鲍曼不动杆菌的耐药性及金属酶基因型的分析

目的 探讨本地区鲍曼不动杆菌的耐药性及耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)金属酶基因型的分布情况,为临床使用抗生素提供帮助.方法 回顾性分析1 614株鲍曼不动杆菌的耐药情况,PCR检测金属酶基因型.结果 (1)1 614株IRAB的检出率为63.82％ (1030/1614),以重症监护室检出率最高占46.22％(746/1614).(2)抗菌药物的耐药率:其中米诺环素(28.51％)和多粘菌素B(6.10％)的耐药率最低,其他药物的耐药率均＞40.0％.(3) IRAB产金属酶基因型的以OXA-23为主.结论 监测鲍曼不动杆菌的耐药率,有助于有效控制鲍曼不动杆菌引起的医院内感染.     

一株洛菲不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究

目的研究洛菲不动杆菌对亚胺培南、美洛培南耐药的分子机制。方法K-B纸片琼脂扩散法检测洛菲不动杆菌B69对头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、阿米卡星的耐药性,琼脂对倍稀释法检测B69对亚胺培南、美洛培南的最低抑菌浓度;PCR扩增OXA、IMP、VIM型碳青霉烯酶基因,测序确定耐药基因型别;粗提酶水解亚胺培南纸片试验检测酶活性。结果洛菲不动杆菌B69具有多重耐药性;PCR扩增IMP基因阳性,经测序为IMP-8;粗提酶水解亚胺培南。结论产IMP-8型金属β-内酰胺酶是洛菲不动杆菌B69对碳青霉烯耐药的重要机制。     

含钼酶和钼在其中的作用

本文对生物体内仅有的几种含钼酶的一些基本特性以及钼在这些含钼酶中的功能进行了介绍和评述。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC)、金属酶(MBLs)、碳青霉烯酶(KPC)情况,并分析其对19种常见抗菌药物的耐药性.方法 ESBLs和AmpC及MBLs采用三维试验检测,碳青霉烯酶采用改良Hodge试验进行检测,并以K-B法测定19种常见抗菌药物的耐药性.结果 582株肺炎克雷伯菌单产ESBLs 168株,检出率为28.86％;单产AmpC52株,检出率为8.93％;单产KPC 38株,检出率为6.53％;所有菌株中未检出MBLs;同产ESBLs及AmpC43株,检出率为7.39％;同产ESBLs及KPC 12株,检出率为2.06％,同产AmpC及KPC 10株,检出率为1.72％,未发现同产ESBLs、AmpC及KPC 3种酶菌株.单产ESBLs、单产AmpC、同产ESBLs+ AmpC肺炎克雷伯菌分离株对亚胺培南、美罗培南培南的耐药率低于3.0％,与非产酶菌株相比,差异无统计学意义(P＞0.05);对其余抗生素的耐药率均明显高于非产酶菌株(P＜0.01).另外,同产ESBLs+ AmpC肺炎克雷伯菌分离株与单产ESBLs、单产AmpC株相比,对头孢他啶、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和复方新诺明等多种抗生素表现为明显升高(P＜0.01或P＜0.05).单产碳青霉烯酶株、同产ESBLs及KPC、同产AmpC及KPC菌株对多粘菌素B的耐药率为28.94％～33.33％,其余抗生素的耐药率均高于50.0％;单产KPC株与非产酶菌株相比,对所有抗生素的耐药率均明显升高(P＜0.01).结论 肺炎克雷伯菌分离株产生多种β-内酰胺酶,且对常用抗生素呈高度耐药,建议临床医师合理使用抗生素,以免耐药菌株的产生.     

细菌尿素酶的生化和分子生物学特点

尿素酶属于镍金属酶,能够分解尿素成氨和二氧化碳.细菌尿素酶在氮素循环和致病性方面有重要的作用.本文讨论了细菌尿素酶的生物化学和分子生物学性质,并就尿素酶的活化和调控方式以及生物学效应进行阐述.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属酶的筛选及基因型研究

目的研究重庆医科大学附属第一医院分离的29株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中金属酶（Metallo-β-Lactamase,MBL）的基因型分布情况。方法用亚胺培南-EDTA纸片法筛选29株铜绿假单胞菌中产MBL的铜绿假单胞菌,用PCR扩增法检测29株菌中金属酶VIM和IMP基因。结果29株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中,亚胺培南-EDTA纸片法筛选出MBL阳性菌株5株,阳性率为17％。PCR扩增出IMP基因型有4株,阳性率为14％,均为金属酶IMP-9型,未扩增出VIM基因。以PCR法结果为判定标准,亚胺培南-EDTA纸片法敏感性100％,特异性96％。结论IMP-9型为该院分离的这29株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中主要MBL基因型。本实验中所用的亚胺培南一EDTA纸片法能简单有效的筛选出产MBL的铜绿假单胞菌。     

封闭抗体检测与反复自然流产患者主动免疫治疗的相关性分析

摘要：目的 统计正常妊娠早期孕妇封闭抗体的阳性率,观察反复自然流产（RSA）患者应用淋巴细胞主动免疫治疗的效果,分析免疫治疗前后封闭抗体（APLA）的变化及其对再次妊娠的影响。方法 采用酶联免疫法（ELISA）对1 091例妊娠早期者和1 003例RSA患者的APLA水平进行测定,选取其中963例APLA阴性者进行淋巴细胞免疫治疗,观察疗程结束后测定APLA的变化情况及再次妊娠的结果。结果 1 091例早期妊娠产检者APLA阳性率为87.81%（958/1091）。1003例RSA患者免疫治疗前APLA阳性率为5.88%（59/1003）,963例APLA阴性者免疫治疗1个疗程后,APLA阳性率为79.02%（761/963）,2个疗程后APLA阳性率为92.94%（895/963）,与治疗前比较差异有统计学意义（P<0.01）;2个免疫治疗疗程后,APLA阳性者再次妊娠的成功率为86.40%（832/963）。结论 早期妊娠检查APLA可以评估流产风险以便发现阴性者作及时的治疗。RSA患者APLA阳性水平低,用淋巴细胞主动免疫治疗能提高RSA患者APLA的阳性率及再次妊娠的成功率。     

Galectin-7对食管鳞癌细胞株Eca-109迁移、侵袭的影响及其机制

为了探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在食管癌Eca-109细胞发生发展中的细胞外功能及其机制,该实验采用免疫印迹法检测浓缩细胞上清液中Galectin-7的表达,并利用不同浓度的重组Galectin-7培养食管癌Eca-109细胞。使用免疫印迹、实时荧光定量PCR、细胞划痕实验、MTT实验检测在培养后细胞中基质金属酶-9(MMP-9)、p38、pp38表达水平的变化以及Eca-109细胞迁移和增殖能力的改变。结果显示,Galectin-7存在于Eca-109细胞细胞上清液中,加入重组Galectin-7培养细胞后,MMP-9、pp38的表达水平明显上升,并且细胞的迁移能力也得到了提高,增殖能力无明显变化。由此说明,在食管癌Eca-109细胞中,Galectin-7可以被细胞分泌至细胞外,可能通过结合细胞外膜上特异性糖基配体激活p38 MAPK通路诱导MMP-9的表达,从而在Eca-109细胞侵袭、迁移过程中发挥重要的作用。     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药机制研究

目的 探讨铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药机制.方法 收集2008年11月至2009年4月我院临床分离的铜绿假单胞菌31株,根据药敏结果分为碳青霉烯类耐药组(21株)和碳青霉烯类敏感组(10株).另设1株标准株ATCC 27853,用亚胺培南-EDTA(乙二胺四乙酸)抑制试验检测菌株是否产生金屑酶,采用PCR法检测各菌株的外膜孔道蛋白oprD2基因,探讨铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制.结果 21株耐药株有7株产生金属酶;21株耐药株经oprD2基因扩增,15株阴性,6株阳性,10株敏感株全部阳性.统计学检验结果表明,碳青霉烯类耐药组与敏感组oprD2基因阳性率的差异有极显著性(P＜0.01).结论 oprD2基因缺失和金属酶是本院铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制.