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从黑曲霉发酵液中经硫酸铵分级沉淀,Phenyl-Sepharose疏水柱层析,DEAE-Sepharose 4B阴离子交换柱得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数达10倍,回收率50%。对脂肪酶的性质分析表明:该酶分子质量约为35kDa,最适温度和最适pH分别为37℃和9.5,50℃以下和pH6.0~11.0之间保持稳定,属于碱性脂肪酶。Mg^2+、Ca^2+、Cu^2+、Zn^2+、Co^2+、Mn2^+对该酶有激活作用,而Al^3+、Fe^2+、Fe^3+对酶有严重抑制作用。变性剂盐酸胍和脲对其未见显著影响,而SDS强烈抑制其酶活。用不同氨基酸修饰剂对酶进行修饰,其中NBS和PMSF强烈抑制该酶活性,NBSF和DTT在低浓度下对酶活影响不大,2,3-丁二酮在高浓度下影响其活性。外加稳定剂如NaCl、PEG、甘油、山梨醇、海藻酸钠,均可不同程度的延长脂肪酶的半衰期。在一定质量比条件下,该酶有良好的抗蛋白酶性质。 相似文献
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