香叶天竺葵的组织培养

植物名称:香叶天竺葵(Pelargonium graveolens)。材料类别:叶片、叶柄。培养条件:改良的MS为基本培养基,用固体和液体两种培养方法。固体培养基琼脂用量为7g/L,液体培养基不加琼脂,为防止材料沉没,在三角瓶内加入适量脱脂棉。愈伤组织诱导培养基为:(1)液培+BA 1.5～2mg/L(单位下同)+NAA 0.5～1;     

宣威乌头的组织培养与快速繁殖

1植物名称宣威乌头(Aconitum nagarum var.lasiandrum). 2材料类别茎尖及带腋芽的茎段. 3培养条件(1)丛芽诱导培养基:MS 6-BA 4.0mg.L-1(单位下同) NAA 0.2 0.1%活性碳 3.0%蔗糖 0.8%琼脂,固体培养;(2)增殖培养基:MS 2,4-D 0.2 ZT 1.0 GA 3.0 PVP 0.1% 3.0%蔗糖 0.8%琼脂,固体培养;(3)生根培养基:1/2MS大量元素 MS微量元素 铁盐 有机成分 NAA1.0 IBA 0.1 1.5%蔗糖 0.8%琼脂,固体培养7d后,转入不含任何激素的同类培养基中,即二步生根法使其生根.以上培养基pH均为5.8.培养温度为(24±2)℃,光照12 h.d-1,光照度1 500lx.     

液体培养基保存方法

近年来国内市场出售的营养琼脂(细菌基础培养基),很受广大微生物工作者欢迎,它只需加水灭菌后便能制成固体培养基。然而常用的真菌培养基,如麦芽汁培养基、马铃薯培养基、麸皮汁培养基、米曲汁培养基等,都要通过人工配制后再作成琼脂培养基,不可能制成营养琼脂。如果大量配制一次,在今后工作中随     

微生物培养基质量控制技术和标准*

微生物培养基的酸碱度、凝胶强度和选择性等直接影响到培养基的质量,在理化试验方法中采用连接可渗透陶器型液体接头的电极和平头电极或者连接微型探头的电极可分别测定液体和固体培养基的pH值,而采用Gelometer和theLFRATextureAnalyser可测定固体培养基的凝胶强度。在微生物学方法中固体培养基采用倾注平板法、涂布法、划线法(半定量法)、改良的Miles-Misra法等测定生长情况,液体培养基采用稀释法测定生长率,用目标菌和杂菌的混合菌株评价选择性增菌培养基的选择性,利用OD值评价液体培养基生长     

琼脂在微生物培养基中用量的科学表示法的探讨

琼脂（Agar）是微生物固体和半固体培养基中最常用的性能优良的凝固剂。琼脂的化学成分是聚半乳糖的硫酸酯［１］,根据其分散相质点的性质,它属于弹性凝胶,性质介于固体与液体之间,当其在凝胶状态时,显示出固体的一些力学性质,具有一定的弹性、强度和硬度等特性,这些特性在形成凝胶所需最低浓度值至形成干凝胶的范围内,随琼脂在介质中含量的增加而增加［２,３］。衡量其硬度的标准是凝胶强度（Gel strength）这个物理量（又称为陈力强度）,即将琼脂配成１.５％的溶胶,在温度为２０℃,凝胶厚度为３ｃｍ,长、宽各在小于或等于１…     

组织与原生质体培养

924098玉蝉花的离体繁殖〔英〕/Yabuya,T.…/Eup-hytiea一1991,57(i)一77~81仁译自DBA,1992,11(8),92一04510习 将玉蝉花(I:葱5 e.sata)23个变种和1个野生种的花萃培养在含1 mg/l NAA、1 mg/l BA、309/1蔗糖和109/l琼脂的固体MS培养基上。试验了下列培养基改变的情况:全或半量MS培养基;固体(109/l琼脂)或液体(滤纸桥法)培养基,蔗糖浓度为30、eo和909/l:活性炭(109/l)。所有培养物保存在25℃、光下。有3个变种显示明显的苗诱导率,但它们发根效果不佳。结果表明,补加1mg/1 NAA、img/1 BA、309/l蔗糖和109/l琼脂的半量MS培养基最适于…     

山茶花的组织培养

植物名称:山茶花(Camellia japonica)。材料类别:茎尖。培养条件:所用培养基为改良ER固体培养基,附加BA2.5mg/l,IAA1.5mg/l,琼脂 6g/l,     

番茄子叶原生质体再生植株

从番茄2—3周苗龄的子叶游离原生质体,在 MS 液体培养基中(附加2,4-D 1,6-BA 0.1mg/l)培养;在培养过程中经常不断添加新鲜培养液。6周后将细胞团移到半固体 MS 培养基上(附加成份同上,琼脂0.3%)。然后将肉眼可见的愈伤组织再移入 MS 固体培养基上,愈伤组织长到直径为5 mm 大小时,转到 MS 分化培养基上(附加6-BA 2 mg/1,[AA 0.2 mg/l)诱导分化,得到了再生植株。比较了固体培养、悬浮培养和双层培养三种方法,观察原生质体生长情况,以双层培养为好。     

培养基琼脂浓度及抗生素对3种海洋微藻生长的影响

目的:确定用于分离、纯化及保种所用的固体培养基中优化的琼脂浓度和利于微藻生长并抑菌的抗生素浓度。方法:设计固体培养基中的琼脂浓度以及培养液中抗生素的种类和浓度,定时测定培养体系中三种微藻的生物量及细菌菌落随培养时间的变化。结果:利于固体培养基上三种微藻生长的琼脂浓度均为0.6%~0.8%;牟氏角毛藻用200IU/ml的庆大霉素和200IU/ml的青霉素联合作用,球等鞭金藻8701和盐藻分别用300IU/ml和400IU/ml的青霉素时可保证微藻较好生长。结论:不同微藻生长所需的抗生素浓度不同,抗生素对微藻生长的影响不完全取决于抑菌作用,青霉素促进球等鞭金藻8701生长主要是产生促生长因子,庆大霉素抑制生长可能是产生抑制因子。     

鉴别脑膜炎球菌用的半固体糖发酵管

我们曾将黄豆浸液玉米淀粉抗菌素培养基用于脑膜炎球菌的培养,效果很好。在1976和1983年对健康人群脑膜炎球菌带菌调查时,将黄豆浸液玉米淀粉配制成半固体糖发酵管,鉴别脑膜炎球菌结果仍较满意。半固体糖发酵管的培养基制备方法是:(1)基础培养基(g):胰胨6,脉胨6,氯化钠3,牛肉膏3,琼脂3,蒸馏水800 ml,加热溶化。(2) 玉     

分枝杆菌全合成琼脂培养基的研究

本文报道了一种适合常见致病分枝杆菌生长的全合成固体琼脂培养基体系。它为实验室研究分枝杆菌的营养生理、生化特性、遗传变异、药理和耐药机制提供了一种新工具,也为研制更加满意的分枝杆菌培养基创造了条件。试验过的大多数非典型分枝杆菌,在全合成琼脂培养基上比在罗氏培养基上生长快,生长量少于或等于罗氏培养基。标准牛型株的细胞群体中,仅有少量细胞能在全合成琼脂培养基上生长。鸟型．胞内和偶发等分枝杆菌标准株在全合成琼脂培养基上产生两种不同的菌落。     

组织培养基光诱导降解的预防

广泛用于植物组织培养基中的天然植物生长素(吲哚乙酸,IAA)在热或光条件下迅速降解。加利福尼亚大学S.J.Nissen和E.G.Sutter发现,普遍用于植物组织培养的人工合成的生长素(吲哚丁酸IAA)在液体MS培养基中对光的稳定性强于IAA,但在固体MS培养基中和IAA一样迅速地降解。他们推测,稳定性的差异是由于琼脂中的盐、微量成分和杂质与光相互作     

土豆汤琼脂培养基培养分枝杆菌的研究

本文报道了一种土豆汤琼脂培养基系统,试验过的16株各群分枝杆菌都能在该培养基上生长。大多数分枝杆菌在土豆汤琼脂培养基上的初生长时间快于罗氏培养基。分枝杆菌H_(37)R_v、鸟型,胃型、堪萨斯、脓肿、不产色和偶发等标准株,在一些土豆汤琼脂培养基上产生两种不同的菌落。初步的研究表明,土豆汤琼脂培养基还可用于胸水、痰内结核杆菌的培养。土豆汤琼脂培养基系用传统的琼脂培养基制作方法,价格低廉,适合在发展中国家的实验室和国内医院检验科推广使用。     

人外周血B淋巴细胞在琼脂培养基内的增殖特性

近年来建立的淋巴细胞集落培养技术,无疑地将促进人们对于淋巴细胞的了解。J.Radnay 等于1979年用双层琼脂培养技术,以 Pokeweed 为丝裂原,获得人外周血 B淋巴细胞集落。Izssuirre 等将 B 淋巴细胞悬液接种到含有3×105/ml 受照射的自身或同种T 淋巴细胞、20%T 淋巴细胞条件培养基和0.8%甲基纤维素的培养体系内,用 Pokeweed作丝裂原,也培养出人的 B 淋巴细胞集落。本文将介绍以脂多糖(LPS)、小鼠红细胞(MRBC)及牛血清白蛋白(ESA)为丝裂原,用单层琼脂培养技术,研究人外周血 B 淋巴细胞在琼脂培养基内的增殖情况。     

龟背竹的组织培养快速繁殖

植物名称:龟背竹(Monstera deliciosa)材料类别:茎尖及腋芽。培养条件:茎尖及腋芽切下后用0.1％HgCl_2消毒8～10 min,然后用无菌水冲洗4～5次,在无菌条件下剥去外层芽苞接种到附加有BA2mg/L和IAA1mg/L的固体MS培养基上培养。生根培养基用1/2MS附加NAA0.5mg/L,活性炭0.2％。培养基均用糖30g/L,琼脂5.5g/L,pH5.8～6.0;     

红色诺卡菌固体培养基配方的优化

应用响应面优化设计法优化固体培养基配方,增大红色诺卡菌的固体培养细胞生物量。首先用Plackett-Burman法从现有培养基组分中找到影响红色诺卡菌细胞生物量的关键因素,再通过最陡爬坡法确定细胞生物量最大的配方,用作中心组合设计(Central Composite Design, CCD)实验的基础起始值,拟合数学模型方程,最后找到最优组分的组合。优化的配方转移至企业实施放大实验,对结果进行验证和比较。试验结果表明,培养基各组分中影响红色诺卡菌细胞生物量的关键因素为蛋白胨、NaCl、牛肉膏;最优固体培养基配方:蛋白胨42 g/L、牛肉膏8 g/L、NaCl 1.2 g/L、甘油10 mL/L、Na_2HPO_4·12H_2O 0.3 g/L、琼脂20 g/L。在细胞生物量方面最优固体培养基配方比原配方高104%。响应面优化设计可用于提高红色诺卡菌细胞生物量固体培养基的优化,也为红色诺卡菌培养条件、液体发酵的优化研究提供参考。     

应用聚氨酯海绵小块作植物组织培养的支持物

琼脂是植物组织培养中常用的固体培养基凝固荊,用量大,成本也较高。并且各种牌号的琼脂纯度很不一致对某些植物效果不佳。为此我们甩聚氨酯海绵代替琼脂作液体培养的支持物,效果很好。具体操作是把厚约0.5cm厚的聚氨酯海绵洗净、烘干,剪成0.8～1cm见方的小块。用1.2kg/cm~2压力高压灭菌半小时,烘     

肉毒梭菌培养条件的初步比较试验小结

为了配合肉毒梭菌检验工作的开展,我们用实验室保存的各型(A～F)肉毒梭菌菌种对培养基的类型、培养温度及培养时间等条件进行了生长与产毒的初步比较试验。权衡各个因素,我们认为采用明胶琼脂半固体培养基和30℃的培养温度这个统一条件较好;培养3至5天,对于所有各型的生长或产毒,均可获得符合检验要求的结果。     

地灵的组织培养与快速繁殖

1植物名称地灵(Stachys floridana),又称银条. 2材料类别根茎和茎段. 3培养条件(1)起始培养基:MB 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同) KT 1.0 NAA 0.5;(2)不定芽诱导培养基:MB 6-BA 1.0 KT 1.5;(3)分化培养基:MB IAA 1.0 KT 0.5;(4)生根培养基:1/2MB 6-BA 1.0 NAA 2.0.上述培养基中均添加3%蔗糖、0.55%琼脂,pH 5.6.培养温度25～28℃,光照12～14 h·d-1,光照度2 000～3 0001x.     

直接培养法检测支原体方法的建立

采用牛心消化液,加入支原体营养成份及琼脂,制备成固体培养基。以此培养基检测支原体,并根据其灵敏度及适用性确定培养基的配方。结果表明,用此法可以检测牛血清、胰酶、细胞及疫苗中的支原体生长,并且检测时间短,重复性好,灵敏度高,可以用于生物制品的质量控制。