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利用重组DNA技术在大肠杆菌中克隆并表达了金黄色葡萄球菌A蛋白SpA。在E。coli RR1中SpA的表达量随培养温度的升高而增加,42℃的表达量是23℃的6倍,但该在热休克应答缺陷的E.coli CAG597及CAG627中却消失。当删除spa基因上游的一段序列后,仍有SpA表达,但其表达量的热休克效应在E.coliRR1中也消失。这表明被删除的序列后,仍有SpA表达,但其表达量的热休克效应在E 相似文献
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随着DNA重组技术的发展,已有越来越多的遗传工程产品问世。随之而来的是具有生物活性的目的蛋白产品的纯化显得越来越重要,尤其是用于临床医学及蛋白质理化性质、功能等研究的蛋白产品。据统计,在遗传工程中,有70%以上的经费和人力用于后处理工作,而且人们已开始认识到后处理工作的重要性。 相似文献
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本文先简述了IL-1的来源及生物功能,接着对不同生物的IL-1α、IL-1β前体蛋白进行了同源性比较和分析,然后就人类IL-1β分子前结构与功能的关系及空间结构进行了探讨。 相似文献
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我们构建了金黄色葡萄球菌Cowan1株(CMCC26111)的染色体文库,转化大肠杆菌后筛选出一株protein A的阳性克隆。SDS-PAGE及Western-blot结果显示该克隆株表达的重组protein A的分子量为30 000,较天然protein A的小。该克隆中的protein A基因片段的序列分析表明,它含有天然protein A基因的启动子、信号肽以及至少四个与IgGFc段结合的结构域,而不含天然protein A的胞壁结合区,并发现其中有24个碱基对与Uhlen报告的protein A基因不同,由此导致三个编码的氨基酸发生变化,但这些差异并不影响该重组protein A与IgG Fc段的特异结合。 相似文献
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在大肠杆菌中高效表达重组Protein A 总被引:3,自引:0,他引:3
本文构建了高效表达质粒pPA-3,其在大肠杆菌中表达的重组Frotein A仅含天然Prot—ein A的免疫球蛋白Fc段结台区,表达量达菌体可溶蛋白的20%。sDs—PAGE及western—b1ot结果显示,重组protein A的分子量有4种,即33、32.2,29.5和28.6kDa,其中33kDa与理论计算结果一致,推测其它分子量可能是由于胞内蛋白酶降解所致。一步亲和层析即可将重组Protein A从细胞裂解上清液中纯化出来。火箭电泳及酶联免疫分析结果表明,等蛋白量的该重组Protein A比天然Protein A能结台更多的免疫球蛋白。 相似文献
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蛋白 G 是存在于链球菌 C 群和 G 群胞膜上的一种分子量为65kD 的膜蛋白,完整的蛋白 G 分子主要由四部分组成,其中第三部分能与许多动物的 IgG Fc段特异结合。近年来,蛋白 G 的应用研究已展示出广阔前景,它一方面可与多种标记物(如酶、放射性同位素、胶体金等)连接,用于免疫分析;另一方面,可用作纯化单克隆抗体及多克隆抗体的亲和配基。但是有关蛋白 G 的空间结构及其与 IgG Fc 的结合机制 相似文献
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旋毛虫肌幼虫ES抗原的基因克隆及高效表达 总被引:7,自引:0,他引:7
作者对编码旋毛虫肌幼虫ES抗原的部分结构基因进行了克隆、鉴定和表达。用RNA PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫总RNA中反转录并扩增出0.7kh的靶DNA,酶切分析后将其克隆到融合表达载体pEx3lC中。SDS—PAGE电泳表明,含重组子的大肠杆菌能够表达出一分子量为37kDa的融合蛋白(P37),后者占菌体总蛋白的22%以上,并以包含体形式存在于菌体中。经对纯化后表达蛋白的ELlSA检测,证明它能被猪旋毛虫病阳性血清和抗旋毛虫单克隆抗体识别。研究结果揭示,重组蛋白P37对于研制旋毛虫病诊断抗原和免疫抗原具有潜在的应用价值。 相似文献
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