甘蔗茎杆特异表达基因启动子的克隆及初步分析

甘蔗茎秆是利用转基因方法生产重组药用蛋白或有价值的化合物的理想器官,构建能在甘蔗茎秆中高水平表达异源蛋白质的表达载体是非常有意义的。而一个高效表达的载体,启动子则是其最重要元件之一,因此,茎秆特异性启动子的获得是甘蔗作为生物反应器的前提。利用染色体步移法克隆到甘蔗己糖转运蛋白基因PST2a 5′端上游的一段长1968bp的序列（ Ppst2a ）,经序列测定及软件分析表明,该序列具有典型的启动子结构。此序列置换植物表达载体pCAMBIA1301上的CaMV 35S启动子,构建植物表达载体,命名为pCAMBIA1900,该启动子下游为gus基因。利用基因枪法转化甘蔗的茎和叶,对gus基因的瞬时表达进行测定,结果表明所获得的己糖转运蛋白基因启动子只在甘蔗茎中驱动gus基因瞬时表达,该启动子具有茎秆特异性。     

无机焦磷酸化酶基因转化甘蔗的遗传研究

甘蔗是我国最为重要的糖料作物,也是一种重要的能源作物,提高甘蔗的含糖量是甘蔗育种的主要目标.通过农杆菌介导法将无机焦磷酸化酶(PPase)基因导入甘蔗,以期获得提高蔗糖含量的转基因植株.经过PPT抗性筛选获得72株抗性植株,并对其进行PPase基因和bar筛选标记基因的双重PCR检测,其中有13株都呈阳性.结果初步证明无机焦磷酸化酶基因已整合到甘蔗的基因组中.     

阴道微生态评价指标监测下治疗细菌性阴道病

目的 了解BV及RBV患者的阴道微生态被彻底恢复与未被彻底恢复停药后的远期复发率差异.方法 137例BV患者(其中RBV 48例)被随机分成A、B两组.A组67例(其中RBV 19例),B组70例(其中RBV 29例).A组治疗至Amsel正常、Nugent评分≤3分、阴道菌群密集度Ⅱ～Ⅲ度且乳酸杆菌占明显优势、H2O2≥2μmol/L时停药;B组治疗至Amsel正常时停药.A、B两组停药后均随访6个月.结果 A组随访6个月复发率为22.39％、但B组高达63.08％.A组中BV患者随访6个月复发率为18.75％、B组为33.33％.A组中RBV患者随访2个月复发率为31.58％、但B组高达86.21％,随访3个月时B组全部复发.结论 动态监测阴道微生态评价指标,能客观指导临床BV治疗.BV患者、尤其RBV患者经个体化治疗,积极彻底恢复阴道微生态环境,明显降低了其远期复发率.     

细菌性阴道病经Amsel、Nugent指导治疗后的远期复发率比较

目的 比较细菌性阴道病(BV)经Amsel、Nugent指导治疗停药后的远期复发率差异.方法 201例BV患者被分成A(62例)、B(59例)、C(80例)三组.三组在治疗、随访过程中同时进行Amsel、Nugent评分检测共1 011例.A组治疗至临床症状消失、Amsel正常、Nugent评分≤3分、真菌和滴虫阴性时停药;B组治疗至临床症状消失、Amsel正常、Nugent评分4～6分、真菌和滴虫阴性时停药;C组治疗至临床症状消失、Amsel正常、真菌和滴虫阴性时停药.三组停药后均随访3个月,并用Amsel法评价BV停药后远期治疗效果.统计分析Amsel、Nugent评分法诊断BV一致性,分析三组BV、RBV患者停药随访3个月BV复发率差异.结果 Amsel、Nugent评分检测BV阳性率分别为27.79％和33.04％,二者差异有统计学意义.停药随访3个月时B组复发率为42.37％,C组为46.25％,但A组仅为16.13％,A组与B、C两组差异有统计学意义.停药随访3个月,三组BV患者复发率均较低且差异无统计学意义,但对三组RBV患者而言,停药随访3个月时,C组全部复发,B组复发率为85.00％,但A组仅为28.57％.A组与B组、C组两组差异有统计学意义.结论 与Amsel方法相比,Nugent评分能更好的指导BV后续治疗.BV患者治疗至Nugent评分≤3分且临床症状消失再停止治疗,可明显降低BV远期复发率,但对于治疗至Nugent评分4～6分且临床症状消失BV患者,为减少远期复发率,应进一步治疗和随访.     

甘蔗转基因甘露糖筛选系统的建立

以甘露糖作为筛选底物,对甘蔗品种新台糖22号进行临界筛选浓度测定,获得愈伤组织的继代、分化、生根的临界筛选浓度。而后应用含有甘露糖筛选标记基因pmi及绿色荧光蛋白报告基因GFP的植物表达载体,通过农杆菌介导法对新台糖22号的愈伤组织进行遗传转化。用所测定的临界筛选浓度先后进行继代、分化、生根筛选培养,获得抗性植株。对获得的抗性植株分别进行pmi基因和GFP基因的PCR检测,以及GFP显微镜荧光检测,结果证实已成功建立了高效的甘蔗转基因甘露糖筛选系统。     

海藻糖在植物遗传转化中的应用

文章介绍海藻糖的性质、生理生化功能和海藻糖合酶基因在植物遗传转化中的应用。     

甘蔗的蔗糖代谢

文章从生理学和生物化学角度对甘蔗中蔗糖的合成、运输以及降解过程的研究进展进行概述。     

甘蔗花叶病的基因工程研究

甘蔗花叶病(Sugarcane mosaic disease)是世界上重要的病毒病害之一,严重的影响了世界甘蔗的产量。对甘蔗花叶病病原菌分类、病原系统侵染的过程、相关致病机理、病原菌检测手段以及抗甘蔗花叶病基因工程的研究现状与前景进行了综述。     

甘蔗锌指蛋白基因ShSAP1的克隆与表达模式

植物中具有A20/AN1锌指结构域的蛋白与逆境应答密切相关,在甘蔗热带种Saccharum officinarum拔地拉Badila中克隆到一个具有A20/AN1锌指结构域的锌指蛋白基因ShSAP1。为研究ShSAP1的基因结构和表达特性,采用PCR和Southern blotting分析了ShSAP1的基因组结构,通过半定量RT-PCR对ShSAP1在甘蔗不同部位、不同胁迫和不同激素处理下的表达模式进行了分析。结果表明,ShSAP1的5'UTR区有两段内含子,大小分别为202 bp和1 052 bp,在     

甘蔗脱毒健康种苗中单糖转运蛋白基因差异表达分析

旨在探讨脱毒处理对单糖转运蛋白表达量的影响,分析了3种甘蔗单糖转运蛋白基因SGT1、SGT2和PST2a在健康种苗和常规种苗不同生长时期的表达量差异。结果显示,在苗期和分蘖期甘蔗脱毒健康种苗叶片中SGT1、SGT2和PST2a表达量高于未脱毒种苗;在拔节期和成熟期甘蔗脱毒健康种苗未成熟茎节中SGT1、SGT2和PST2a表达量也高于未脱毒种苗;而在成熟茎节中表达量没有差异。苗期和分蘖期甘蔗叶片以及未成熟茎节中细胞生长分裂旺盛,需要利用大量单糖以提供能源和生物合成的前体物质。结果表明,该3种单糖转运蛋白基因表达量上升可能提供更多单糖用于细胞代谢,促进脱毒健康种苗的快速生长及最终生物量的积累。