源于129S1品系的小鼠胚胎干细胞系的建立及其生物学特性分析

从129S1小鼠早期胚胎的内细胞团分离、培养类胚胎样细胞,经反复传代,成功地建立了129S1小鼠胚胎干细胞系,命名为NM-2细胞系。形态学鉴定具有胚胎干细胞的典型形态特征,正常核型率为80％;呈碱性磷酸酶阳性、表达胚胎干细胞特异性转录因子OCT-4;体内分化后可形成源于三胚层的组织结构;经囊胚腔显微注射后所获得的子代个体中79％具有毛色嵌合表型;雄性嵌合个体中31％发生生殖腺嵌合;同时,通过育种观察到所有生殖腺嵌合体的子代小鼠表型正常。以上结果证实NM-2细胞系为一株具高生殖腺嵌合能力的小鼠胚胎干细胞系。     

正常肝信息核糖核酸的翻译和对离体肝癌细胞的逆转分化作用

正常肝信息核糖核酸是从肝聚核蛋白体抽提RNA,通过寡聚(dT)纤维素亲和层析制备。分离的正常肝mRNA在麦胚蛋白合成系统和爪蟾卵翻译系统检定,能够翻译白蛋白,由此证明是有生物学活性的。用正常肝mRNA在离体情况下对肝癌细胞进行逆转分化研究,发现:(1)小鼠正常肝mRNA能抑制小鼠腹水肝癌细胞核酸和蛋白质的合成;初步见到人的正常肝mRNA能轻度抑制人体肝癌细胞(BEL-7404)的生长。(2)相应的正常肝mRNA分别在小鼠腹水肝癌和人肝癌细胞诱导了白蛋白合成;在人体肝癌细胞内核蛋白体聚成聚核蛋白体。(3)人体肝癌细胞受刀豆凝集素(Con A)凝集的能力减弱,这种凝集特性的改变,可以维持至3次细胞传代。这些实验结果显示肝癌细胞并非固定不可改变的,在正常肝mRNA作用下能够向正常逆转分化;讨论了mRNA转化机理,认为可能是通过肝mRNA翻译的蛋白质或mRNA本身直接调节基因转录来实现的。     

体外器官培养大鼠肝癌的初步研究

癌肿组织的器官培养,可为抗癌药物的筛选、肿瘤细胞生物学特性、肿瘤细胞逆转分化等方面研究提供较为理想的模型。这方面的研究国外已有不少报道(Tchao等,1968;Ellison等,1969;Yar-nell和Ambrose,1969a,b;Rubinstein等,1973;Wolff和Wolff 1975)。但是,器官培养的肝癌迄今未见报道。我们采用二乙基亚硝胺诱发的大鼠移植性的甲胎蛋白呈阳性的肝癌(BERH-2)(强家模等,1978),以琼脂半固体培基进行器官培养。一组培养物已在体外繁殖并     

神经细胞老化实验研究模型:无血清条件下培养小鼠神经母细胞瘤细胞

本文报道的在无血清条件下培养小鼠神经母细胞瘤细胞,应用显微荧光光度测定法来定量观察脂褐素自发荧光现象的增长,是神经细胞老化实验研究一种实用的模型,可适用于多种基础或应用的研究。我们认为对某些细胞株,在适用的实验研究情况下,应用较简单的无血清培养条件完全是可以实行的,应该提倡推广。     

体外培养细胞的显微注射

借助玻璃微吸管进行体细胞显微注射技术是由Graessmann(1968)和Liacumakos等(1970)发展起来。这种技术已成功地将DNA、mRNA、tRNA和蛋白质等显微注射进细胞内,并研究其生物效应。目前已经能将一个体外培养的体细胞作为“活试管”,通过显微注射技术,把DNA等生物大分子注射进细胞内来研究复杂的生物学现     

微量聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

聚丙烯酰胺凝胶作为电泳分离的支持物于1959年首次得到应用,而聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳则是于1964年发展起来的。同年在分离脑蛋白时,首先应用了微量聚丙烯酰胺凝胶电泳。1965年有人将毛细管用于微量盘状电泳技术并报道了毫微克(ng)蛋白的分离及定量。     

人体肝癌细胞中期染色体的分离纯化

纯化的中期染色体不仅可供染色体结构和化学组成的研究,而且可借纯化了的中期染色体将基因由一体外培养的哺乳动物细胞转移到另一哺乳动物细胞,为基因的染色体定位     

人体肝癌细胞系体外恶性浸润行为的研究

恶性浸润和无限制增生是恶性肿瘤细胞生物学行为的两大特征,常被作为区别肿瘤良、恶性的重要标志,多年来已受到细胞生物学家和临床学家所重视。近年,国外运用组织培养术对人体和动物某些肿瘤的体外浸润曾做了一些工作,虽然有个别观察结肠癌肝转移标本的体外浸润,但是,对于人体肝癌的类似研究,迄今文献上尚未见报道。现就我们对人体肝癌细胞系与鸡胚中肾器官联合培养的实验结果报道于下。     

瑞典Pharmacia公司在沪举办细胞生物学新技术讲习班

四月初,瑞典Pharmacia公司Oldentoff先生和Bartlett博士前来上海细胞生物学研究所举办细胞生物学新技术讲习班。沪、杭、宁、苏地区有关科研机构和高等院校的100名人员听了讲座,有54人观摩了示范实验并进行了实验操作。讲座内容包括:应用一种新的密度梯度介质Percoll分离细胞、细胞器、细菌及病毒细胞亲和层析方法;细胞学研究中Lectins和ProteinA的应用;Cytodexl应用于大量繁殖细胞等。瑞典外宾     

活试管—应用蛙卵活细胞系统研究基因表达

当人们提到实验胚胎学时,总是要联系到两种有贡献的生物材料:蛙卵和海胆卵。尤其是前者,对发育生物学的基本问题如极性、梯度、场区、诱导、再生、分化以及核质关系等研究作出了贡献。对这些问题的研究,蛙卵系统有其独特的优点,这是众所周知的。当今,生物大分子功能的研究是分子生物学的一个重要课题。但是,研究生物大分子的功能及其在细胞内的行为,仅藉无细胞系统是不能完全解决的,这就需要一个理想的活细胞