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转氨酶(ω-transaminase,ω-TA)作为一种天然的生物催化剂,在手性胺类化合物的合成中具有较好的应用前景。但ω-TA在催化非天然底物的反应过程中存在稳定性差、活性低的缺陷,大大限制了ω-TA的应用。为改善此缺陷,针对来源于土曲霉(Aspergillus terreus)的(R)-ω-TA(At TA),采用基于分子动力学模拟的计算机辅助设计与随机突变、组合突变相结合的策略进行酶的热稳定性改造,获得了热稳定性与活性同步提高的最佳突变酶At TA-E104D/A246V/R266Q (M3)。与At TA野生酶(wild-type, WT)相比,M3的半衰期t1/2 (35℃)由17.8 min提升至102.7 min,提升了4.8倍,半失活温度T5010比WT (38.1℃)提高2.2℃。最佳突变酶M3对丙酮酸和1-(R)-苯乙胺的催化效率分别是野生酶的1.59倍和1.56倍。分子动力学模拟与分子对接结果表明,分子内氢键与疏水相互作用的增加所导致α-螺旋的加固稳定是酶热稳定性提升的主要原因;底物分子与结合口袋氨... 相似文献
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建立了榉树SRAP分子标记技术体系,并在此基础上结合毛细管电泳技术(CE,capillary electrophoresis)对来自贵州、江西、浙江和日本京都的70个榉树优良单株进行指纹图谱构建和遗传聚类分析。筛选出13对SRAP引物,共扩增出2276个位点,均为多态性条带,多态性百分率达到100%,筛选出的任意一条引物在采用毛细管电泳技术的情况下均可将所有样本区分开。70个优良单株间的遗传距离变化范围为0.0078~0.3772,平均值为0.0629;遗传相似系数在0.9218~0.9565之间,平均值为0.9339,说明种源间遗传距离近,遗传相似性较高。SRAP遗传聚类分析结果显示,榉树的分类依次与其所生长的时间、地理位置以及秋季叶色和叶面光滑程度等性状相关。本研究可以为榉树优良单株无性系的分子鉴定、遗传资源管理及品种保护提供参考依据。 相似文献
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3种垂直绿化基质中园林植物干旱适应性的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
夏季高温导致植物失水萎蔫甚至死亡是固化无土基质应用于垂直绿化的一个难题。该研究分析比较了传统基质和2种固化无土基质的保水性,测定了"常春藤"、"黄金络石"、"金禾女贞"、"金森女贞"、"银边六月雪"、"小叶栀子"和"银霜女贞"等7种园林植物在这3种基质中的干旱胁迫响应时间、复水后恢复状况、內源物含量和保护酶活性,并采用因子分析法对7种植物在不同基质中的干旱适应能力进行综合评价。结果显示:(1)传统基质保水性最强,国产固化无土基质"炭棉"次之,进口固化无土基质"保浮科乐"最差。(2)植物在传统基质中的干旱胁迫响应时间最长,"炭棉"其次,"保浮科乐"最短。(3)复水后,植物在传统基质中的恢复情况优于固化无土基质,但一些植物在固化基质中恢复情况也较好。(4)大部分植物在3种基质中叶片MDA含量和POD活性都表现出先增加后减少的趋势,但"常春藤"和"银边六月雪"在"炭棉"中20d的SOD活性显著增加,其他植物在3种基质中的SOD活性都无显著变化;可溶性蛋白含量在3种基质中的变化趋势相似,其中"常春藤"和"银边六月雪"持续降低,其他植物则表现为先增加后降低的趋势。(5)综合评价结果认为,"常春藤"、"银霜女贞"和"银边六月雪"在传统基质中有极强的干旱适应能力,而"常春藤"、"银边六月雪"和"金森女贞"在2种固化无土基质中有较强的干旱适应能力。 相似文献
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