| 一种大规模筛选单克隆及提取质粒的改进方法 |
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| 引用本文： | 许志茹,李玉花.一种大规模筛选单克隆及提取质粒的改进方法[J].生物技术通讯,2004,15(3):256-258. |
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| 作者姓名： | 许志茹 李玉花 |
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| 作者单位： | 东北林业大学,花卉生物工程研究所,哈尔滨,150040 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(30170785)，主任基金项目(30040042) |
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| 摘 要： | 利用α-互补(X-gal IPTG)从cDNA库中筛选特异克隆，以此去除含有未插入片段和插入片段小的克隆。运用展库的方法，通过辅助噬菌体对库中多个载体的切割，将载体以质粒的形式转化到大肠杆菌中；同时对质粒DNA碱裂解提取方法做了改进，建立了一种简单实用的大量提取质粒DNA的方法。该方法利用特定的蛋白质吸附膜吸附提取过程中的蛋白质，从而去除了使用酚-氯仿抽提蛋白质的复杂过程，减少了质粒DNA的损失，是一次性获得大规模质粒DNA的有效方法。获取的质粒DNA样品在纯度和浓度上都可以满足测序、PCR及Southern杂交等分子生物学实验的要求。
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| 关 键 词： | cDNA文库 质粒 克隆 特异基因 蛋白质 |
| 文章编号： | 1009-0002(2004)03-0256-03 |
| 修稿时间： | 2003年11月4日 |
An improved method to select single clones and extract plasmids on a large scale |
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| XU Zhi-ru,LI Yu-hua Institute of Flower Biotechnology,Northeast Forestry University,Harbin,China.An improved method to select single clones and extract plasmids on a large scale[J].Letters in Biotechnology,2004,15(3):256-258. |
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| Authors: | XU Zhi-ru LI Yu-hua Institute of Flower Biotechnology Northeast Forestry University Harbin China |
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| Institution: | XU Zhi-ru,LI Yu-hua Institute of Flower Biotechnology,Northeast Forestry University,Harbin150040,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cDNA library plasmid clone unique gene |
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