链霉菌IMS002的分类鉴定及其抗真菌活性物质解析

【目的】对一株分离自植物根际土壤的具有抗真菌活性的链霉菌IMS002进行菌株分类鉴定,通过活性追踪分离纯化并鉴定有机相中的活性物质。【方法】通过16S rDNA和5个不同基因(atpD,gyrB,recA,rpoB,trpB)串联聚类分析以及生理生化实验分析,对链霉菌IMS002进行菌株分类鉴定,用扫描电子显微镜观察该株链霉菌的菌丝及孢子形态,以尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为指示菌进行生物活性追踪,通过硅胶柱层析、凝胶柱层析及高压液相色谱(HPLC)对活性物质进行分离和纯化,使用液质联用高分辨质谱仪、500 MHz核磁共振波谱仪以及圆二色光谱仪确定该物质的化学结构。【结果】IMS002经初步鉴定与产二素链霉菌(Streptomycesambofaciens)具有较近的亲缘关系,其发酵液对尖孢镰刀菌具有良好的抑菌效果,经分离和纯化以及现代波谱技术分析,确定有机相中的抑菌活性组分为Borrelidin。【结论】链霉菌IMS002能够产生化合物Borrelidin,该化合物对尖孢镰刀菌具有抑制活性。     

红酵母属同工酶酶谱分析及其分类研究

分析了24株红酵母菌的苹果酸脱氢酶、超氧化物歧化酶和酯酶的电泳图谱,并将同工酶酶谱资料进行了聚类分析。结果发现：参试红酵母属内各种间3种同工酶酶谱差异明显,24株红酵母菌被明显分为A、B、C、D、E5群,每一群分别代表一个种（B群除外）,其中A群的18个菌株为Kreger-vanRij（1984）系统中的深红酵母（Rhodotorularubra）,又可分为2个亚群,第AI亚群相当于Lodder等人（1970）分类鉴定系统中的果蝇红酵母（Rhodotorulapilimanae),第AII亚群相当于Lodder系统中的深红酵母。本实验结果还表明,同工酶电泳方法简单易行,能精确地反映菌株之间的微小差异,适用于红酵母属的种级分类,也适用于种下分群,可以作为传统酵母菌分类的一个重要辅助手段,克服单纯依据形态特征和生理生化指标进行分类所存在的弊端。     

草莓拟盘多毛孢叶斑病的病原菌

于2013年在北京市房山区发现了一种新的草莓叶部病害,为明确引起该病害的病原菌种类,采用组织分离法对病叶进行了病原菌的分离,经纯化得到一株病原菌CMF4。通过室内人工接种对该菌株的致病性和寄主范围进行测定,发现该菌株可以导致草莓叶片坏死和果实腐烂,可引起有伤供试植物牡丹、海棠、芍药、杏、樱桃、桃和月季发病,但不能无伤侵入,对人工接种发病的植株进行病原菌再分离可得到原接种病原菌。采用rDNA-ITS序列分析方法并结合该病原菌的形态特征进行鉴定,发现引起该病害的病原菌为棒孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora。这是棒孢拟盘多毛孢所致草莓叶斑病在国内的首次报道。     

芽胞杆菌BJ-6的鉴定及对甜瓜细菌性果斑病的防治

芽胞杆菌是目前植物病害生物防治研究最多的一类微生物,其在自然界中分布广泛,开发潜力大。【目的】为了探究从杏树根际土壤分离的芽胞杆菌BJ-6的分类地位及其防病促生作用。【方法】本研究测定了芽胞杆菌BJ-6的形态和生理生化特征,通过PCR扩增了该菌的16S rRNA、gyrA和gyrB基因并进行了序列测定,通过多基因聚类分析确定其分类地位,平板对峙法测定抗菌谱,盆栽幼苗实验验证其对甜瓜细菌性果斑病的防治效果和对甜瓜的促生作用。【结果】结合形态特征、生理生化特性及多基因序列分析建立的系统进化树,确定菌株BJ-6为解淀粉芽胞杆菌(B. amyloliquefaciens),抑菌实验发现该菌株对15种植物病原菌均有不同程度的抑菌活性,盆栽实验结果发现该菌株发酵液对甜瓜细菌性果斑病有很好的防治效果,并对甜瓜苗有很好的促生作用。【结论】BJ-6属于解淀粉芽胞杆菌,抑菌谱广,且具有防病促生作用,具有进一步开发为生防制剂的前景。     

红酵母属同工酶酶谱分析及其分类研究

分析了２４株红酵母菌的苹果酸脱氢酶、超氧化物歧化酶和酯酶的电泳图谱,并将同工酶酶谱资料进行了聚类分析。结果发现：参试红酵母属内各种间３种同工酶酶谱差异明显,２４株红酵母菌被明显分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５群,每一个分别代表一个种（Ｂ群除外）,其中Ａ群的１８个菌株为Ｋｒｅｇｅｒ－ｖａｎ Ｒｉｊ（１９８４）系统中的深红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｒｕｂａ）,又可分为２个亚群,第Ａ１亚群相当于Ｌｏｄｄｅｒ