利用cDNA微阵列-CGH筛选支气管上皮细胞恶性转化中的扩增基因

目的:基因组不稳定是导致肺癌发生与发展的重要分子机理之一。本研究旨在筛选支气管上皮细胞恶性转化过程中拷贝数扩增的基因。方法:利用业已建立的支气管上皮细胞体外恶性转化模型,通过cDNA微阵列-CGH技术对支气管上皮来源的永生化细胞和癌变细胞的基因拷贝数进行了检测,并对部分结果进行了实时PCR验证。结果:永生化BEP2D细胞染色体中的某些区域存在不同程度的扩增,包括5q31.3、9q32-33.1、14q22.2-23.1、19p13.12-13.13、20q13.12-13.31;恶性转化BERP35T2细胞染色体中的扩增区域集中在1p12-13.1、5q33.1、5q31.3、9q32、19p13.12-13.13;5q31.3、9q32、19q13.12-13.13是以上2种细胞系中的共同扩增区域。共检测到201个基因的拷贝数发生扩增,其中PCNA、TP53及GADD45A基因的异常扩增已经实时PCR进一步验证。结论:在支气管上皮细胞恶性转化过程中,病毒与低剂量辐射的双重作用使得某些重要基因的拷贝数发生扩增,因基因剂量增加而导致某些癌基因高表达可能是细胞恶性转化的重要机制之一。     

HSPC300蛋白的表达对原发性结肠癌细胞迁移能力的影响

目的：探讨HSPC300蛋白与原发性结肠癌发生与发展的关系,及其异常表达的细胞生物学意义。方法：用免疫组织化学方法分析HSPC300蛋白在正常、腺瘤及结肠腺癌中的表达;通过体外细胞迁移系统观察异常表达的HSPC300对结肠癌细胞迁移能力的影响。结果：HSPC300在正常结肠组织中的表达阳性率为25％（5／20）,在结肠腺瘤组织中为15％（3／20）,结肠癌组织中为68％（15／22）。HSPC300在结肠正常组织及腺瘤组织中的表达频率显著低于腺癌（P=-0．0002）。体外迁移实验表明,下调结肠癌细胞中HSPC300的表达可降低其迁移能力。结论：HSPC300在结肠癌的发生、发展过程中是一个晚期分子事件,其高表达有助于结肠癌细胞获得转移潜能。