昆虫细胞(Sf21)悬浮培养过程中生长限制性基质间歇补加技术的应用

基于Sf21昆虫细胞在悬浮培养过程中所表现出的生长代谢特征,提出以培养液中残糖浓度作为控制参数,并利用限制性基质(葡萄糖和蛋白水解物)的间歇补加技术调控细胞生长的方案。实际控制表明：与批培养相比,Sf21细胞在两种具代表性的昆虫细胞培养基(IPL-41和TC-100)中的生长期和稳定期都得到了有效的延长。TC-100培养液中最高细胞培养密度由3.0×10⁶ cells/mL提高到6.5×10⁶ cells/mL;IPL41培养液中最高细胞培养密度则由7.05×10⁶ cells/mL提高到9.0×10⁶cells/mL。由于限制性基质的间歇补加技术是利用较确定的营养成分来代替复杂昂贵的补料培养基,因此更适合于昆虫细胞的大规模高密度培养。     

转瓶内部结构对无血清悬浮培养昆虫细胞的影响

以昆虫细胞为宿主进行基因工程产品的开发是动物细胞培养领域十分有吸引力的研究方向[1] 。由于昆虫细胞对营养要求极高 ,且对培养环境非常敏感 ,所以一般是在含有兼具营养及保护功能的胎牛血清的培养基中进行培养。血清一方面因其高额成本而限制了昆虫细胞大规模培养技术的发展 ,另一方面又因其成分复杂、富含蛋白而给外源基因表达产物的后处理带来困难。因此 ,昆虫细胞无血清培养技术的开发一直是细胞培养工程领域的研究热点 ,采用无血清培养技术取代传统的有血清培养技术已成为昆虫细胞 杆状病毒表达系统的发展趋势[2 ] 。然而 ,昆虫细…     

昆虫细胞（Sf21）悬浮培养过程中生长限制性基质间歇补加技术的 …

基于ｒ２１昆虫细胞在浮过程中所表现出的生长代谢特征,提出以培养液中残糖浓度作为控制参数,并利用限制性基质（葡萄糖和蛋白水解物）的间歇补加技术调控细胞生长的方案。实际控制表明：与批培养相比,Ｓ１ｆ２１细胞在两种具代表性的昆虫水解物）的间歇补加调控细胞生长的方案。实际控制表明：与批培养相比,Ｓｆ２１细胞在两种具代表性的昆虫细胞培养基（ＩＰＬ－４１和ＴＣ－１００）中的生长期和稳定期部都到有效的延长。ＴＣ     

贴壁培养方式中昆虫细胞的生长限制性因素研究

以昆虫细胞为宿主生产病毒杀虫剂或进行基因工程产品的开发,是动物细胞培养领域十分有吸引力的研究方向。近年来,昆虫细胞的体外培养尽管在培养条件的优化⑴、培养基的开发⑵以及工艺癍程的设计⑶等诸多方面取得了令人鼓舞的进展,但由于对影响细胞生长及代谢的各类限制性因素尚缺乏全面系统的了解,因而目前的技术水平还远不能设计出优化的培养系统以满足产业化的需要。众所周知,细胞的生长和产物的形成是多种环境因素和细胞内复杂代谢反应的综合结果,因此。对生长限制性因素的考察也应有全局观念,即：在重视生化环境(外因)对细胞培养过程影响的同时,也不能忽视细胞株自身性能(内因)对最终培养结果的影响。以往的研究〔4.5〕大多仅就个别营养限制性因素进行孤立地探讨,缺乏从内外因两方面对昆虫细胞培养过程的认识。最近,以微载体技术或堆积床技术贴壁培养昆虫细胞业已证明具有很大的发展前途〔6.7〕。为此．本文以贴壁培养的秋黏虫细胞(IPLB-Sf2l—AE)和粉蚊夜蛾细胞(BTI—Tn一5Bl-4)为研究对象,在考察环境限制性因素的同时,亦从细胞自身特点出发考察了不同细胞株的生长及代谢性能。研究结果可望为贴壁培养技术的深入应用以及培养过程的合理设计提供参考。     

应用动力学方法在线检测Vero细胞培养过程中的摄氧率

流加和灌注培养已被广泛应用于动物细胞培养 ,以获得高活性、高密度的细胞和高的产物得率。在这些培养过程中 ,一般通过离线检测关键参数 (如细胞密度、营养和代谢产物的浓度 )来人为调整灌注速率和补料策略 ,但是 ,当细胞密度较高时 ,由于细胞代谢旺盛使得培养的微环境变化很快 ,这就需要更加频繁快速地调整操作条件 ,从而导致因频繁取样和离线分析所带来的污染危险及大量人力、物力的浪费。这在大规模细胞培养过程中是不可取的。因此 ,要建立大规模、高效动物细胞培养过程 ,有必要研究和探索在线检测技术 ,以实时掌握细胞培养过程所处的状…     

无血清培养昆虫细胞(BTI-Tn-5B1-4)的适应过程

昆虫细胞培养是近年来迅速发展起来的动物细胞培养工程中的一个新领域。人们可以利用杆状病毒在昆虫细胞内的感染、复制,来大量生产昆虫病毒作为生物杀虫剂[1]。而昆虫细胞杆状病毒表达载体系统的建立,则可通过昆虫细胞的体外培养大量表达病毒携带的外源基因。实践证明,这…     

血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白在卵巢癌中的表达及与病情严重程度的相关性

目的:探讨血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)、钙网膜蛋白(Calretinin)及DJ-1蛋白在卵巢癌中的表达及与病情严重程度的相关性。方法:选择2019年3月至2020年3月我院接诊的100例卵巢癌患者为本研究对象,设为病例组,并选择我院同期体检的健康对照组90例,分析两组血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白水平的表达,及其与卵巢癌患者病情严重程度的相关性。结果:病例组血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白水平显著高于对照组,差异显著(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期组患者血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白水平显著低于Ⅲ期、Ⅳ期患者,Ⅲ期患者血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白水平显著高于Ⅳ期患者,差异显著(P<0.05);相关性分析结果中显示,血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白和病理分期之间呈正相关(P<0.05)。结论:在卵巢癌患者中血清PIVKA-Ⅱ、Calretinin及DJ-1蛋白与病情严重程度之间存在着密切关系,可作为卵巢癌的潜在标记物。