| 银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A1的cDNA克隆 |
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| 引用本文： | 樊连春,谢京,汪洋,桂建芳.银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A1的cDNA克隆[J].水生生物学报,2000,24(6):573-581. |
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| 作者姓名： | 樊连春 谢京 汪洋 桂建芳 |
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| 作者单位： | 中国科学院水生生物研究所;淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目，国家重点基础研究发展计划(973计划)，中国科学院基础研究项目 |
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| 摘 要： | 分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料,提取总RNA,分离mRNA,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtll Sfi-Not克隆载体,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库.测试结果表明库容量分别达到3.1×106(银鲫)和1.6×106(彩鲫).进一步人工合成Cyclin A1保守引物,采用PCR扩增文库的方法,克隆了银鲫(1616bp)与彩鲫(1626bp)的Cyclin A1全长cDNA.序列分析结果表明:两种鱼编码区长度均为1173bp,起始于一个包含在脊椎动物起始密码子ANNATG基元内ATG的单一开放读码框,编码391个氨基酸;5'-端非编码区长度也同为70bp,3-'端非编码区长度略有不同,银鲫为373bp,而彩鲫则为383bp;二者3'-端均带有AATAAA的Poly(A)加尾信号以及24bp(银鲫)和27bp(彩鲫)的Poly(A)尾巴.比较银鲫、彩鲫和金鱼与人、爪蟾Cyclin A1氨基酸序列同源性的结果表明,Cyclin A1在人、爪蟾与鱼类之间具有较高同源性;而在银鲫、彩鲫和金鱼之间,Cyclin A1仅在周期蛋白框外存在5个氨基酸的差异,且这些差异均是由个别碱基的变异造成的.
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| 关 键 词： | 雌核发育 银鲫 彩鲫 cDNA文库 周期蛋白A1 |
| 修稿时间： | 2000-03-04 |
CONSTRUCTION OF OOCYTE cDNA LIBRARIES OF GYNOGENETIC SILVER CRUCIAN CARP AND GONOCHORISTIC COLOR CRUCIAN CARP AND CLONING OF THEIR CYCLIN A1 cDNAs |
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| FAN Lian-chun,XIE Jing,WANG Yang,GUI Jian-fang.CONSTRUCTION OF OOCYTE cDNA LIBRARIES OF GYNOGENETIC SILVER CRUCIAN CARP AND GONOCHORISTIC COLOR CRUCIAN CARP AND CLONING OF THEIR CYCLIN A1 cDNAs[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2000,24(6):573-581. |
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| Authors: | FAN Lian-chun XIE Jing WANG Yang GUI Jian-fang |
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| Keywords: | Cyclin A1 |
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