氢化可的松的△’一脱氢反应动力学II．固定化简单节杆菌细胞转化氢化可的松的△’-脱氢反应动力学

本文报道了简单节杆菌固定化细胞转化氢化可的松过程中固定化细胞颗粒度与有效系数的关系和底物初始浓度与有效系数及扩散系数的关系。随着固定化细胞颗粒度的增大,有效系数减小,固定化细胞颗粒的边长与西勒模数成正比,有效系数和扩散系数都随底物初始浓度的增加而减少。氧化可的松在固定化细胞中扩散系数的数量级为IO…m。／％固定化细胞转化氢化可的松的反应过程曲线与自由细胞的相似。用前文[1]中的产物抑制反应动力学方程(9)进行拟合时,其计算值与实验值相符。     

蝮蛇毒和眼镜蛇毒对全血化学发光的影响

目的研究蝮蛇毒和眼镜蛇毒对吞噬细胞的免疫抑制作用。方法以氢化可的松为阳性对照物,用化学发光法测定样品清除非细胞体系产生的活性氧,以及样品对酵母多糖诱导的全血化学发光的抑制作用。结果蝮蛇毒和眼镜蛇毒对非细胞体系产生的Ｏ·２和Ｈ２Ｏ２的清除作用都较弱;对全血化学发光有抑制作用,特别是酵母多糖起刺激作用之前加入蛇毒的抑制作用强于酵母多糖起作用之后加入蛇毒的抑制作用。这提示,这两种蛇毒使吞噬细胞的吞噬免疫功能下降,造成吞噬细胞的呼吸爆发减弱,导致活性氧产生不足,化学发光强度下降。眼镜蛇毒的这种免疫抑制作用比氢化可的松还强。结论蝮蛇毒和眼镜蛇毒具有氢化可的松样的免疫抑制作用,其中眼镜蛇毒可能具有作为临床免疫抑制剂使用的价值。     

氢化可的松高产菌株新月弯孢霉的选育*

应用酮康唑抗性筛选法,将经过紫外线诱变处理的甾体11β-羟基化菌株——新月弯孢霉的原生质体倾注在含有酮康唑最小抑制浓度(10μmol/L)的再生培养基平板上,再生出136株酮康唑抗性突变株。其中氢化可的松转化率高于出发菌株的有14株,正向突变率达到10．3％,同时获得了氢化可的松转化率为出发菌株1．42倍的遗传稳定突变株KA-91。     

亲水性糖皮质激素衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响

目的:观察糖皮质激素(GC)衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响,并探讨GC对巨噬细胞呼吸爆发的非基因组作用机制.方法:合成亲水性和疏水性的系列GC衍生物,分离并培养腹腔巨噬细胞,应用细胞色素C还原法检测PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子的能力.结果:获得了亲水性的GC衍生物氢化可的松-21-甘氨酸酯盐酸盐(HG)、氢化可的松-21-赖氨酸酯盐酸盐(HL)和疏水性的氢化可的松-21-苯丙氨酸酯盐酸盐(HP),HG和HL可显著促进PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子,HP无显著作用.结论:GC快速增加PMA刺激的巨噬细胞超氧阴离子产生是通过非基因组机制实现的,这一作用与疏水性有关.     

钴~(60)γ照射及腹注醋酸氢化可的松的小鼠对伊氏锥虫多态现象的影响

以不同剂量的醋酸氢化可的松分别处理感染伊氏锥虫无动基体株和水牛株的白化小鼠,结果表明50毫克/公斤的剂量对两个虫株短型的比例都有明显的影响,其中无动基体株的短型从感染后第3天的0.73％上升到第5天的4.4％,对照组为0.67％—0.73％;相反,水牛株短型的比例则从感染后第3天的6.3％下降到第5天的0.73％,对照组为0.73％—0.2％。200毫克/公斤的剂量对无动基体株的变异型有显著的影响,从感染后第3天的0.2％上升到第5天的1.9％。两虫株在经过钴~(60)r照射后再用醋酸氢化可的松处理的小鼠中亦表现出相似结果。实验结果表明宿主的免疫功能与伊氏锥虫的多态现象无实质的关系,而动基体的存在与否对适量的醋酸氢化可的松有较明显的反应。     

肾上腺皮质系统在应激反应中对大鼠巨噬细胞释放H_2O_2功能的抑制作用

大鼠经20h电刺激应激反应后,腹腔巨噬细胞释放H_2O_2量明显减少(P<0.001),双侧肾上腺摘除术可以对抗应激对巨噬细胞释放H_2O_2功能的抑制作用(P<0.001),而单纯摘除大鼠双侧肾上腺对巨噬细胞无明显影响。将与肾上腺有关的激素与巨噬细胞体外孵育20h后发现,去甲肾上腺素和肾上腺素对巨噬细胞无明影响;氢化可的松可以明显促进巨噬细胞释放H_2O_2功能;促肾上腺皮质激素可以明显抑制巨噬细胞释放H_2O_2功能(P<0.01)。大鼠在应激反应后血浆皮质酮含量明显升高(P<0.05)进一步观察氢化可的松任体内对巨噬细胞功能的影响发现,皮下注射氢化可的松可以明显抑制巨噬细胞释放H_2O_2功能(P<0.01)。以上结果提示应激对巨噬细胞释放H_2O_2具有抑制作用,这种抑制作用的产生与垂体-肾上腺皮质系统的凋节作用有关。     

游泳对大鼠阳虚状态的影响及数理分析

目的考察一次性游泳对氢化可的松粉针剂诱导大鼠阳虚状态指标的影响,以期暴露模型本身内隐的隐性测评指标并确定特征指标。方法将SD雄性大鼠随机分为正常组、正常游泳组、阳虚组、阳虚游泳组,阳虚组／阳虚游泳组肌注氢化可的松粉针剂20ms／kg,正常组／正常游泳组注射等量的0．9％氯化钠溶液,注射14d后,阳虚游泳组／正常游泳组辅以一次性游泳后,各组麻醉,取血,测定相关指标。结果阳虚游泳组C4、cGMP、TC、L阳虚隐性指标暴露,BUN、17-OHCS、T、T／E2、cAMP／cGMP阳虚评定指标凸显。结论非破坏性一次游泳可以使氢化可的松粉针剂诱导的大鼠阳虚证候模型的隐性指标凸显、部分显性指标放大,建议今后在建立、模拟阳虚证候模型时辅以游泳手段,以便客观、全面、真实的反映模型状态。     

四君子汤对免疫抑制小鼠肝脏细菌易位的影响

目的观察四君子汤对免疫抑制小鼠免疫功能及肝脏细菌易位的影响,探讨神经-内分泌-代谢-微生态-免疫网络之间的关系。方法应用氢化可的松制备小鼠免疫功能抑制模型,造成肝脏细菌易位;观察四君子汤对小鼠吞噬细胞功能的影响和细菌易位的控制,同时设自然恢复组和正常对照组进行比较。结果氢化可的松灌喂3d后,小鼠吞噬细胞的吞噬功能明显下降,肝脏出现大量细菌易位;经四君子汤治疗6h后,小鼠吞噬细胞吞噬功能显著提高。肝脏细菌易位明显减少。结论四君子汤能有效地控制免疫抑制小鼠肝脏细菌易位。     

发酵液中氢化可的松的几种测试方法

犁头霉菌在转化底物过程中,由于菌种羟化酶的多样性,除产生主要产物外还能产生一些付产物;如氢化可的松生产中,不仅生成皮质醇、还生成表皮醇等。反应式如下: 因     

中西医结合治疗婴儿湿疹疗效观察

目的观察中西医结合治疗婴儿湿疹的疗效。方法将87例婴儿湿疹患者随机分为治疗组和对照组,治疗组用中成药丹皮酚软膏与丁酸氢化可的松软膏,早用一种药膏晚另用一种药膏,日各1次,适量交替外涂患处;对照组用丁酸氢化可的松软膏适量外涂患处,早晚各1次。两组有渗出者均先用2%硼酸溶液湿敷,无渗出后方用膏剂外涂。结果两组有效率分别为93.18%和90.70%,无统计学差异(P>0.05)。结论中西结合治疗婴儿湿疹,能减少激素使用次数、使用量,减少激素可能导致的副作用,而获得同等疗效,且疗效确切,值得临床推广。     

高效液相检测醋酸氢化可的松杂质的方法建立

目的:建立高效液相法测定醋酸氢化可的松中杂质的检测方法。方法:采用色谱柱:Agela Venusil MP C18 4.6×250mm,流动相:磷酸盐缓冲液(取8mmol/L磷酸二氢钾溶液,用8mmol/L磷酸氢二钾溶液调节PH值至5.0,临用新制)-甲醇(62:38);检测波长:254nm;柱温:40℃测定。结果:采用此高效液相法能将杂质与主成分有效分离,专属性良好,准去度高,8小时内溶液较稳定,耐用性强,经检测限试验证明该方法能有效检出杂质。结论:该方法简便,准确度高,专属性好,建议采用高效液相法测定醋酸氢化可的松的杂质。     

氢化可的松生产菌—淡紫犁头霉的形态学观察

甾体化合物氢化可的松(即皮质醇11β.17α.21-三羟基-4-孕烯-3,20-二酮)是一种重要的肾上腺皮质激素,在临床上用于治疗肾上腺皮质功能紊乱;风湿性与类风湿关节炎、心肌炎等炎症;各种休克;多种眼疾和变态性疾病     

转化5a-娠烷-3β，17a-二羟基一20一酮-21-醋酸酯为氢化可的松诺卡氏菌62-1菌株和蓝色梨头霉AS3．65的协同转化

本文研究了诺卡氏菌(Noeardia) 62-1 菌株和蓝色梨头霉(Absidia coerulea) AS3.65在一起,转化5a-娠烷-3β,17a-二羟基-20-酮-21-醋酸酯一步生成氢化可的松的协同转化作用。由于诺卡氏菌62一l菌株的水解酶活性弱,A1一脱氢酶的活性强,所以在单独转化中形成RSA,P．S和ALRS等多种产物,但蓝色梨头霉有很强的水解酶活性并具11β一羟化酶,所以在和诺卡氏菌的协同转化中,只测到少量RSA和微量不欲得的△1-RS,生成的主要中间产物是RS,它紧接着进一步转化成氢化可的松,这是一种理想的转化方法。