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赖氨酸脱羧酶(LDC)催化赖氨酸脱羧形成尸胺。该研究采用RT-PCR技术从耐冷黄瓜‘Chipper’中分离到一段c DNA序列,利用DNAMAN6.0软件进行氨基酸序列分析,用BLASTp对蛋白的保守序列进行比对,用双酶切法和T4DNA连接酶构建了植物超表达载体p CAMBIA1304-LDC,通过在烟草不定芽诱导和生长培养基中添加不同浓度的潮霉素(Hyg)以确定不定芽分化和生长的筛选压力浓度,同时优化了菌液浓度、侵染时间和预、共培养时间4个农杆菌侵染条件。结果表明:该序列的CDS全长具有648 bp,编码216个氨基酸,BLASTp结果显示该蛋白具有赖氨酸脱羧酶的保守序列,认为分离到的序列为黄瓜LDC基因,在Gen Bank中的登录号是KC202438;当在叶块不定芽诱导培养基中添加10 mg·L-1的Hyg时,芽诱导率明显降低,为5.41%;当芽生长培养基中的Hyg浓度为20 mg·L-1时,芽苗成活率为33.33%,明显低于对照,因此认为10 mg·L-1和20 mg·L-1的Hyg浓度是抗性芽诱导和生长的筛选浓度;农杆菌侵染时,烟草叶盘不需要预培养,农杆菌OD600值为0.6,侵染5 min、共培养4 d时,侵染效果最好,能获得较高的抗性芽分化率。获得的抗性植株移栽成活后,叶片DNA经过PCR鉴定,获得了29株转化植株,转化率达93.55%。转化植株的获得为下一步基因功能分析提供了材料。 相似文献
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1 利用图式．将基因概念直观化。图式是一种利于快速阅读、增强记忆和开发脑功能的方法．它的优点在于用图形和图形的关联代替文字记录信息。文字是线型的、抽象的、逻辑的,而图形是空间的、形象的、直观的：后者更有利于信息的记忆和提取。图式可以描述事物的各种特征,化抽象为具体．将概念分解为几个部分．并显现出它们之间的联系．由于基因的概念比较抽象,学生不易理解,建议在引出基因的概念后,引导学生看人教版高中《生物》第12页“图6—7果蝇某一条染色体上的几个基因”图,让学生直观地了解基因与染色体的关系。提问：这样一条染色体上有几个DNA?将这样一个DNA通过多媒体或小黑板直观地呈现出来。 相似文献
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“生命活动的调节”共分两小节：第1节是“植物的激素调节”,第2节是“人和高等动物生命活动的调节”。高中二年级的学生已在初中学习过人体的一些主要激素及生理作用的知识,他们对第2小节的内容有一定的了解,而对于第1小节的内容完全陌生．因此,笔者将两小节内容的教学顺序作了调整。即学完第 相似文献
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