| SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立 |
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| 引用本文： | 丛喆,李兆忠,魏强,许琰,蒋虹,佟巍,卢圣栋,涂新明.SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立[J].中国实验动物学报,2006(4). |
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| 作者姓名： | 丛喆 李兆忠 魏强 许琰 蒋虹 佟巍 卢圣栋 涂新明 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所 北京100021(丛喆，魏强，许琰，蒋虹，佟巍，涂新明)，中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所 北京100730(李兆忠，卢圣栋) |
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| 基金项目： | 中国CIPRA项目，美国NIH资助(编号:U19AI51915-04) |
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| 摘 要： | 目的建立SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。方法巢式RT-PCR扩增SIV病毒RNAgag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEMT载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒。该质粒经限制性内切酶NotⅠ酶切后,进行体外转录,转录出的RNA产物(RS)纯化后10倍系列稀释,作出标准曲线,作为SIV病毒RNA荧光定量检测的外标准品。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100 copies/μL。结论制备的RS外标准品纯度高,SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。
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| 关 键 词： | SIV 病毒载量 实时荧光定量RT-PCR SYBR Green I |
Quantification of Simian Immunodeficiency Virus(SIV) Viral Load Using Real-Time Quantitative RT-PCR with SYBR Green I |
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| CONG Zhe,LI Zhao-zhong,WEI Qiang,XU Yan,JIANG Hong,TONG Wei,LU Sheng-dong,TU Xin-ming.Quantification of Simian Immunodeficiency Virus(SIV) Viral Load Using Real-Time Quantitative RT-PCR with SYBR Green I[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2006(4). |
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| Authors: | CONG Zhe LI Zhao-zhong WEI Qiang XU Yan JIANG Hong TONG Wei LU Sheng-dong TU Xin-ming |
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| Institution: | CONG Zhe~1,LI Zhao-zhong~2,WEI Qiang~1,XU Yan~1,JIANG Hong~1,TONG Wei~1,LU Sheng-dong~2,TU Xin-ming~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SIV Viral Load Real time RT-PCR SYBR Green I |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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