GA3、ABA对未成熟‘博Ⅱ优15’水稻种子萌发的影响

以未成熟水稻'博II优15'种子为材料,用不同浓度GA3、ABA浸种24 h,研究其对水稻种子萌发的影响.结果表明,GA3 0.10～2.00 g/L处理能极显著促进种子萌发,其中0.50 g/L效果最好,第4天发芽率高于对照(CK)56%;浓度大于0.50 g/L ABA处理显著抑制种子萌发;GA3与ABA协同处理时, GA3/ABA = 1:1(浓度0.05 g/L)和 GA3/ABA = 1:2(浓度0.01 g/L)均能极显著促进种子萌发,第7天种子发芽率分别比CK高30%和20%.进一步研究表明,GA3和ABA对未成熟水稻种子萌发的影响与α-淀粉酶活性相关.     

自然越冬期姜花属植物生理指标变化及抗寒性评价

为了解姜花属(Hedychium)植物的抗寒性并筛选抗寒种质,测定了3种姜花属植物和11个品种在自然越冬过程中的相对电导率、可溶性蛋白质和MDA含量及SOD、POD活性的变化,采用主成分分析结合隶属函数法对姜花属植物抗寒性进行综合评价及聚类分析。结果表明,姜花属植物的5个生理指标随越冬时间的延长均呈先上升后下降的变化趋势,多数于气温最低月(2月)达到最大值。同一时期,抗寒性强的种类或品种的相对电导率和MDA含量较低,而SOD和POD活性及可溶性蛋白含量则较高。SOD活性与MDA和可溶性蛋白含量分别呈显著负相关和极显著正相关;MDA含量与可溶性蛋白含量呈极显著负相关;相对电导率与MDA含量呈极显著正相关。主成分分析表明,5个指标可转化为2个主成分,累积贡献率达81.29%。综合评价结果表明,姜花属植物的抗寒性由强到弱为:‘橙汁’姜花、‘橙塔’姜花、‘活宝’姜花、‘黄白’姜花、白姜花、‘西里岛’金姜花、‘伊丽莎白’姜花、‘粉红色’姜花、峨眉姜花、‘塔拉’金姜花、‘绝色’姜花、‘美梦成真’姜花、‘白星’姜花、‘星爆’姜花。这为筛选姜花属优良的抗寒种类和品种资源的推广与应用提供了理论和实践依据。     

兰花病毒检测技术研究进展(综述)

综述近年来应用于兰花病毒检测的各种技术。较详细地介绍了血清学方法和分子生物学方法的应用情况;简述一些常用检测方法的优缺点,为在兰花生产中建立快速简便的病毒检测技术提供参考。     

甘蔗宿根矮化病多克隆抗体和免疫磁珠的制备

本研究通过制备Lxx(Leifsonia xyli subsp.xyli)免疫磁珠,实现对甘蔗Lxx进行分离,用于病原菌与甘蔗互作的深入研究。以RSD PCR检测呈阳性的感病甘蔗为材料,分离培养Lxx抗原进行多克隆抗体制备,利用磁性Fe3O4纳米粒子与Lxx多克隆抗体偶联制备免疫磁珠。根据菌落的形态特征,并结合PCR验证确认所分离到的菌是甘蔗宿根矮化病的致病菌Lxx,免疫兔子后获得了较好的多克隆抗体,间接ELISA测定Lxx多克隆抗体的效价高于204 800。免疫磁珠外观成球性较好,粒径大小在125-268 nm之间,对菌培养液中Lxx亲和性强分离物可用于进一步的PCR实验。Lxx免疫磁珠的成功制备,能够快速实现Lxx的分离与富集,为Lxx与甘蔗互作时期下甘蔗感病性检测和病原菌的富集提供了便捷高效的技术手段。     

台湾牛樟总RNA提取方法的建立

以牛樟Cinnamomum kanehirae根、茎、叶为材料,在RNAprep Pure Plant Kit (Polysaccharides & Polyphenolics-rich)方法的基础上进行改良,建立台湾牛樟总RNA的提取方法。经琼脂糖凝胶电泳、Nanodrop和Aglient 2100检测发现,牛樟根、茎、叶所得RNA的28S和18S比值介于1.7～2.1之间,RNA完整性较好,浓度均在50 ng·μL-1以上,RIN值均大于7。该方法提取的RNA纯度、浓度和完整性均合格,可满足后续分子生物学实验要求。     

甘蔗花叶病毒P1基因的原核表达及其抗体制备

将扩增的甘蔗花叶病毒P1基因克隆到原核表达载体pET-32a上,转化BL21(DE3),获得重组子pET-32a-P1。超声波结果显示,所得的融合蛋白以可溶性的形式存在。SDS-PAGE检测其表达产物与目的蛋白大小一致,割胶免疫注射家兔得到抗体。间接ELISA测定结果表明稀释51200倍仍呈阳性信号,并通过western blot检测,证明抗体特异性良好。     

重组甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白的纯化及其多克隆抗体制备

目的：制备可用于甘蔗花叶病毒（ScMV）E株系（ScMV-E）检测用多克隆抗体。方法：将ScMV-E外壳蛋白（CP）基因连接到pET29a（＋）上,经PCR检测、酶切及测序鉴定获得重组质粒pET29a-CP,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达重组ScMV-E外壳蛋白;采用His Trap Kit纯化目的蛋白,作为抗原免疫新西兰大白兔,制备特异性抗体;通过间接ELISA、Western blot和组织印迹法检测所制备抗体的特异性。结果：SDS-PAGE分析表明,重组融合蛋白含6个组氨酸标记,相对分子质量约43000;Western blot检测显示所获得的抗体特异性良好,间接ELISA法测得血清的效价为1：81 920;甘蔗叶片的组织印迹检测结果显示杂交效果良好。结论：制备的多克隆抗体可直接用于ScMV-E检测,并有望用于制备ScMV-E检测试剂盒。     

7个品种变叶木过氧化物酶同工酶分析

本试验对7个品种变叶木的形态特征进行比较,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对各品种过氧化物酶同工酶进行分析。结果表明,各品种的过氧化物酶同工酶谱不一;7个品种变叶木共有14条谱带,2号谱带最多为11条,5号谱带最少为6条;其谱带分为3个区(A=0~0.18,B=0.18~0.35,C=0.35~0.5);并对7个品种的亲缘关系进行聚类分析。     

侵染厦门地区蝴蝶兰的建兰花叶病毒的分子鉴定

根据已公布的建兰花叶病毒（Cymbidium mosaic virus,CyMV）序列,设计特异引物,利用RT-PCR方法分离克隆了厦门蝴蝶兰CyMV的病毒分离物,获得完整的CP基因序列,并与来自中国和其它亚洲国家的病毒分离物进行同源性分析,其同源性均达96%以上。系统进化树分析结果表明,厦门的病毒分离物与中国台湾、韩国、印度的分离物成簇,而福建、北京和新加坡的病毒分离物独立形成另一簇。     

西番莲花叶病研究及防治方法的进展

西番莲Passiflora edulis是热带亚热带重要水果之一。病毒病害能造成西番莲叶片花叶、褪绿，果实畸形、木质化以及植株矮化，严重危害西番莲种植、制约增产。花叶病是危害西番莲的主要病毒病之一，引起西番莲花叶病的主要病毒有：黄瓜花叶病毒属Cucumovirus病毒、马铃薯Y病毒属Potyvirus病毒、双生病毒属Geminivirus病毒等。本文综述了西番莲花叶病分布及症状特征，病毒生物学特性、传播途径以及检测技术，为研究其发病机制提供参考，同时提出西番莲花叶病害综合防治方法。