建鲤GHR基因多态性及与增重相关的SNP位点的筛选

生长激素是调控动物生长的关键因子,它通过与膜蛋白生长激素受体结合后发挥作用,因此生长激素受体基因的变异对动物生长有着重要的影响。实验根据已分离的4个建鲤jlGHRs基因,通过测定来自6尾建鲤的序列,共找到38个SNP位点。使用PCR-RFLP方法检测了353尾建鲤在其中5个SNP位点(1a内含子3 A43G、1a外显子8 A361G、1b外显子8 C12T、2a外显子8 A555G和2b外显子8 A315G)的基因型,分析了不同基因型与生长性状的相关性。结果表明5个位点均与增重显性相关;1a内含子3 A43G还与体高/体长和体厚/体长显性相关;1b外显子8 C12T与体高/体长和尾柄高/尾柄长显性相关;1a外显子8 A361G和2a外显子8 A555G也与尾柄高/尾柄长显性相关。数据分析还显示增重标记个数富集4个以上的个体明显比标记少的个体生长快,在选育群中增重标记数有2个的个体最多占30%,而增重标记数4个以上的只占14%,说明存在着较大的选育空间。实验筛选的5个位点可以作为建鲤分子育种的有效标记。       

普通小麦—提莫菲维小麦白粉病抗性渐渗系中渗入片段的准确鉴定

用小麦（ Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．） 第二部分同源群的３６ 个探针,对携带抗白粉病（ Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｇｒａｍｉｎｉｓｆ．ｓｐ ｔｒｉｔｉｃｉ） 基因Ｐｍ６ 的普通小麦提莫菲维小麦（ Ｔ．ｔｉｍｏｐｈｅｅｖｉ Ｚｈｕｋ ．） 渐渗系进行检测,通过这些渐渗系与受体亲本“Ｐｒｉｎｓ”之间杂交谱带多态性的比较,发现所测出多态性标记位点均位于这５ 个渐渗系的２Ｂ 染色体上,但其渗入片段的位置与大小有明显区别。ＩＧＶ１＿４５６ 和ＩＧＶ１＿４５８ 被鉴定为２Ｂ 染色体从短臂标记Ｘｃｄｏ４０５ 到长臂标记Ｘｂｃｄ１３５ 之间的区域已被提莫菲维２Ｇ 染色体区段所代替;而ＩＧＶ１＿４６３ 则在２Ｂ 染色体长臂Ｘｂｃｄ３０７ 到Ｘｃｄｏ６７８ 标记之间的区域被提莫菲维渗入成分所代替;ＩＧＶ１＿４６４ 、ＩＧＶ１＿４６５ ２ＢＬ染色体上的渗入片段更小,即ＩＧＶ１＿４６４ 在２ＢＬ染色体上标记Ｘｐｓｒ９３４ 与Ｘｂｃｄ１３５ 之间的区域有提莫菲维２Ｇ 染色质成分渗入,ＩＧＶ１＿４６５ 仅在Ｘｂｃｄ１３５ 附近有更小的外源成分渗入。根据５个渐渗系渗入成分重叠区段比较可把Ｐｍ６ 定位于２ＢＬ染色体上Ｘｂｃｄ１３５ ２ＢＬ标记的邻近区域内     

与小麦白粉病抗性基因Pm2紧密连锁RAPD标记的筛选研究

以２５６个随机引物对含小麦抗白粉病基因Ｐｍ２近等基因系进行ＲＡＰＤ分析,发现１７个随机引物的扩增产物在抗、感ＮＩＬｓ材料间表现多态性,且其中５个引物经４次以上重复,均获相同结果,其多态性标记分别为ＯＰＭ０８(１６００)、ＯＰＩ０４(１７００)、ＯＰＨ１９(１１００、ＯＰＥ０９(９００)及ＯＰＭ１６(８５０)。当以这５个随机引物对１４个已知含Ｐｍ２基因的抗病材料及９个不含Ｐｍ２基因的感病材料进行检测时,只有标记ＯＰＩ０４(１７００)在１２个抗病材料中出现（另两个抗病材料中未检测到）,而在９个感病材料中均未出现。进一步用 ＯＰI(０４)对１０２株（Ｃｈａｎｃｅｌｌｏｒｘ Ｕｋａ／８＊Ｃｃ）Ｆ２分离群体进行分析,估算出标记ＯＰＩ０４(１７００)与Ｐｍ２基因间的遗传距离为１２．２±３．３ｃＭ。     

黄花烟草和枸杞属间原生质体融合再生杂种小苗

利用改良的PEG方法以2%的频率诱导黄花烟草原生质体和经IOA失活的枸杞原生体融合。在获得的250块愈伤组织中,有5块为形态上与枸杞愈伤组织类似。对这5块愈伤组织的过氧化物酶和酯酶同工酶分析结果表明,其中的2块(记作Hy2和Hy5)为对称程度较高的体细胞核杂种,其它3块为不对称核杂种或细胞质杂种。细胞学观察指出,Hy2和Hy5的平均染色体数目分别为98.2和59.3。此外,两个杂种的几乎所有中期细胞均含有结构变异的染色体。以小麦rDNA为探针的Southern杂交结果表明,Hy2和Hy5均含有双亲DNA特异片段。从Hy5再生出了形态上介于双亲之间的小苗。对再生苗叶片的酯酶同工酶分析指出,这些小苗含有双亲的特征酶带。     

与小麦抗白粉病基因Pm6紧密连锁的分子标记筛选

以Ｐｒｉｎｓ＊ＰＩ１７０９１４／７＊ＰｉｎｓＦ２分离群体对在Ｐｒｉｎｓ与其Ｐｍ６近等基因系ＰＩ１７０９１４／７＊Ｐｒｉｎｓ之间呈现多态性的ＲＦＬＰ标记进行遗传和图,发现８个多态性标中有３个与转称到普通小麦２Ｂ染色体长臂上的来源于。     

烟草种间的体细胞杂交──Ⅰ．通过原生质体融合将波缘烟草部分核基因组转移给普通烟草

通过“供体──受体”原生质体融合获得５个“波缘烟草＋普通烟草”体细胞杂种细胞系（ＴＵ＿１至ＴＵ＿５）。对５个杂种细胞系的细胞学观察表明,其中２个系为多细胞融合产物,其平均染色体数目分别为１６７．２和１９８．４;３个系为二细胞融合产物,其平均染色体数目分别为５４．３７０．６和６２．８。杂种细胞系的一个明显特征是所有观察的中期细胞均存在数量不等的畸变染色体。对５个杂种细胞系再生植株叶片苹果酸脱氢酶和酯酶的同工酶分析结果表明,它们均为程度不同的不对称核杂种,即只含有供体亲本（波缘烟草）的部分核基因组。以小麦ｒＤＮＡ为探针对杂种细胞系基因组ＤＮＡ的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明,杂种中双亲的载有ｒＤＮＡ的染色体可能均有部分消除;此外,杂种中新ＤＮＡ片段的存在说明双亲ｒＤＮＡ可能发生了分子间重组。两个由多细胞融合产生的杂种细胞系（ＴＵ＿２和ＴＵ＿５）再生苗不易生根而且形态上异常。３个由二细胞融合产生的杂种细胞系（ＴＵ＿１、ＴＵ＿３和ＴＵ＿４）再生苗可生根长大,形态上类似受体亲本;对其根尖的细胞学观察表明,染色体数目在５１─６６之间,说明均为只含有少量供体亲本染色体的不对称核杂种。     

小麦-簇毛麦易位系 6VS/6AL中6VS的遗传传递及其所携Pm21基因的遗传稳定性分析

以簇毛麦(Haynaldiavillosa(L.)Schur)物种专化重复序列探针pHv62及小麦(TriticumaestivumL.)第六部分同源群短臂专化RFLP探针Psr113对扬94_138(“扬麦158”的改良品系)与易位系92R149配制的F2群体进行分析,观察到易位系中的6V短臂在杂交后代中的传递率为69.5%,接近75%的理论值。对来自同一个F1的另外147株F2群体以6个白粉菌菌株进行苗期抗病性测定,检测结果表明6VS上所携Pm21基因在向“扬麦158”小麦基因型转移时,按显性单基因遗传,并能很好地表达。     

黄花烟草和枸各间原生质体融合再生杂种小苗

利用改良的ＰＥＧ方法以２％的频率诱导黄花烟草原生质体和经ＩＯＡ失活的枸杞原生体融合。在获得的２５０块愈伤组织中,有５块为形态上与枸杞愈伤组织类似。对这５块愈伤组织的过氧化物酶和酯酶同工酶分析结果表明,其中的２块（记作Ｈｙ２和Ｈｙ５）为对称程度较高的体细胞核杂种;其它３块为不对称程度较高的体细胞核杂种。细胞学观察指出,Ｈｙ２和Ｈｙ５的平均染色体数目分别为９８．２和５９．３。此外,两个杂种的几乎所有中