微卫星分子标记与松浦镜鲤3个表型性状的相关分析

本文利用SPSS 13.0分析软件对194尾松浦镜鲤的体重、体长和尾长值进行相关分析,并选用扩增效果好的30个微卫星标记,检测新品种松浦镜鲤繁殖群体的有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)等遗传参数,以卡方检验估计群体Hardy-Weinberg平衡,最后还将30个基因座的不同基因型与个体的体重、体长和尾长进行了相关分析.结果显示,体重与体长高度线性相关,差异极显著;尾长与体重、体长分别呈显著相关,差异显著.多样性指数结果表明共检测到172个等位基因,片段长度在115～432 bp之间,有效等位基因数为1.14～5.32;观测杂合度为0.07～0.92,期望杂合度为0.13～0.91;多态信息含量为0.12～0.79,其中高度多态(PIC≥0.5) 21个,中度多态(0.25≤PIC≤0.5) 7个,表明这个群体的多样性较高,信息含量比较丰富.我们还发现有4个遗传位点:HLJ328、HLJ693、MFW29和MFW48与体长性状显著相关(P<0.05),其中,位点HLJ328、HLJ693和MFW48还与体重性状显著相关(P<0.05),未发现与尾长性状相关的位点.本文获得的这些标记具有生长特性优势,可作为松浦镜鲤分子辅助育种的参考标记.     

鲤鱼cDNA-AFLP技术反应体系的建立

将cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术应用在鲤鱼基因的转录表达研究中,本文通过对cDNA-AFLP主要步骤的优化和改进,建立起鲤鱼cDNA-AFLP反应体系.结果表明,采用MseⅠ和 BstYⅠ酶切鲤鱼cDNA 100 ng,分别处理2 h和3 h后,以接头浓度分别为2 pmol/μL和0.2 pmol/μL、T4连接酶浓度为0.12 U/μL的反应体系进行连接.以稀释50倍的预扩增产物为模板、BstYⅠ和MseⅠ比例为1:4的引物配比进行选择扩增可得到稳定的扩增结果.本研究建立的cDNA-AFLP技术将为鲤鱼转录组研究建立基础和技术支持.