氯喹导致大鼠肌组织载脂蛋白E大量表达

载脂蛋白E(ApoE)与迟发的家族性及孤发性阿尔茨海默(Alzheimer)病密切相关. 氯喹慢性中毒可诱发某些肌病理改变, 出现β淀粉样蛋白(βAP)与tau蛋白等的沉积, 与Alzheimer脑中见到的病理改变类似. 为分析这一改变的机制, 用逆转录结合多聚酶链反应技术(RT-PCR)对氯喹处理的大鼠肌肉中ApoE表达的改变进行了研究. 在PCR定量中采用了一种稳定表达的内源性甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA作为内部参照. PCR扩增在很宽的循环数范围内成线性, 且靶mRNA与参照mRNA的扩增效率相当. 氯喹处理后大鼠肌肉中ApoE mRNA的表达从第6周开始增加, 第8周后超过对照组的20多倍. 结果提示, ApoE在氯喹慢性中毒所致的大鼠肌病理改变中发挥某些作用.     

RT—PCR法同时测定APP与tau mRNA的含量

β－淀粉样蛋白前体（ＡＰＰ）与ｔａｕ蛋白是两种与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的病理改变相关的蛋白质,近年来也发现它们或其修饰产物在包含体肌炎及慢性氯喹中毒的肌细胞中沉积。为更好地研究这两种相关蛋白质在肌细胞中的表达,我们建立了用逆转录－多聚酶链反应同时定量这两种相关蛋白质在肌细胞中的表达,我们建立了用逆转录－多聚酶链反应同时定量这两种基因转录产物的方法。本法选用甘油醛－３－磷酸脱氢酶（Ｇ３ＰＤ）作为内标,     

早老蛋白与Alzheimer病

遗传因素是引起Alzheimer病的原因之一,其中的早发型病例大多数是由早老蛋白－1和早老蛋白－2的基因突变引起的。这两个基因分别位于第1和14号染色体上,两者的氨基酸序列具有很高的同源性,均含7次疏水跨膜结构。对两者突变致病机制的研究可能是解开Alzheimer病发病之谜的钥匙。此外,早老蛋白－1、－2可能参与从细胞膜到核的信息传递,调节细胞的生长、分化、凋亡等。     

RT-PCR法同时测定APP与tau mRNA的含量(英文)

β—淀粉样蛋白前体(APP)与tau蛋白是两种与Alzheimer病的病理改变相关的蛋白质,近来也发现它们或其修饰产物在包含体肌炎及慢性氯喹中毒的肌细胞中沉积。为更好地研究这两种相关蛋白质在肌细胞中的表达,我们建立了用逆转录-多聚酶链反应同时定量这两种基因转录产物的方法。本法选用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(G_3PD)作为内标,用激光图像分析测定扩增产物。结果显示,PCR在很宽的范围内呈指数扩增,两种靶mRNA与内标mRNA扩增效率相当,因而可以G_3PD来校正APP与tau的测定结果。初步实验显示氯喹中毒首先促进肌肉细胞中APP与tau蛋白的表达,在第4周达到高峰,然后表达逐渐减少,在第10周转为明显抑制作用。