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果胶裂解酶基因PelC表达载体的构建及原核表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从实验室分离保存的1株产果胶酶的菌株(BTC105)中克隆果胶裂解酶基因(PelC)完整开放阅读框,通过载体构建,将目的基因连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希茵BL21(DE3)进行融合表达,在LB(Luria—Bertani)中进行摇瓶发酵,1mmol/LIPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导。结果表明,拘建了表达载俸pET28a-felC,果胶裂解酶主要在胞内表达,酶活最适pH为5.4,最适温度为50℃,Ca^2+对酶活促进作用最为明显,Cu^2+完全抑制了酶的活性。 相似文献
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