狗獾粪便DNA提取方法的初步探讨

在京杭大运河扬州段堤坝上采集狗獾的新鲜粪便,采用预处理-酚/氯仿抽提法、NaCl改良法、异硫氰酸胍裂解法、淀粉吸附法及QIAamp试剂盒法5种方法对粪便样品中狗獾DNA进行提取,探讨狗獾粪便样品中DNA提取方法和优化条件。结果表明,在5种提取方法中,淀粉吸附法的效果明显优于其它4种方法。采用粪便裂解液快速裂解细胞后,加入淀粉去除其中的大量PCR抑制物,然后用蛋白酶K裂解、酚/氯仿/异戊醇抽提,最后使用UNIQ-10柱纯化粪便DNA,对线粒体控制区和微卫星位点的PCR扩增反应及测序结果证实该方法的可行性。以上结果表明,通过该方法获得的粪便DNA能够用于更深入的分子遗传学等学科的研究。     

无环鸟苷(Acyclovir)抗乙肝病毒疗效观察

乙型肝炎病毒目前仍缺少有效的抗病毒疗法,我们应用省医工所提供抗病毒新药无环鸟苷治疗慢性乙肝10例,年龄22～37岁,HBsAg~+和抗-HBc~+,伴HBeAg~+9例,持续半年以上。治疗方法和观察方法     

小剂量干扰素对慢性乙型肝炎病毒标志物的影响

本文用小剂量人白细胞干扰素治疗慢性乙型肝炎(30例)及病毒携带者(10例)共40例,干扰素32.000u,肌肉注射,每周3次,治疗观察6个月。其 HBsAg 滴度几何平均值从治疗前1:100.4,3个月下降为1:25.1,6个月为1:17.2,P<0.001,HBsAg 转阴21/40例,占52.5%。6个月后,HBeAg 13/20例转阴,占65%,有抗一 HBe 出现11例;HBcAg2/4例转阴,88.9%的病例 DNAP 为阴性,73.1%的病例 HBV-DNA 为阴性伴 DNAP 阴性。30例肝炎病人的病毒指标转阴优于病毒携带者。对照组20例用聚肌胞治疗6个月,病毒指标无明显改善。从以上五项病毒指标在治疗后下降和转阴,表明小剂量干扰素对乙肝病毒复制有抑制作用。     

小剂量人白细胞干扰素对乙肝病毒3个抗原的影响

本文用小剂量人白细胞干扰素治疗慢性乙型肝炎及病毒携带者20例,疗程3个月,HB_sAg 滴度几何平均值从治疗前1∶97.01±3.74下降为1∶11.5±3.28,P<0.001,有极显著意义,其中 HB_sAg 转阴13例占65%;HB_eAg 阳性7例治疗后6例转阴占85.7%;HB_cAg 阳性3例治疗后都转阴占100%。对照组(聚肌胞)20例治疗前后,3个抗原改变不显著,其结果表明,小剂量人白细胞干扰素治疗乙型肝炎有初步效果。     

RIA法及ELISA法检测血清中HBcAg

HBcAg 是 Dane 颗粒的核心部分的组成成分,为乙肝病毒复制的重要指标。我科先后应用 RIA 及 ELISA 法检测 HBcAg 阳性的乙型肝炎患者94例,其中28例血清 HBcAg 阳性,检出率为29.8%,同时以 HBeAg、DNAP、抗-HB_c 等感染指标进行比较,显示出一定的敏感性及特异性,并可应用于临床作为估计传染性、预后及抗病毒药物疗效观察的较好指标,特别是 ELISA 法不要特殊的仪器设备更适于推广应用。