传统中草药对肠道益生微生物的作用研究进展

探讨传统中草药对肠道益生微生物的调整作用,重点概述了不同种类与剂量中草药对益生微生物生长的影响及相应的研究方法。在上述基础上对中草药与肠道益生微生物的作用机制、研究前景和发展趋势进行了展望。     

Viili中益生菌的分离及其发酵性质研究

目的 利用传统方法和分子生物学方法从viili中筛菌并对其特性进行研究.方法 采用MRS、YPD和脱脂乳营养琼脂3种平板从viili中分离出15株单菌,利用V3区通用引物和乳杆菌特异性引物对各单菌的PCR产物进行变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)分析,将其归为5种不同菌.结果 16S DNA测序表明,5种单菌分别为Lactobacillus plantarum、Streptococcus thermophilus、Lactobacillus paracasei、Bacillus cereus和Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus.混合发酵实验表明:从viili中筛出的5种菌除Bacillus cereus外均有凝乳现象,其中Lactobacillus delbrueckii凝乳能力强,可在5 h内凝乳;Lactobacillus paracasei、Bacillus cereus和Lactobacillus plantarum组合产生的EPS量最多,高达186.71 mg/L,而Streptococcus thermophilus EPS产量仅为33.56 mg/L.结论 传统方法与分子生物学方法DGGE相结合,可以快速准确判断细菌种类;筛选菌特性研究结果表明,细菌之间的相互作用导致凝乳时间和EPS产量发生变化,其复合作用有待于进一步研究.     

益生菌体外增殖因子的初步研究

目的研究单糖、pH、温度及时间对青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌体外增殖的影响。方法用甘露糖、半乳糖、山梨醇及果糖代替MRS中的葡萄糖,筛选出每种细菌的最适碳源。以此为基础,选择其最佳初始pH、培养温度、碳源添加量及培养时间。结果青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌的最适碳源分别为葡萄糖、甘露糖和半乳糖;最佳初始pH为6.0、7.0和6.0;培养温度为42、30和30℃;碳源添加量为20、15和25 g/L;培养时间都为28-48 h。结论益生菌具有不同的最适增殖条件,本文研究结果为优化益生菌的生长条件提供了基础数据。     

益生菌DGGE Marker的制备及验证

目的 制备指示益生菌标准菌株的DGGE marker并对其可靠性进行验证.方法 分别利用乳杆菌、双歧杆菌特异性引物和细菌V3区通用引物对选取的乳杆菌、双歧杆菌标准菌株DNA进行扩增,利用DGGE检测每个标准菌株条带位置是否与利用这些标准菌株制备的DGGE marker条带相对应.结果 DGGE图谱显示,乳杆菌和双歧杆菌特异性引物或V3区通用引物扩增后的每个标准菌株优势条带,与乳杆菌、双歧杆菌DGGE marker均有对应关系.结论 常见益生菌菌株的DGGE marker可以指示相应菌株的存在;其研制成功,可为微生物生态学中应用DGGE技术检测特定微生物种类的动态变化,提供新的思路.     

PCR-DGGE法评价连续培养模型中肠道菌群的多样性

目的建立人体肠道菌群连续培养模型,验证连续培养模型培养肠道菌群的可行性和稳定性。方法建立连续培养系统,把正常人粪便接种于发酵罐中培养,通过活菌计数和PCR—DGGE法分析连续培养系统中菌群的多样性变化。结果连续培养系统中菌群数量由接种前的10^10～10^11CFU／ml降至10^8-10^9CFU／ml并最终达到稳态;PCR—DGGE法分析结果表明,菌群的多样性指数稳定,各条带均匀度趋于一致。结论连续培养模型能较好模拟人体肠道微生态环境,再现了肠道菌群组成的多样性,可作为肠道菌群培养及菌群相关性研究的离体模型。     

益生菌拮抗阪崎肠杆菌的初步研究

目的研究鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌等8种常见益生菌对阪崎肠杆菌的拮抗作用。方法采用牛津杯法测定益生菌耗尽上清对阪崎肠杆菌的抑菌圈,获得对阪崎肠杆菌具有较强抑菌能力的鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌;采用混合培养法对2株益生菌与阪崎肠杆菌的拮抗竞争能力进行测试。结果 8种益生菌耗尽上清均能抑制阪崎肠杆菌,其抑菌能力具有热稳定性且依赖于酸性pH环境。阪崎肠杆菌(107CFU/mL)与鼠李糖乳杆菌(108CFU/mL或109CFU/mL)共孵育至24 h,其活菌量开始逐渐下降,至120 h孵育结束下降到105CFU/mL;菌量比为1:10的阪崎肠杆菌与植物乳杆菌共孵育至24 h,其活菌量开始逐渐下降,菌量比为1:100时则提前至8 h,至120 h孵育结束活菌量均下降到102CFU/mL。结论鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌均能有效地竞争拮抗阪崎肠杆菌。     

阴道菌群移植治疗细菌性阴道炎的发展现状及展望

细菌性阴道炎 (Bacterial vaginosis,BV) 是由患者阴道内菌群失调导致的一类疾病。当前常规的抗生素疗法可进一步加剧阴道菌群失衡、破坏阴道酸性环境、导致耐药,因此其对BV治愈率低,复发率高。作为一种新兴的活菌疗法,阴道菌群移植 (Vaginal microbiota transplantation,VMT) 直接将健康妇女完整的阴道菌群“嫁接”给患者,可迅速恢复患者阴道菌群的平衡,改善患者的整体健康。文中对VMT的发展历程进行了回顾,讨论了VMT发展过程中面临的难题及发展方向,以期寻求新的治疗BV的策略,加速VMT的临床应用。     

豆豉发酵中的微生物和功能性组分研究动态

豆豉是一种以大豆为原料经微生物发酵而制成的传统发酵食品,它具有营养丰富、药用价值高的特点。本文比较了4种类型豆豉的制造工艺差别,以及形成的不同风味成分和功能成分,分析了不同豆豉中的主要发酵微生物及群系与其作用,为进一步研究豆豉的现代生产工艺提供了资讯。     

不同剂量恩诺沙星对连续培养系统中肠道菌群的影响

目的 研究不同残留剂量恩诺沙星对连续培养系统中肠道菌群数量的影响.方法 建立4套连续培养系统,接种正常人粪便于发酵罐中,连续培养肠道菌群23 d;第23天发酵罐中分别泵入含恩诺沙星剂量为0、1.25、12.5和125 mg/L的培养基,连续加药7 d,第31天停止加药.加药前10 d和加药过程中每隔2 d从4个发酵罐中取样并进行活菌计数.结果 活菌计数结果表明,空白组菌群数量稳定,说明4套连续培养系统运行稳定;低剂量组(1.25 mg/L)恩诺沙星使双歧杆菌下降3个数量级,对其他菌基本无影响;中剂量组(12.5 mg/L)中除拟杆菌外数量均有所下降,厌氧总菌、乳酸菌和肠杆菌停药前数量恢复到加药前水平,需氧总菌、双歧杆菌和肠球菌数量下降后不能恢复原初水平;高剂量组(125 mg/L)中所计数细菌数量均发生变化,需氧总菌、乳酸菌、双歧杆菌、肠球菌和拟杆菌数量下降且停药前不能恢复原初水平,厌氧总菌和肠杆菌数量先降后升,最终计数结果比加药前数量增加.结论 中国现行规定恩诺沙星的日允许摄入量(ADI)可能对人体肠道菌群造成影响.     

2株动物微生态制剂菌的分离鉴定及其生物学特性初步研究

目的从饲料中进行微生物的分离与培养,筛选动物微生态制剂候选菌株。方法利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)筛选得到的7株微生物区分为2种菌,经测序确定其为热带假丝酵母和植物乳杆菌;检测了不同pH、温度、胆盐、金属铜和需/厌氧对其生长的影响。结果当pH小于2.5或铜离子高于150 ppm时,植物乳杆菌无法生长,而热带假丝酵母数量略有下降;胆盐和金属离子对2种菌影响较小,42℃培养条件下相对于30℃培养时热带假丝酵母数量下降了6个数量级。结论筛选得到的2株菌具有应用于动物微生态制剂的潜力,为动物微生态制剂候选菌筛选和评价提供了基础数据。