GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化

为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4.经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同浓度的IPTG和不同温度诱导下,经SDS-PAGE分析鉴定,表达出Mr约为30 kD的目的蛋白,灰度扫描显示目的蛋白占菌体总蛋白的29.9%,超声裂解后的上清通过Sepharose 4B亲和层析纯化、透析、除盐及冷冻干燥得到高纯度的目的蛋白.本研究成功制备了高纯度的GST-Exendin-4融合蛋白,为下一步进行目的蛋白大规模的生产打下了良好的基础.     

东北虎幼体葡萄糖、四种离子、尿素氮及肌酐含量的测定与分析

用HITACHI 7600-20型全自动生化分析仪对13只东北虎幼体进行了8项生化指标的测定,运用生物统计学分析方法,分别对东北虎幼体雌雄个体间及东北虎幼体与华南虎成体间进行了比较分析.结果表明,东北虎雌雄个体间血清中K 含量呈极差异显著(P<0.01),而葡萄糖、Na 、Ca2 、HCO3-、尿素及肌酐含量并无显著差异;在Cl-、肌酐含量上,雌性东北虎幼体与雌性华南虎有显著差异(P<0.05);雄性东北虎幼体与雄性华南虎在Cl-含量上无显著差异,在葡萄糖及肌酐含量上有极显著差异(P<0.01).