氨基葡萄糖硫酸盐诱导凋亡中Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位研究

目的:探讨氨基葡萄糖硫酸盐(Glucosamine Sulfate,GS)诱导K562细胞凋亡中溶酶体Cathepsin D释放后与Bcl-xL的细胞内共定位关系。方法:采用5.0mmol.L-1 GS诱导K562细胞凋亡,通过HE染色和流式细胞仪检测细胞凋亡,应用免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察5.0mmol.L-1 GS诱导凋亡前后Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位关系。结果:GS诱导K562细胞72小时后出现细胞凋亡的形态改变,流式细胞仪检测表明细胞出现凋亡,诱导凋亡后的Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位信号增强。结论:GS诱导K562细胞凋亡后Cathepsin D与Bcl-xL存在细胞内共定位关系,具备一定相互作用的空间基础。     

Rb蛋白干涉增强人胃癌细胞SGC-7901对化疗药物顺铂敏感性的研究

目的:研究通过RNAi技术特异性降低人胃癌细胞SGC-7901中的细胞周期调节蛋白Rb表达量,观察对化疗药物顺铂(eisplatin,CDDP)敏感性的变化,并探讨其潜在机制.方法:化学合成针对Rb的干涉序列和对照序列,转染SGC-7901细胞.采用Western blot和RT-PCR的方法检测干涉效率.通过流式细胞术检测干涉Rb对细胞周期的影响.干涉组和对照组细胞分别在10%和无血清的1640培养基中培养,并给予20μM顺铂或对照处理不同时间,采用Western blot检测Caspase-3的活化,通过MTT检测细胞的存活率.结果:设计的干涉序列可以高效抑制Rb的表达,从而促进细胞进入G1期,当细胞在10%的培养基条件下培养时,与对照组相比,Rb干涉的细胞凋亡率明显增加;而当细胞在无血清条件下培养时,干涉和对照组细胞凋亡率无明显差别.结论:干涉Rb可能通过促进细胞进入G1期而增强肿瘤细胞对化疗药物顺铂的敏感性.     

大鼠心肌梗死后螺内酯与氯沙坦干预对其心肌胶原变化的影响

目的:观察大鼠急性心肌梗死(acmemyocardial infarction,AMI)后左心室心肌重构分析和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化,分别使用螺内酯和氯沙坦以及将两药合用对AMI模型进行干预,探索醛固酮受体拮抗剂和血管紧张素受体阻断剂对AMI后心室重构和胶原增生的影响.方法:将50只雌性SD大鼠随机分为AMI组、螺内酯组、氯沙坦组、联合用药组和假手术组,每组10只,结扎大鼠左前降支建立急性心肌梗死模型.术后8周进行血流动力学测定、病理分析和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的测定.结果:AMI组与假手术组相比,左心室舒张末压(LVEDP)、容积、重量和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均显著增加(P<0.05);左心室球形指数、左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dt/LVSP)均显著降低(P<0.05).螺内酯组与AMI组相比,左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著减少(P<0.05),其余各指标差异无统计学意义(P>0.05).氯沙坦组和联合用药组与AMI组相比,LVEDP、左心室实际重量显著降低(P<0.05);左心室容积仅联合用药组有显著降低(P<0.05);而两组的±dp/dt/LVSP显著增加(P<0.05).螺内酯、氯沙坦和联合用药3组与AMI组相比,左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均显著减少(P<0.05);且3组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:螺内酯能有效抑制AMI左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原的增生,提示螺内酯可能有改善左心室重构的潜在作用.氯沙坦与螺内酯合用可更有效防治AMI后左心室重构,改善左心室舒张功能.