组织工程静脉血管种子细胞的培养

目的获取可应用于静脉血管组织工程的种子细胞内皮细胞。方法选取北京地区雄性杂种犬,取其双侧颈外静脉,采用翻转后酶消法,获取原代内皮细胞,对其进行原代培养和传代培养,冻存、复苏和鉴定,并利用光学显微镜进行观察。结果获取犬的颈外静脉后,实验采取了翻转后酶消法,所获得的内皮细胞纯度和数量得到了提高;经过鉴定确实为内皮细胞来源;活性好,增殖快,在较短的时间内能够达到后期实验所需数量。结论经体外培养的犬的颈外静脉内皮细胞可以作为组织工程血管的种子细胞。     

三色荧光原位杂交技术（Triple—FISH）检测男性不育患者精子染色体的非整倍体性

目的：研究精子非整倍体染色体与男性不育之间的关系。方法：用荧光原位杂交（FISH）技术,对12个不育患精子的染色体进行了研究,其中,10例少,弱,畸精症患为A组,2例正常或接近正常的样品为B组,另有2例正常健康献精为对照组,原位杂交采用染色体XY和18号探针,每个个体记数1000个精子,结果：杂交总有效率为98％,在B组男性不育XY和18号的二体频率为0．30％和0．30％,与对照组相比（0．15％,0％）无显差别,XY和18号失体的精子为0．15％和0％,与对照组（0％,0．15％）也无显差别,而A组的XY和18号染色体二体率为1．13％和0．96％,失体为1．13％和1．6％,与前两组相比,差异有显性,估算总的非整倍体率：A组为42．44％,B组为6．05％,对照组为2．59％,前与后两组相比,差异有显性,结论：不育患精子的染色体具有显的非整倍体性。     

哺乳动物的核移植

哺乳动物的核移植陆长富卢光（湖南医科大学人类生殖工程研究室,长沙４１００７８）ＮｕｃｌｅａｒＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎＭａｍｍａｌｉａｎＬＵＣｈａｎｇｆｕＬＵＧｕａｎｇｘｉｕ（ＨｕｍａｎＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＥｎｇｉｎｅｒｉｎｇＬａｂｏｒ...     

转基因动物技术的研究进展

转基因动物是其基因组内稳定整合了所导入的外源基因的动物。目前转基因实验动物体系的研究,主要集中在导入方法和提高整合和表达效率两个方面。本文对这两个方面的进展作一综述。 Abstract：Transgenic animals are those whose genome have foreign genes integrated. Nowadays, researches concentrated in the ways of gene transfer and of improving efficiency of integration and expression.The paper has con cluded these two aspects.     

对数生长与G0期人包皮成纤维细胞Stat1对INF—α刺激反应的差异

Stat1（信号转导与转录活化子1）的激活与刺激因子和细胞组织类型有关,它的活化受体有组织分布特异性,本研究比较G0期和对数生长周期两个不同状态体外培养的人包皮成纤维细胞受到干扰素（INF－α）刺激后Stat1基因mRNA、蛋白质表达以及蛋白质合成效率的差异。结果表明：成对数生长的细胞Stat1的mRNA表达量较对照组增加达10倍左右,蛋白质表达增加3－4倍左右;G0期细胞Stat1的mRNA表达量较对照组增加约3－4倍,蛋白质表达增加约3－4倍;对数生长细胞Stat1蛋白质合成效率明显降低,在翻译水平可能有调控,以上结果提示对数生长和G0细胞对INF－α刺激反应有差异。     

应用RAPD技术对蜘蛛系统演化的初步研究

利用随机扩增多态ＤＮＡ 技术检测了３ 类不同蜘蛛的系统发生关系．用１２ 个随机引物对各实验蜘蛛的基因组ＤＮＡ 进行扩增,选择其中扩增谱带清晰的８ 个引物进行分析并计算不同类蜘蛛间的遗传距离．结果表明：所有８ 个引物获得的ＲＡＰＤ谱带均表现为不同程度的多态性;地穴型蜘蛛与结网型蜘蛛间的遗传距离及结网型与游猎型之间的遗传距离,均比地穴型与游猎型之间的遗传距离近,体现了蜘蛛由地穴→结网→游猎的系统演化进程．这一结论与根据古生物学、胚胎学、形态学及生态学等得出的结论一致,从而进一步从ＤＮＡ 分子水平上为蜘蛛系统演化提供了新的证据．     

O型臂引导下经皮椎间孔镜治疗腰椎间盘突出症

目的:总结O型臂引导下经皮椎间孔镜治疗腰椎间盘突出症术后疗效。方法:回顾性分析77例采用侧入路椎间孔镜技术治疗腰椎间盘突出症患者的临床资料,采用视觉模拟评分法(visual analogue score,VAS)及Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)评估术后疼痛、功能改善等。结果:患者术前VAS7.5±1.2,ODI(%)62.7±16.0,术后6个月VAS1.6±1.9,ODI(%)32.1±24.3,治疗效果明显,且无严重并发症,少数短期并发症可恢复。结论:O型臂引导下经皮椎间孔镜是治疗腰椎间盘突出症安全、有效的微创手术方式。     

一种提高RAPD技术扩增效率的有效方法

RAPD技术是由Williams等于1990年首先创立的一种DNA分子标记技术。但是由于低的退火温度和短的引物序列等原因,常常使得RAPD技术的分辨率和可重复性低。本文介绍一种通过延长从退火到延伸的ramp时间,提高RAPD产物的分辨率和产量,由此提高RAPD技术的扩增效率的有效方法。 Abstract:The random amplified polymorphic DNA(RAPD)is a technique of DNA molecular marker,which was first established by Williams in 1990.The resolution and repetition is low because of the low annealed tempture and short primers in the RAPD.In this paper we introduce an improved method for increasing the efficiency of the technique of RAPD by prolonging the ramp time from annealing to extension and increasing the resolution and production.     

筛选代表小鼠植入前胚胎紧密化相关基因的EST

分别收集181及241枚昆明白小鼠8细胞早期胚胎及8细胞紧密化胚胎,采用SMART PCR方法直接合成胚胎双链cDNA。进而运用抑制消减杂交技术（SSH）对8细胞早期胚胎及8细胞紧密化胚胎的基因表达进行研究,并将所获得的差异表达产物按片段大小分段分离纯化后克隆入pUCm-T载体中,经PCR鉴定后挑选阳性克隆进行测序,筛选出27个代表8细胞早期胚胎和紧密化8细胞胚胎差别表达基因的cDNA片段;经与GenBank中收录的序列进行同源性匹配分析,证实其中17个cDNA片段为新的EST,提交GeneBank后被接受并给予了新序列编号。这17个片段均可能为与紧密化密切相关的新基因的表达片段,为进一步克隆新的紧密化相关基因的全长cDNA及后续新基因的结构和功能研究打下基础。通过采用不同长度大小片段分别克隆的方法,可获得较长片段的EST,避免差异表达大片段的丢失。Abstract: A total of 181 8-cell embryos and 241 8-cell compacted embryos were collected respectively from Kunmingbai mouse and their cDNA was synthesized directly using SMART PCR. Genes, which expressed differently between early 8-cell embryos and 8-cell compacted embryos, were investigated using the method of suppression subtractive hybridization (SSH). Then PCR production was cloned into pUCm-T vector respectively according to the size after isolated and purified. Twenty-seven ESTs (expressed sequence tags ) of genes expressed differently between early 8-cell embryos and 8-cell compacted embryos have been isolated and cloned. seventeen of those were novel ESTs after being confirmed by blaster matching in GenBank for homology analysis. And they were banked into GenBank with accession numbers. All 17 ESTs might be for novel genes related to compaction in compacted embryos. And longer ESTs may be obtained by cloning according to the size.