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目的 研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3"非翻译区(UTR)加工的影响。方法 本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信息学分析方法,系统性描绘宿主细胞选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)事件;Metascape数据库对发生显著APA变化的基因进行功能富集分析;RT-qPCR验证靶基因3"UTR长度变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白表达水平。结果 SARS-CoV-2膜蛋白外源表达后宿主细胞内共813个基因发生显著APA变化。GO和KEGG分析显示,差异APA基因广泛参与有丝分裂细胞周期、调节细胞应激等生物过程,涉及病毒感染和蛋白质加工等。从中进一步筛选出AKT1基因,在IGV软件中显示3"UTR延长;RT-qPCR验证AKT1基因的3"UTR长度变化趋势;Western blot结果显示AKT1蛋白磷酸化水平增加。结论 SARS-CoV-2膜蛋白潜在影响宿主pre-mRNA的3"UTR加工,其中参与多种病毒性生物过程的AKT1基因 3"UTR延长,且其编码的蛋白质功能在细胞内被激活。 相似文献
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华中农业大学农业微生物学国家重点实验室和该校动物医学院的王金苹、赵俊龙、江涛等7位科学工作者利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出SAGI部分基因片段,亚克隆入表达载体pGEXKG,将重组质粒导入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳显示表达的重组蛋白的分子量为56ku。 相似文献
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您叫什么名字?/奥古斯特。/您姓什么?/奥古斯特。/您丈夫叫什么名字?/我想也叫奥古斯特。/您丈夫?/对,我丈夫。/您结婚了吗?/结了,跟奥古斯特。对,是跟奥古斯特太太。上面这段文字,绝非一个并不幽默的幽默,而是真实的来源于医学史上的一个诊断记录。对话发生在1901年,提问者名叫阿洛伊斯·阿尔茨海默(Alois Alzheimer),是一名德国的精神病学医生;答话者,即奥古斯特太太,是前来向阿尔茨海默求诊的一名病患。5年之后,奥古斯特太太不幸病逝。而当阿尔茨海默解剖其遗体时发现,奥古斯特太太大脑皮层淤积了一 相似文献
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