白细胞介素1β转化酶家庭与细胞凋亡

白细胞介素１β转化酶家族在细胞凋亡过程中起关键作用身心健康已发现５个成员：ＩＣＥ，ＣＰＰ３２，Ｎｅｄｄ－２／Ｉｃｈ－１，Ｉｃｈ－２ＩＣＥｒｅｌⅢ和ＩＣＥｒｅｌⅢ，它们的高表达能引起细胞调邙，同时也受一些物质的调控。     

Application of radiation hybrid in gene mapping

Ｒａｄｉａｔｉｏｎｈｙｂｒｉｄ(ＲＨ)ｍａｐｐｉｎｇｉｓａｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｇｅｎｅｔｉｃｍａｐｐｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗｉｔｈａｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆａｂｏｕｔ500ｋｂ.Ｉｔｈａｓｂｅｃｏｍｅａｇｅｎｅｒａｌｗａｙｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ,ｃｏｎｔｉｇｕｏｕｓｐｈｙｓｉｃａｌｍａｐｏｆｈｕｍａｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ[1].ＢａｓｅｄｏｎｅａｒｌｉｅｒｓｔｕｄｉｅｓｏｆＧｏｓｓａｎｄＨａｒｒｉｓ[2]ａｎｄｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｌａｔｅｒｂｙＣｏｘａｎｄｃｏｗｏｒｋｅｒ…     

酵母双杂交文库筛选及hTRIP15与Y盒结合蛋白-1相互作用的探讨

为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白(hTRIP15)是否与其他核蛋白发生相互作用．以hTRIP15作为“诱饵”,用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库,在高严格度选择培养基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上长出的克隆773个,再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围,经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子——Y盒结合蛋白-1(YB-1)．将插入序列与全长YB—1比较发现进入ORF内230bp,插入序列编码82aa．该蛋白称为YB-1-p,经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验讧实YB-1-P与hTRIP15发生相互作用．提示hTRIP15可通过与YB-1相互作用,参与调控MHCⅡ及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达．     

一个富含谷氨酸的人类分泌蛋白基因hMGRAP的克隆与表达分析

为了筛选有功能意义的新的分泌蛋白,并对其功能进行探索,采用生物信息学工具预测得到一个新的人类分泌蛋白基因hMGRAP(Human Multiple Glutamine Repeat Acidic Protein)。该基因定位于染色体7q22.1,全长cDNA为1547bp,编码含有248个氨基酸的蛋白,该蛋白富含重复的谷氨酸序列, 等电点为4.6。用PCR方法从正常人的混合cDNA文库中克隆到hMGRAP。 Western blot实验表明hMGRAP能大量地从瞬时转染的cos-7细胞中分泌到细胞培养液中。RT-PCR结果显示,hMGRAP相对表达较高的组织为睾丸、骨骼肌和肾。总之,筛选并克隆到一个新的人类分泌蛋白基因hMGRAP,其生物学功能可能因其重复的谷氨酸编码序列而具有一定特殊性。Abstract: To search for human novel secreted proteins and study their biological functions, using bioinformatical tools and experimental approaches, a novel secreted protein, human hMGRAP (Human Multiple Glutamine Repeat Acidic Protein) was obtained. hMGRAP consists of six coding exons spanning 1547bp of genomic DNA on the human chromosome 7q22.1, which encodes a protein with 248 amino acids. hMGRAP is rich of glutamic acid repeated sequence and the PI is 4.6. The coding sequence of hMGRAP was cloned by PCR method from the cDNA pool composed of nine human tissues. Western blot showed that hMGRAP protein was massively secreted out from the transiently transfected Cos-7 cells. RT-PCR result indicated hMGRAP mRNA was abundantly expressed in testis. In summary, a novel human gene encoding a secreted protein hMGRAP has been screened and cloned, and its biological function may specifically relate to its repeated glutamic acid sequence.     

人分泌粒蛋白III的克隆和表达(英文)

研究了一个新的人分泌蛋白基因_分泌粒蛋白III(secretograninIII,SgIII)。SgIII蛋白序列共有 4 6 8个氨基酸残基 ,N端有一段疏水信号肽 ,序列中含有DSTK重复序列和 7对二元碱性氨基酸 (dibasicsites) ,这些结构特点同其他分泌粒蛋白家族成员相类似。人源SgIII蛋白在小鼠、大鼠和爪蟾中各有一个同源蛋白。基因组分析表明 ,SgIII基因位于人 15号染色体上 ,含有 12个外显子 ,分布在 39kb长的基因组DNA上。Western印迹和免疫细胞化学实验证实 ,SgIII蛋白同其他分泌粒蛋白家族成员一样 ,通过分泌途径被分泌到胞外。SgIII在多种组织中都有表达 ,Northern印迹显示SgIII的mRNA主要有 2 .2kb和 1.9kb两种形式 ,但在脑中还有 4 .5kb和 3.3kb大小的两种特异转录本。     

microRNAs功能研究进展

microRNAs(miRNAs)是一类长约20～24个核苷酸的单链非编码小RNA分子,由一段具有发夹结构的70～80个核苷酸长度的单链RNA前体(pri-mRNAs)在类RNaseⅢ酶Dicer的剪切下而生成.miRNAs在各种生物中广泛存在,具有保守性,与机体生长发育、分化、疾病有着密切的联系.主要对MiRNAs最新的功能研究进展进行了综述.     

一种改进的双向电泳染色方法

本文涉及了双向电泳过程中的染色方法,即先用考马斯亮蓝染色,将胶上可见蛋白切下再银染的方法。这种方法可最大限度的减少胶中蛋白质点的损失,不仅避免了单一用考马斯亮蓝染色由于灵敏度不高而导致的低丰度蛋白的损失,也避免了单一用银染而使高丰度的蛋白因染色过度导致的损失。同时两种传统的染色方法结合完美,形成的新方法经济实用。     

生物信息学预测与实验验证相结合策略筛选鉴定新的人分泌蛋白基因

使用生物信息学预测结合实验验证的策略筛选鉴定人新的分泌蛋白基因。用SignalP、SOSUI、PSORT和BLAST等程序对UniProt蛋白数据库进行生物信息学分析 ,筛选出用于实验验证的 1 4个功能未知基因。采用RT PCR方法 ,克隆得到 1 4个基因的全长编码序列 ,并构建到真核表达载体pcDNA3.1 ( - ) Myc His质粒。采用蛋白质印迹与免疫荧光分析 ,检测到其中 7个基因的表达。除其中一个在细胞核表达外 ,其余 6个只在细胞质中表达 ;其中的 4个基因的表达产物在细胞培养液中可被检测到 ,鉴定为 4个新的分泌蛋白基因。