猪下丘脑和垂体中生长激素受体、胰岛素样生长因子1型受体的发育性变化

GH和IGF-1可作用于垂体或/和下丘脑负反馈性地调节垂体GH的分泌,而这种负反馈作用必须通过下丘脑或垂体的GHR和IGF-1R来实现.为研究猪垂体GH分泌负反馈调节的发育性变化和品种特点,分别在0、3、20、30、90、120和180日龄随机选取纯种雄性二花脸猪和大白猪各4头,屠宰并取下丘脑及垂体,用相对定量RT-PCR分析下丘脑和垂体GHR和IGF-1R mRNA水平.结果表明下丘脑GHR mRNA表达呈明显的时序性变化,在0到120日龄期间呈逐渐上升趋势,180日龄时显著下降(P＜0.05),提示在快速生长期,GH负反馈调控机制逐渐加强.下丘脑GHR mRNA表达还表现明显的品种间差异,在0到180日龄期间大白猪均显著高于二花脸猪(P＜0.05);而垂体GHR mRNA表达相对稳定,品种和年龄间差异不显著,提示GH的负反馈作用位点可能主要在下丘脑.IGF-1R与GHR的表达发育模式不同.下丘脑IGF-IR mRNA的表达相对稳定,无显著的年龄、品种间差异;而在垂体,大白猪和二花脸猪IGF-1R mRNA水平在出生时均较高,随后显著下降(P＜0.05),20日龄后逐渐上升至90日龄的较高水平,随后再次下降.大白猪垂体IGF-1 mRNA表达在30日龄和90日龄时显著高于二花脸猪(P＜0.05),而180日龄时二花脸猪垂体IGF-1R mRNA水平却显著高于大白猪(P＜0.05).结果提示,IGF-1长环负反馈作用位点可能不在下丘脑,而主要在垂体.     

二花脸和大白猪脂肪leptin和下丘脑中Ob-Rb基因表达的发育性变化

为研究猪脂肪组织中leptin和下丘脑中Ob-Rb基因表达发育性变化的性别差异和品种特点, 分别于出生当天, 3, 20, 30, 45, 90, 120和180日龄随机屠宰二花脸公、母猪, 大白猪公猪各4头, 采集血样、背部皮下脂肪组织和下丘脑. 用放射免疫法测定血清leptin浓度, 用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 以18S rRNA作内标, 定量分析脂肪组织中leptin和下丘脑Ob-Rb基因表达的发育性变化, 并进行品种和性别间比较. 结果显示: 脂肪组织中leptin mRNA的表达有明显的发育性变化, 随日龄增加而增高, 母猪显著高于公猪, 二花脸猪显著高于大白猪(P<0.01). 二花脸猪和大白猪血清leptin水平的发育性变化模式基本相同, 随日龄增加而增高, 且与脂肪组织中leptin mRNA表达的发育性变化高度正相关(P<0.05或P<0.01), 有性别和品种差异, 总体上母猪显著高于公猪, 二花脸猪显著高于大白猪(P<0.01). 而下丘脑中Ob-Rb mRNA的表达呈现明显不同的发育及品种特点, 在出生后逐渐下降, 然后逐渐回升, 断乳后又逐渐下降, 二花脸猪在120~180日龄又逐渐回升. 大白猪Ob-Rb的基因表达在总体上高于二花脸猪(P<0.01). 结果提示: 二花脸猪和大白猪血清leptin水平和脂肪组织中leptin的基因表达与脂肪沉积相关.     

二花脸和大白猪的脂肪组织中GH-R、IGF-1和IGF-Ⅰ R基因表达的发育性变化

分别于出生当天、3、20、30、45、90、120、180日龄随机屠宰二花脸公、母猪各4头(30日龄仅有公猪),于20、30、90、120、180日龄随机屠宰大白猪公猪4头,采集背部皮下脂肪组织.用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,定量分析脂肪组织中生长激素受体(GH-R)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-Ⅰ R)基因表达的发育性变化,并进行品种和性别间比较.结果表明:脂肪组织中GH-R mRNA的表达有明显的发育性变化及品种差异,二花脸母猪GH-R mRNA水平出生时较低,45日龄达到高峰,之后维持稳定;二花脸公猪GH-R mRNA水平在出生时较高,至45日龄达到最高值,之后显著下降,但总体上没有性别差异;大白猪公猪GH-R mRNA水平极显著低于二花脸公猪(P＜0.01).脂肪组织中IGF-1 mRNA的表达有明显的发育性变化及性别和品种差异,二花脸母猪显著低于公猪(P＜0.05),大白猪公猪极显著低于二花脸公猪(P＜0.01); 脂肪组织中IGF-Ⅰ R mRNA的表达有明显的发育性变化,但在总体上没有明显的性别和品种差异.结果提示:猪脂肪组织中GH-R、IGF-1和IGF-Ⅰ R的基因表达有特定的发育模式,IGF-1基因表达的品种差异可能正是两品种猪脂肪沉积规律不同的主要原因之一.     

二花脸和大白猪的脂肪组织中GH—R、IGF—1和IGF—IR基因表达的发育性变化

分别于出生当天、3、2 0、30、4 5、90、12 0、180日龄随机屠宰二花脸公、母猪各 4头 (30日龄仅有公猪 ) ,于 2 0、30、90、12 0、180日龄随机屠宰大白猪公猪 4头 ,采集背部皮下脂肪组织。用RT PCR方法 ,以 18SrRNA作内标 ,定量分析脂肪组织中生长激素受体 (GH R)、胰岛素样生长因子 1(IGF 1)及胰岛素样生长因子Ⅰ型受体 (IGF ⅠR)基因表达的发育性变化 ,并进行品种和性别间比较。结果表明 :脂肪组织中GH RmRNA的表达有明显的发育性变化及品种差异 ,二花脸母猪GH RmRNA水平出生时较低 ,4 5日龄达到高峰 ,之后维持稳定 ;二花脸公猪GH RmRNA水平在出生时较高 ,至 4 5日龄达到最高值 ,之后显著下降 ,但总体上没有性别差异 ;大白猪公猪GH RmRNA水平极显著低于二花脸公猪 (P <0 0 1)。脂肪组织中IGF 1mRNA的表达有明显的发育性变化及性别和品种差异 ,二花脸母猪显著低于公猪 (P <0 0 5 ) ,大白猪公猪极显著低于二花脸公猪 (P <0 0 1) ;脂肪组织中IGF ⅠRmRNA的表达有明显的发育性变化 ,但在总体上没有明显的性别和品种差异。结果提示 :猪脂肪组织中GH R、IGF 1和IGF ⅠR的基因表达有特定的发育模式 ,IGF 1基因表达的品种差异可能正是两品种猪脂肪沉积规律不同的主要原因之一。     

半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响

实验选取新生仔猪18窝, 随机分为实验组和对照组各9窝, 自12日龄起, 对照组饲喂基础乳猪料, 实验组在基础饲料中添加半胱胺120 mg/kg饲料, 仔猪均于35日龄断奶。分别于断奶前1 周、断奶当天、断奶后36 h、72 h、1周以及断奶后10 d屠宰仔猪取样, 每个时间点随机选取对照组和试验组各6头仔猪, 用相对定量RT PCR方法测定不同日龄仔猪胃组织中H K ATPase mRNA 表达的相对含量, 并同时测定H K ATPase的活性。结果表明: (1) 对照组仔猪在断奶前1 周至断奶后10 d, H K ATPase mRNA相对含量和H K ATPase活性有上升趋势, 两组仔猪在断奶后10 d H K ATPase mRNA相对含量和活性均达到最高水平, 但总体不表现显著的年龄差异; (2) 半胱胺能明显提高仔猪胃粘膜中H K ATPase mRNA的表达, 在断奶前1 周、断奶当天、断奶后1周和断奶后10 d均出现显著差异。半胱胺也能明显提高H K ATPase 的活性, 在断奶当天和断奶后10 d, H K ATPase 的活性分别被提高32 3%和18 3%; (3) 观察期内对照组和实验组H K ATPase mRNA水平和H K ATPase活性之间未发现显著的相关性。以上结果说明: 断奶前后仔猪H K ATPase的mRNA相对含量和活性没有明显的发育性变化, 断奶对H K ATPase mRNA表达和活性没有影响,而半胱     

半胱胺对断奶前后仔猪血清皮质醇、T3、T4和IL-2水平的影响

选取新生仔猪18窝,随机分为对照组和处理组各9窝。从12日龄开始,对照组饲喂基础乳猪料;处理组在基础乳猪料中添加半胱胺,剂量为120mg／kg饲料。两组仔猪均在35日龄断奶。分别于断奶前7d(28日龄,D28),断奶当天(D35),断奶后36h(D36．5)、72h(D38)、7d(D42)、10d(D45),随机选取对照组和处理组仔猪各6头,屠宰采集血样。采用放射免疫分析法测定仔猪血清皮质醇、三碘甲腺厚氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)和白细胞介素-2(IL-2)水平。结果表明：(1)对照组血清皮质醇水平在断奶前保持稳定,在D36．5时升高,在D42时恢复至D35水平,随后保持稳定;处理组血清皮质醇水平在D36．5时较D35有升高趋势,在D38时恢复至D35水平,随后保持稳定。对照组血清T3水平在D36．5显著高于D28,其他日龄点间无显著差异,处理组基本保持稳定。对照组血清T4水平在D36．5时升高,在D38日时恢复至D35水平,随后保持稳定;处理组血清T4水平从D35至D45基本保持稳定。两组中血清IL-2水平在D28至D42保持稳定,D45升高。(2)在D36．5时,处理组血清皮质醇水平较对照组降低30％,处理组血清T3水平在D35和D45较对照组提高49．2％和38．6％,T4水平在D35和D45提高31％和45．8％,在其他日龄点,处理组T3、T4水平较对照组有升高趋势,但差异不显著。处理组IL-2水平在D36．5、D38、D45也分别较对照组提高22．1％、12．6％和17．8％,在其他日龄点有升高趋势。以上结果提示半胱胺能抵抗仔猪断奶应激,提高仔猪血清T3、T4水平,增强仔猪的免疫力。