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一个新的二色补血草金属硫蛋白基因LbMT2的克隆及其表达分析 总被引:4,自引:0,他引:4
从二色补血草cDNA文库中分离出一个新的金属硫蛋白基因LbMT2全长cDNA序列。该基因全长518 bp, 其中5′非翻译区(UTR)64 bp, 3′非翻译区205 bp, 开放阅读框(ORF)249 bp, 编码由82个氨基酸组成的蛋白质, 编码蛋白的分子量为8.1 kDa, 理论等电点(pI)为4.72。利用实时定量PCR方法研究了二色补血草在CuSO4、CdCl2、NaCl、低温和PEG胁迫下不同时间该基因的表达模式。结果表明, CuSO4、CdCl2、NaCl和低温处理均能诱导LbMT2基因在二色补血草的根和叶中的表达, 而PEG处理则抑制了LbMT2在根和叶中的表达。构建LbMT2基因的原核表达载体pGEX-LbMT2, 通过IPTG诱导在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21中融合表达, SDS-PAGE 电泳获得35 kDa 的蛋白条带, 大小与预期相符。 相似文献
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目的:观察大黄素(emodin)对大鼠离体空肠平滑肌收缩功能的影响,并探讨其作用机制。方法:大鼠离体空肠标本随机分为7组(n=6):对照组,大黄素剂量组(1,5,10,20μmol/L),普萘洛尔(PRO)加大黄素组,格列苯脲(GLI)加大黄素组,NG-基-L厂精氨酸甲酯(1.NAME)加大黄素组,无钙K-H液对照组及无钙K-H液大黄素组。采用颈椎离断法处死大鼠并分离其空肠,将肠段标本与张力换能器相连并置于氧饱和的K-H液中。采用BL-420E+生物信号采集处理系统记录大鼠空肠平滑肌的收缩张力(TE),幅度(AM)和频率(FR)的影响。结果:①大黄素能使大鼠离体空肠平滑肌的收缩张力和幅度明显下降,且呈剂量依赖性(P〈0.05,P〈0.01);对频率无明显影响。②普萘洛尔(P〈0.05)、格列苯脲(P〈0.01)可部分阻断大黄素对空肠平滑肌的抑制作用。③L.NAME对大黄素所引起的空肠平滑肌的抑制作用无影响。④氯化钙所引起的空肠平滑肌收缩可被大黄素所抑制(P〈0.01)。结论:大黄素能明显减弱大鼠离体空肠平滑肌的收缩张力和收缩幅度,对收缩频率无影响。这种作用可能是通过兴奋肾上腺素8受体、兴奋ATP敏感钾通道、阻断细胞膜上钙离子通道实现。 相似文献
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二色补血草液泡膜H^+-ATP酶C亚基(LbVHA-C)基因克隆和表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从二色补血草cDNA文库中分离出一个V-H^+-ATP酶C亚基(LbVHA-C)基因全长cDNA序列。该基因全长为729bp。其中,开放读码框(ORF)为498bp,编码165个氨基酸,预测编码蛋白的分子量为16.6kDa,理论等电点为8.62。用实时定量RT-PCR方法进一步研究二色补血草在NaCl、NaHCO3和NaCO3胁迫下的不同时间内该基因表达模式的结果表明,NaCl强烈诱导二色补血草叶组织中LbVHA-C基因的表达,但其根部的表达变化不明显。NaHCO3胁迫下LbVHA-C基因在根部组织的表达受抑制。Na2CO3胁迫24h时的LbVHA-C基因在根和叶部组织中的表达都强烈受抑制,随后在根和叶组织的表达量逐步升高。 相似文献
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