抗人尿道高分化鳞癌单克隆抗体的研制

用本室建立的人尿道高分化鳞状上皮癌细胞株(Hus-98)免疫Balb/C小鼠,通过细胞杂交技术及ELISA方法进行筛选,SP免疫组织化学方法进行鉴定,获得10株能稳定分泌、选择性强、效价高的杂交瘤细胞株;同时从乳腺癌组织中提出肿瘤相关抗原行免疫印记实验(Western-blot)。结果6株经4次克隆能稳定分泌抗体Ig,免疫组化显示这些抗体是针对来源于上皮的鳞癌、腺癌细胞膜和细胞浆的,而癌旁正常组织及胎儿组织呈阴性反应;通过western-blot结果显示肿瘤相关抗原分子量为46.414kb。     

P73蛋白在血管瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨P73蛋白在血管瘤组织中的表达及在血管瘤发生、发展中的作用.方法采用免疫组织化学S-P法分别检测(各20例)增生期血管瘤、退化期血管瘤、正常皮肤组织中P73蛋白的表达,并用HPIAS-2000多媒体彩色病理图像分析系统定量分析、比较P73蛋白在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组织中的表达.结果在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤,P73蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为:6.408±2.151,1.073±0.516,0.953±0.120;阳性面积率分别为:0.184±0.015,0.098±0.014,0.087±0.012.增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别相比,P73蛋白阳性表达的平均光密度和阳性面积率有显著性差异(P<0.001 ) ,消退期血管瘤与正常皮肤组之间,P73蛋白阳性表达的无显著性差异(P>0.05).结论 P73蛋白在血管瘤发生发展和毛细血管内皮细胞的异常过度增生中起着重要的作用.     

胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境中分化潜能的研究

目的 探讨胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境中的分化情况,为研究其在不同微环境中的分化潜能和稳定性及寻找新的皮肤工程种子细胞奠定基础。方法129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d,定向诱导其分化为呈β1整合素、CK15和CK19阳性的表皮样干细胞克隆,无菌手术下移植入129小鼠双侧肾被囊内,术后4周、6周和8周取材。对移植后细胞的分化情况进行形态学和CEA和CK18免疫组织化学观察。结果小鼠胚胎干细胞源性表皮干细胞在129小鼠肾被囊内4周,分化为由单层或复层上皮样细胞构成的管状和泡状结构,种植6周和8周,除上述结构外,可见角化复层扁平上皮、汗腺样、皮脂腺样及毛囊样等结构。免疫组化结果汗腺样结构呈CEA和CK18阳性。结论研究结果表明小鼠胚胎干细胞源性表皮干细胞在肾被囊微环境下,可具有分化为角化复层上皮、汗腺样、皮脂腺样及毛囊样结构的潜能。     

甲状腺弥漫性大B细胞性淋巴瘤1例报告

1病例介绍患者,男,58岁,因发现颈前无痛性肿块20年,伴呼吸困难1个月,于2005年10月25日入院。无甲亢病史。查体:体温38.6℃,脉搏120次/分,呼吸21次/分,血压14.7/9.3kPa,各浅表淋巴结未触及,无皮肤潮红、肿胀及溃疡,未见血管曲张,甲状腺右叶触及约8.0cm×6.0cm×6.0cm大小的肿块,质硬,边界欠清,活动度差,无触痛,局部皮温不高,肿块可随吞咽上下移动,未闻及血管杂音。B超:颈前区实质性占位。CT:右侧甲状腺癌累及喉及气管上段,诊断为甲状腺癌侵及喉及气管。于2004年11月2日行甲状腺癌根治术、颈段气管、喉切除术、气管造口术。术后病理结合免疫…     

鞘内注射M受体和GDNF反义寡脱氧核苷酸抑制吗啡戒断大鼠蓝斑c—Fos表达

The antisense approach and immunohistochemistry were used to study the effects of different muscarinic receptor (M) subtypes and glial cell derived neurotrophic factor (GDNF) on the scores of morphine-withdrawal syndrome and the expression of c-Fos in locus coeruleus (LC). Intrathecal injection of M2 receptor antisense oligonucleotides (M2AS-oligo) or GDNF antisense oligonucleotides (GDNFAS-oligo) decreased the scores of morphine withdrawal syndrome. The expression of c-Fos positive neurons in the LC increased in morphine-dependent rats and increased to a greater extent after the injection of naloxone (4mg/kg, ip) in morphine dependent rats. Intrathecal injection of M2AS-oligo or GDNFAS-oligo inhibited the increase of c-Fos expression in LC during morphine withdrawal, but there was no effect in case of M1AS-oligo. The results suggest that M2 receptor of spinal cord mediates the neural activation of LC during morphine withdrawal. And the interaction between neurons and glial cells may be involved in the ascending activation process.     

应用胎儿特异性抗体HbF（γ链）标记法无创性 产前基因诊断DMD

以孕8~26周孕妇外周血为材料,经过Percoll密度梯度离心初步富集,胎儿细胞特异性抗体—HbF标记、识别胎儿有核红细胞,母体和胎儿有核红细胞的精确区分是以胎儿和成人血红蛋白的组成差异为基础的。胎儿细胞胞浆黄染,而具有成人血红蛋白的母体细胞没有颜色。显微操作法获取全部阳性细胞后,以其全基因组扩增（PEP）的产物为模板,进行性别检测、DMD基因的多重PCR检测和STR连锁分析。结果,20名孕妇外周血中均发现与HbF呈阳性反应的胎儿NRBC。并完成7例DMD的产前基因诊断。HbF抗体标记法能有效识别胎儿有核红细胞,是无创性产前基因诊断中很有应用前景的标记方法。 Abstract： Maternal blood was obtained at 8-26weeks of gestation.After discontinuous density gradient centrifugation with Percoll ,HbF antibody was used to identify fetal NRBC.The precise differentiation between fetal and maternal NRBC is based on the constitutional difference between fetal and adult hemoglobin (Hb).Fetal cells appear yellow cytoplasmic staining,while adult cells colorless. NRBCs were collected by micromanipulation andwhole genome amplification was performed. DMD was prenatally diagnosed by using the combination of sex determination,multiplex PCR and linkage analysis of several STR sites of dystrophin. NRBCs stained with HbF were found in all of 20 maternal blood samples with gestations, and 7 fetuses with risk of DMD were diagnosed. We concluded that HbF antibody could identify fetal NRBC efficaciously,and this is a kind of more prospective application method.     

显示神经内分泌细胞的染色方法

体内一些内分泌细胞,它们具有共同的细胞化学特点,即在细胞内含胺或摄取胺前体,并在细胞内进行脱羧反应,具有产生胺类和肽类激素功能,这类细胞属于弥漫性神经内分泌系统范畴。内分泌系统不仅包括传统的内分泌细胞聚集形成的内分泌腺,还包括广泛散在分布于许多器官组织中的神经内分泌细胞。     

羊松果体细胞原代培养及其生物学特性的研究

体外培养山羊及绵羊的松果体细胞,观察其增殖情况和功能状态的变化.结果显示:山羊、绵羊的松果体细胞体外形态及生长情况相似.细胞多呈圆形或多角形,细胞体积有增大趋势.采用MTT法检测细胞生长状态,发现细胞有明显的增殖现象,大约于11d达到高峰.用免疫组织化学对培养细胞进行染色,发现5-HT阳性细胞数量随细胞的增殖而增加.表明山羊和绵羊松果体细胞在体外均增殖旺盛,并能保持体内的分泌功能.     

强光照和全黑暗条件下荒漠沙蜥视网膜内GAP-43表达的免疫组织化学

采用免疫组织化学技术研究了在强光照和全黑暗条件下荒漠沙蜥(Phrynocephalus prezewalskic)视网膜内生长相关蛋白GAP-43的表达变化。结果表明,在正常光照条件下,视网膜内GAP-43阳性表达部位主要存在于内网层;强光照条件下,GAP-43免疫染色部位主要出现在内网层、节细胞层和内核层的部分细胞核。在全黑暗条件下,在视纤维层和内网层呈阳性染色;提示视网膜在不同环境条件下GAP-43的不同定位,可能与其在相应的环境下参与不同的视觉功能有关。     

水通道蛋白在塔里木兔肺组织中的表达和作用

通过检测塔里木兔Lepus yarcandensis肺脏中水通道蛋白(aquaporin,AQP)1、AQP3及AQP4的表达和分布情况,以探讨水通道蛋白在干旱区动物水液代谢中的作用。采用常规HE染色观察肺组织学结构,采用免疫组织化学检测AQP1、AQP3及AQP4在肺脏中的分布位置及表达。结果表明,AQP1分布在支气管上皮细胞,肺泡间质毛细血管内皮细胞以及肺泡上皮(Ⅰ、Ⅱ型)细胞。AQP3分布在小气管上皮顶质膜和大气道上皮细胞基底膜。AQP4分布在小气管和大气道上皮细胞基底膜。AQP1、AQP3及AQP4在肺中表达的强弱关系为AQP1>AQP4>AQP3。这些结果说明,水通道蛋白在塔里木兔肺泡腔、肺组织间隙及毛细血管腔之间水的转运中很可能起着很重要的作用。同时对吸入空气的湿润和呼出气体中水分的重吸收也具有重要意义。