假俭草的组织培养与植株再生

1植物名称假俭草(Eremochloa ophiuroides),又名百足草. 2材料类别成熟种子. 3培养条件(1)诱导愈伤组织培养基:MS 6-BA Q1mg·L-1(单位下同) 2,4-D 4.5.(2)继代培养基:MS 6-BA 0.1 2,4-D 4.0 Vc 5.0.(3)芽分化培养基:MS 6-BA 2.0 NAA1.0 CoCl25.0 TDZ 0.5.(4)生根培养基:1/2MS NAA 0.5 IAA 0.5 MET 0.5 活性炭0.1%.     

中华结缕草成熟胚的离体培养再生植株

1植物名称中华结缕草(Zoysia sinica). 2材料类别成熟种子. 3培养条件基本培养基为改良MS(MSm):MS无机盐 核黄素(VB2)1.0mg·L-1(单位下同) 盐酸噻胺(VB1)1.0 烟酸(Vpp)0.5 盐酸吡哆辛(VB6)0.5 肌醇100 酶水解酪蛋白(CH)300 蔗糖30 g.L-1 琼脂6.0 g·L-1.愈伤组织诱导培养基:(1)MSm4葡萄糖20 g·L-1 2,4-D 2.5 6-BA 0.25;愈伤组织继代培养基:(2)MSm 6-BA 0.1 2,4-D 1.6,(3)MSm 6-BA 0.1 2,4-D 2.0,(4)MSm 6-BA 0.1 2,4-D 2.4,(5)MSm 6-BA 0.1 2,4-D 2.8,(6)MSm 6-BA 0.1 2,4-D 3.2;分化培养基:(7)MSm.愈伤组织诱导和继代培养均为黑暗条件,分化培养过程中光照度为2000 lx,光照时间为12 h.d-1,培养温度(26±2)℃.     

剪股颖愈伤组织诱导与植株再生

以匍匐剪股颖的成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及再生体系进行了研究。结果表明:愈伤组织诱导合适的培养基为MS 6mg.L-1 2,4-D 0.2mg.L-1 TDZ 500mg.L-1 CH,诱导率达到68.1%;MS 5mg.L-1 2,4-D 0.1 mg.L-1TDZ 500mg.L-1 CH为愈伤组织继代较合适的培养基;愈伤组织分化的合适培养基为MS 0.3mg.L-1 TDZ 0.5mg.L-1 6-BA,分化率达到52.7%。随着愈伤组织继代次数的增加,胚性愈伤组织的分化能力没有明显的降低,这可为后续的遗传转化长期提供受体材料。     

蓝花楹组织培养与快速繁殖研究

以蓝花楹(Jacaranda mimosifolia Humb.et Bonpl.)胚轴为外植体进行组织培养和快繁体系建立的研究。结果表明,蓝花楹种子经40℃-45℃温水浸泡后发芽率较高,达到55.7%。蓝花楹不定芽和愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+6-BA2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1+2,4-D 0.1 mg L-1和M S+6-BA 0.5 mg L-1+NAA 1.0 mg L-1+2,4-D 1.0 mg L-1。不定芽和愈伤组织增殖的最适培养基分别为改良MS培养基+6-BA 0.5 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+IBA 0.5 mg L-1和MS+6-BA 1.0 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+ZT 3.0 mg L-1。愈伤组织分化最适培养基为M S+BA 1.0 mg L-1+NAA 0.5 mg L-1+2,4-D 0.5 mg L-1。最适生根培养基为1/2MS+蔗糖20 g L-1+NAA 0.1 mg L-1+活性炭2.0 g L-1,生根率达78.3%。     

多年生黑麦草的组织培养和植株再生

1植物名称多年生黑麦草(Lolium perenne)栽培品种"德比"(Derbv). 2材料类别成熟种子. 3培养条件(1)愈伤组织诱导培养基:N6 2,4-D10.0 mg·L-1(单位下同) 6-BA 0.5 NAA 0.5 CH(水解酪蛋白)500;(2)继代培养基:N6 2,4-D 5.0 NAA 0.5 6-BA 0.5 CH 300;(3)分化培养基:N6 6-BA 1.0 KT 0.5;(4)壮苗培养基:N6;(5)生根培养基:1/2N6 NAA 0.2.以上培养基中除生根培养基蔗糖含量为3%以外,其余均为5%.pH 5.8,琼脂含量为6.5%.愈伤组织诱导及继代为暗培养;分化培养及生根培养的光照度均为1800 1x,光照时间12 h·d-1,培养温度(25 2)℃.     

籼型稻V20B 高效遗传转化体系研究初报

目的:建立籼型杂交稻亲本V20B成熟胚愈伤组织培养的高效遗传转化体系。方法:以V20B的成熟胚作为外植体,研究比较不同培养基、不同生长物质类型及浓度、不同培养条件对愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果:诱导培养基以N6为基本培养基,添加2.5 mg.L-12,4-D和0.2 mg.L-16-BA,光照条件下诱导,成熟胚愈伤组织诱导率达到93.44%;继代培养基以MS为基本培养基,添加2.0 mg.L-12,4-D,黑暗条件下培养;分化培养基以DL为基本培养基,激素配比为2.0 mg.L-1KT、2.0 mg.L-16-BA、0.2mg.L-1NAA、0.2 mg.L-1IAA;采用农杆菌介导法对该体系获得的愈伤组织侵染后能获得的抗性愈伤组织,经PCR检测潮霉素基因转化率为53.89%。结论:建立了适宜于籼型稻V20B的高效组织培养体系。     

不同激素对银斑百里香愈伤组织培养的影响

以银斑百里香种子为试材,比较了不同浓度的NAA和2,4-D与6-BA对百里香愈伤组织诱导效果的影响。结果表明:NAA在0.15(mg/L)和2,4-D在0.9(mg/L)是诱导银斑百里香种子产生愈伤组织的最佳浓度;MS+NAA(0.15mg/L)+6-BA(0.6mg/L)和MS+2,4-D(0.9mg/L)+6-BA(0.6mg/L)诱导的效果最佳,建立了百里香愈伤组织培养的实验体系。     

党参的离体培养及植株再生的研究

在附加激素的MS培养基上,培养党参下胚轴和无菌芽切段,诱导产生愈伤组织并且再生植株。经过两年多(15个世代)的继代培养,建立了党参体细胞无性系。实验结果表明:(1)培养基MS 0.4mg/L 2,4-D 0.8mg/L Kt 2.0mg/L IAA对愈伤组织诱导及继代培养,MS 0.2mg/L 6-BA诱导外植体产生丛芽和愈伤组织再分化,MS 0.5mg/L NAA 0.2mg/L 6-BA及MS 0.2mg/L NAA诱导生根效果最好。(2)愈伤组织再分化经过胚状体途径。     

结缕草再生体系的研究

以结缕草品种‘Zenith’(Zoysia japonica‘Zenith’)的种子为外植体,在附加1.0 mg.L-12,4-D和0.1mg.L-16-BA或2.0 mg.L-12,4-D的MS培养基上培养,愈伤组织诱导率较高,分别达到100%和92%。在添加了2.0 mg.L-12,4-D或1.0 mg.L-12,4-D和0.1 mg.L-16-BA的MS培养基上继代培养可诱导出胚性愈伤组织,诱导率分别为3.26%和14.52%。胚性愈伤组织在含0.01mg.L-12,4-D的1/2 MS分化培养基上的分化率和生根率都达到100%。     

费尔干猪毛菜愈伤组织的诱导、分化及植株再生体系的建立

探讨了植物生长调节剂、外植体等因子对费尔干猪毛菜（Salsola fergartica Drob．）愈伤组织诱导、分化与植株再生的影响。结果表明：2,4-D与6-BA组合使用时,在一定浓度范围内均有愈伤组织产生,最佳的诱导培养基为MS＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L,下胚轴为诱导愈伤组织的最佳材料;愈伤组织继代培养较好的培养基为MS＋NAA0．1mg／L＋6-BA1．0mg／L;愈伤组织不定芽分化培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．05mg／L;根分化的培养基为1／2MS＋IBA0．2mg／L,且生根率可达72％。以带柄子叶为外植体,诱导丛生芽的最佳分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L,再生频率可达90．74％。     

培养基成分和培养时间对匍匐翦股颖植株再生的影响

以匍匐翦股颖成熟种子为外植体,研究了培养基2,4-D浓度、2,4-D和6-BA组合配比、蔗糖浓度对匍匐翦股颖愈伤组织诱导的影响以及愈伤组织再生过程中继代时间、6-BA浓度、蔗糖浓度对愈伤组织分化的影响。结果表明:在MS培养基上,2 mg·L^-1 2,4-D和0.1 mg·L^-1 6-BA的组合最利于愈伤组织的诱导,诱导率高达94%。蔗糖浓度为30 g·L^-1时愈伤组织诱导率最高,为82%; 在再生过程中,当6-BA浓度为1 mg·L^-1时分化率最高(62%),蔗糖浓度为40 g·L^-1时,愈伤组织分化率最高(52%)。经过2次继代培养的愈伤组织(外植体放到培养基后40天)的分化率为最高(71%),随着继代次数增多,分化率逐渐降低,在经过5次继代后(培养100 d)分化率仅有18%。     

多年生黑麦草种子萌发及植株再生的研究

对不同预处理条件下多年生黑麦草种子萌发、愈伤组织诱导以及植株再生进行了研究。结果表明,35℃恒温干燥处理3 h、浸泡16 h后,室温晾48 h的干湿交替及强度为1 000 GS磁场处理30 min均能使种子的发芽率得到显著提高。最适诱导培养基为MS+2,4-D 6 mg·L^-1,有机添加物对于愈伤组织的生长影响并不显著,但可以改善其状态;较为适宜的分化培养基为MS+2 mg·L^-1 6-BA或KT;生根培养基为附加0.5 mg·L^-1 NAA的MS培养基。     

花楸合子胚诱导体细胞胚胎发生研究

分别以完整成熟胚、切去一个子叶的成熟胚和切下的子叶为外植体,以MS为基本诱导培养基、1/2MS为基本分化培养基,进行了花楸体细胞胚胎发生研究。结果表明:以完整合子胚作为外植体的体胚诱导率最高,为100%,最佳植物生长调节剂组合为5 mg.L-1NAA+2 mg.L-16-BA;NAA和6-BA浓度及二者的交互作用对愈伤组织和体胚诱导率的影响极显著;光照配合延长继代间隔时间有利于体胚发生。实体观察结果表明,花楸体胚发生方式有直接发生和间接发生两种;体胚发育经历了球形期、心形期、鱼雷形期和子叶期。组织学观察结果表明,体胚具有两极性,子叶期体胚结构完整。     

盐生植物海马齿离体再生

建立盐生植物海马齿(Sesuvium portulacastrum)的离体再生体系,为其生物技术改良奠定基础。以海马齿叶片、茎和腋芽为外植体, 在不同激素配比的培养基上进行愈伤组织诱导、继代培养以及不定芽的分化和生根培养。结果表明: 最适愈伤组织诱导的外植体为叶片, 其次为幼嫩的茎段和腋芽。以叶片为外植体, 愈伤组织诱导率最高的培养基为MS+2.0mg·L^–12, 4-D + 0.5 mg·L^–16-BA + 3%sucrose; 芽分化最适培养基为MS + 1.0 mg·L^–1 2, 4-D + 0.2 mg·L^–1 6-BA + 3% sucrose;生根最适培养基为MS + 3%sucrose + 0.1%AC。炼苗移栽后, 成活率可达80%。     

不同激素及其浓度配比对深山蔷薇嫩叶柄再生植株诱导的影响

以深山蔷薇新生嫩叶柄为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的愈伤组织诱导、愈伤组织芽苗分化和生根的培养基,结果表明,最适合的嫩叶柄愈伤组织诱导的培养基为：LS+6-BA 1.80 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L-1+2,4-D 0.08 mg·L^-1,诱导率为99.0%;愈伤组织再分化芽苗的培养基为：LS+6-BA 3.45 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1,分化率为99.5%;生根培养基：1/2LS(大量元素)+IAA 0.05 mg·L^-1,生根率达98.0%以上。移栽成活率达96.0%以上。本试验成功建立了深山蔷薇嫩叶柄植株再生体系。     

毛脉酸模的组织培养及植株再生

以毛脉酸模下胚轴和幼苗根茎为外植体,以MS为基本培养基,与不同浓度比例的6-BA和2,4-D等植物生长调节剂进行毛脉酸模组织培养的研究。结果表明,毛脉酸模幼苗根茎是诱导丛生芽的最佳材料,诱导丛生芽产生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,诱导率为81.2%;生根培养基为无激素的MS培养基,生根率可达92%,在此条件下生根迅速,可获得完整植株;组培苗经过炼苗移栽后成活率可达80%。     

葡萄柚种子无菌苗组培快繁体系的建立

以葡萄柚种子在无菌条件下萌发的幼苗作为外植体供体,子叶切断作为丛生芽初代诱导培养的接种材料,以MT作为基本培养基,通过调节不同植物生长调节剂及其浓度组合、不同质量浓度的蔗糖,选择最佳初代培养基、继代培养基和生根培养基,对葡萄柚组培快繁技术体系进行研究。结果表明:(1)葡萄柚种子经预处理后,先用75%酒精表面灭菌15 s,再用0.1%Hg Cl2浸泡20 min的消毒效果最好,污染率为18.33%,萌发率为89.91%;(2)初代培养的最适培养基为MT+1.0 mg·L-16-BA(6-苄氨基腺嘌呤)+0.2 mg·L-1IBA(吲哚丁酸)+0.2 mg·L-1GA(赤霉素)+蔗糖40 g·L-1,腋芽诱导率较高,为93.33%;(3)浓度为0.2 mg·L-1的GA能提高初代培养的腋芽诱导率,但还达不到显著水平;(4)继代培养的最适培养基为MT+0.5 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1IBA+0.2 mg·L-1GA+蔗糖40 g·L-1,丛生芽增殖系数达到4.25,芽深绿色,茎粗壮,节间较长,生长旺盛;(5)浓度为0.2 mg·L-1的GA能显著提高继代培养的增殖系数;(6)最适合继代培养的蔗糖浓度为40 g·L-1,丛生芽长势极好;(7)最佳生根培养基为1/2 MT+NAA 0.2 mg/L+蔗糖40 g·L-1+AC 0.1%,生根率达68.89%,根粗壮;(8)生根苗移栽30 d后成活率在75%以上。该研究建立了葡萄柚的组织培养快繁技术体系,为葡萄柚的规模化生产提供了可行的技术依据。     

野葛叶片和茎段高频再生体系的建立

探讨几种因子对野葛叶片和茎段高频再生体系建立的影响。采用植物组织培养、正交实验和单因子实验的方法。野葛叶片和茎段的最佳消毒方式为70%酒精处理30 s后再用0.1%HgCl₂处理15 min;野葛叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 2 mg·L^-1,野葛茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 2 mg·L^-1;暗培养更有利于野葛愈伤组织的诱导;野葛叶片和茎段愈伤组织诱导的最佳蔗糖浓度均为30 g·L^-1;野葛叶片愈伤组织的最佳出芽培养基为MS+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 3.0 mg·L^-1,而野葛茎段愈伤组织的最佳出芽培养基为MS+ NAA 0.5 mg·L^-1+KT 2 mg·L^-1;光照培养更有利于野葛叶片和茎段愈伤组织芽的再分化;野葛叶片愈伤组织再生芽生根的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+PP₃₃₃ 0.5 mg·L^-1,而野葛茎段愈伤组织再生芽生根的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+PP₃₃₃ 3.0 mg·L^-1;野葛叶片和茎段愈伤组织再生芽生根的最佳蔗糖浓度均为30 g·L^-1;叶片再生苗移栽的最佳PP₃₃₃浓度为1.0 mg·L^-1,茎段再生苗移栽的最佳PP₃₃₃浓度为3.0 mg·L^-1;叶片和茎段再生苗的最佳移栽基质均为蛭石:珍珠岩（2:1）。     

罗布麻愈伤组织诱导及植株再生

以罗布麻(Apocynum venetum L.)当年的成熟种子和5周龄的幼苗叶片为外植体,研究了不同激素组合、暗培养对愈伤组织及植株再生的影响.结果表明,幼苗作外植体诱导愈伤的最佳培养基为添加1.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA的MS培养基;继代培养中1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA组合愈伤致密而生长迅速,长时间培养硬化的愈伤组织可用添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA培养基和初期暗培养获得大量质地疏松、增殖迅速的愈伤组织;再生苗诱导以0.5 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA组合为佳;1/2MS附加NAA 0.6 mg/L为适宜的生根培养基,初步建立了罗布麻离体再生体系.     

小果卫矛愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

以小果卫矛嫩茎为外植体，采用L₉（3⁴）正交设计法，研究了不同灭菌组合、不同基本培养基、不同浓度6-BA、2，4-D、NAA配比对小果卫矛愈伤组织诱导、再分化及生根的影响。结果表明：小果卫矛嫩茎最适的灭菌组合为75%酒精消毒30 s+0.1%升汞消毒15 min，愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 2，4-D，诱导率为79%；再分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1，再分化率为78.83%，1/2 MS+NAA 1.2 mg·L^-1适用于生根培养，生根率达到83.23%。