蛹虫草中虫草素的提取及纯化工艺研究

目的:优化从蛹虫草中提取、纯化虫草素的方法并鉴定其纯度.方法和结果:通过3种提取方法的比较,确定了以恒温水浴法作为虫草素规模化提取方法,最佳提取条件为45℃、80％乙醇;同时,确定了ML-7大孔树脂纯化虫草素的工艺,采用该工艺虫草素纯度可达到92％以上,并对纯化虫草素和标准品进行了比较鉴定.结论:该方法提取、纯化的虫草素纯度高,适于虫草素的规模化生产.     

九如天宝液含雌性激素样物质的作用研究

以柞蚕雌蛾提取液为主要成分的九如天宝液,经药效学和临床验证表明：腹腔注射和灌胃高、中、低三个剂量均可使丙殴事九素所致的大鼠前列腺增生的体积明显缩小,重量减轻（P值均＜001）,高利量腹腔注射与阳性对照药物雌H醇的效果接近;治疗前列腺肥大的总有效率达92．1％,妇女更年期综合症的总有效率达88.0％     

皂质芦荟的组织培养

将皂质芦荟的茎段及幼苗作为外植体进行组织培养,试验结果表明：皂质芦荟的茎段经40d左右可诱导形成愈伤组织,再经20d萌生再生芽：幼苗培养需要30d左右基部直接分化再生芽。同时经试验筛选出愈伤组织形成、再生芽分化和生根的最适培养基为：MS＋6－BA 2.0mg/L NAA 0.1mg/L、MS 6-BA 3.0mg/L NAA 0.1mg/L和MS NAA 0.3mg/L。     

柞蚕蛹培养蛹虫草不同时间后的代谢组分析

为了解柞蚕蛹培养蛹虫草（简称柞蚕蛹虫草）不同时间后的代谢物变化规律,利用广泛靶向代谢组学技术,比较不同培养时期的柞蚕蛹虫草代谢产物成分,找出差异代谢物并进行代谢通路分析。在柞蚕蛹虫草的5个生长时期共检测到10类421种化合物,主要包括：氨基酸及其衍生物、核苷酸及其衍生物、萜类、酚酸、有机酸、糖及醇类、甾体、脂类、生物碱、醌类等多种化合物。主成分分析（PCA）结果显示,不同生长时期柞蚕蛹虫草的代谢组表现出不同的代谢特征,5个生长时期样本在得分图中可分为3个不同区域,对照（S1）与子座形成初期（S3）归为一区,菌核期（S2）独自归为一区,子座形成期（S4）和子囊壳形成期（S5）归为一区。S2-S5筛选到的特有差异代谢物有36种,包括虫草素、甘露醇等主要活性物质,其中香豆酰腐胺、五羟色胺、γ-生育三烯酚等物质首次被检测到。对不同生长阶段变化排在前20的差异显著代谢成分进行分析,结果表明上下调幅度较大的物质多为有机酸、酚酸、生物碱、核苷酸及其衍生物等次生代谢产物。5个生长时期筛选出的所有差异代谢物共富集在154条代谢通路上,差异代谢物数量富集最多的前5条通路,分别为代谢途径、次生代谢物的生物合成、ABC转运蛋白、嘌呤代谢和氨酰生物合成。整个生长周期中,具有显著影响的通路是嘌呤代谢与丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢途径。本研究结果可为柞蚕蛹虫草的深入研究与应用提供参考。     

芦荟汁对植物生长调控作用的研究

用不同浓度的芦荟汁处理萝卜种子和烟草叶片,研究其对种子发芽率和烟草叶片再生频率的影响,结果表明。用40％浓度的芦荟汁处理的种子发芽率最高,为59％;与对照组相比,发芽率提高了14％;芦荟汁浓度超过60％时,对种子的发芽具有一定的抑制作用;而用20％浓度芦荟汁处理的烟草叶片的再生频率最高,达到33．8％,而且芽生长的也较快,超过20％随浓度增大,叶片的再生频率反而下降,100％浓度的叶片再生频率只有1．7％。     

芦荟汁对银杏悬浮培养细胞的生长及次生代谢产物合成的影响

将无菌芦荟汁按不同比例添加于银杏细胞悬浮培养基中,研究其对银杏细胞的生长及次生代谢产物合成的影响,结果表明,添加０．１％的芦荟汁,银杏细胞干重达１６．０７ｇ／Ｌ,比对照提高了１３％;添加０．０５％的芦荟汁可明显促进银杏悬浮培养细胞次生代谢产物合成,总黄酮含量比对照提高了１６．７４％。     

蛹虫草对人胃癌细胞BGC-823生长抑制与诱导凋亡作用研究

目的研究蛹虫草水提物（the aqueous extract of Cordycep Militaris,AEoCM）对人胃癌细胞（BGC-823）生长抑制与凋亡诱导作用。方法采用不同浓度的AEoCM分别作用于胃癌BGC-823细胞,24、48和72h后,应用倒置相差显微镜观察胃癌细胞的形态变化,四氮甲基唑蓝（MTT）测定细胞生长抑制效应,流式细胞仪（FCM）检测细胞周期变化及凋亡率,免疫组化方法测定NK-k BP65的表达。结果AEoCM能显著抑制BGC-823细胞增殖,且在一定的浓度范围内呈时问和浓度依赖性。形态学观察发现,细胞变暗、皱缩,形状不规则;FCM检测结果显示,G2期的细胞于作用72h后分布显著增加,使细胞阻滞于G2期。0．5g／L AEoCM在24、48和72h凋亡率分别为4．655％、11．039％和19．368％,其凋亡程度与时间呈正相关,免疫组化方法测定NK-k BP65的表达下调。结论AEoCM能明显抑制BGC-823细胞的生长,诱导其细胞凋亡,其诱导细胞凋亡的机制可能与下调NK—k BP65的表达有关。     

柞蚕蛹虫草代谢物组分分析及对高尿酸血症的作用

采用定量检测和代谢组学方法对柞蚕蛹虫草的成分和参与的代谢途径及通路进行了分析,并开展了其对嘌呤代谢障碍引起的高尿酸血症作用研究。结果表明,柞蚕蛹虫草共含有代谢产物233种,其中不仅含有定量检测已经报道的虫草素、虫草酸等成分,还含有皮质固醇、肾上腺素及谷胱甘肽等多种特殊代谢成分,这些成分主要隶属于羧酸及衍生物、有机氧化合物及脂肪酰基类等10个不同类别,KEGG分析其显著性富集在ABC转运蛋白、氨基酸生物合成及嘌呤代谢等19种代谢途径;动物试验结果表明,柞蚕蛹虫草中、高剂量组与模型组比较,血尿酸水平和黄嘌呤氧化酶活性均显著降低（P<0.05）,对防治高尿酸血症具有明显的作用,并对其作用机制进行了分析探讨。本研究为柞蚕蛹虫草在高尿酸血症作用及其相关药理学研究和开发应用提供了理论依据。