康氏木霉(Trichoderma koningii)纤维素酶系中β-葡萄糖苷酶的提纯与性质

从康氏木霉培养抽提液扣分离提纯了β-葡萄糖苷酶。提纯步骤通过DEAE SephadexA-50、SE Sephadex C-50和Sephadex G-75柱层析三步纯化。提纯后比潘提高766倍,回收率为25.8%。经硷性和酸性Disc 电泳以及SDS 凝胶电泳鉴定均为单一带。用SDS 凝胶电泳测得该酶的分子量为77000。用加温、改变pH 或化学变性剂(SDS)处理均能使酶失活并且改变该酶的凝胶电泳行为,揭示该酶有亚基存在的可能性。用底物(纤维二糖)或竞争性抑制剂(葡萄糖酸δ-内酯)能保护该酶使其酶活和电泳行为基本上不改变或变化较小。δ-内酯的K(?)比K_m 要小二到三个数量级,它很可能是该酶底物过渡态中间物的类似物。     

康氏木霉纤维素酶系中C_x酶多分子型的分离纯化及某些性质

从康氐木霉(Trichoderma k(?)ningii)白色变异株As 3.4001的粗酶制剂中,获得了纤维素酶系中的一组C_x酶(C_(x1) C_(x2) C_(x3) C_(x4))。分离步骤包括Sephadex G-75凝胶过滤,DEAESephadex A-50离子交换层析,ConA-Sepharose亲合层析,SE-Sephadex C-50离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳。C_(x1)与C_(x2)的分子量不同而所带电荷相同,它们的分子量各自为44,500和34,000。C_(x2)—C_(x4)的分子量相同而所带电荷不同。纯化的C_(x1)—C_(x4)经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单带。比较它们对羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的糖化力及液化力表明在作用方式的随机性上C_(x2)>C_(x3)>C_(x1)>C_(x4)。     

康氏木霉(Trichoderma koningii)纤维素酶系中β-葡萄糖苷酶的提纯与性质

从康氏木霉培养抽提液中分离提纯了β-葡萄糖苷酶。提纯步骤通过DEAE SephadexA-50、SE Sephadex C-50和Sephadex G-75柱层析三步纯化。提纯后比活提高766倍,回收率为25.8%。经硷性和酸性Disc电泳以及SDS凝胶电泳鉴定均为单一带。用SDS凝胶电泳测得该酶的分子量为77000。用加温、改变pH或化学变性剂(SDS)处理均能使酶失活并且改变该酶的凝胶电泳行为,揭示该酶有亚基存在的可能性。用底物(纤维二糖)或竞争性抑制剂(葡萄糖酸δ-内酯)能保护该酶使其酶活和电泳行为基本上不改变或变化较小。δ-内酯的K_(?)比K_m要小二到三个数量级,它很可能是该酶底物过渡态中间物的类似物。     

康氏木霉C1酶的简捷提纯法及酶性质的研究

康氏木霉(Trichoderma Koningii)白色变异菌株AS 3．4001的粗酶制剂,经Sephadcx G-75凝胶过滤柱脱盐并除去大量杂蛋白,然后通过DEAE—scphadcx A一50离子交换层析,用0—0.5M Nacl梯度冼脱即得c。酶纯品。全程序仅需二天时间。 经聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS电泳鉴定均为单一带。此酶的分子量用SDS电泳及凝胶过滤法测定分别为58,000和5 2,000,用等电聚焦测其等电点为pH4 0。作用最适pH也为q o。此酶有较好的稳定性,在酸性pH(2 2)、碱性pH(8 0)及中性(水)中均能保持较长时间而不丧失活力。     

黑曲霉果胶酶液体发酵及酶作用条件

果胶酶用于提高果汁出率及果汁果酒澄清,早在三十年代国外就有这方面的报道,目前许多国家都已将其广泛应用于果汁果酒工业。国内此方面的研究甚少,六十年代虽然做过一些探讨,但是未能用于生产,至今生产上使     

康氏木霉纤维素酶系中Cx酶多分子型的分离纯化及某些性质

从康氐木霉(Trichoderma kkoningii) 白色变异株 AS 3．4001的粗酶制剂中,获得了纤维素酶系中的一组C_x酶(C_xt C_xz C_z3 C_z4)。分离步骤包括Sephadcx G-75凝胶过滤,DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,ConA-Sepharnse亲合层析,SE—Sephadcx C-50离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳。C_xt 与C_xt 的分子量不同而所带电荷相同,它们的分子量各自为44,500和34,000。C_xz—C_x4 的分子量相同而所带电荷不同。纯化的C_xt—C_z4“经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单带。比较它们对羧甲基纤维素钠(CMC—Na)的糖化力及液化力表明在作用方式的随机性上C_xz>C_z3>C_z1>C_x4。