近江牡蛎共附生耐热真菌C051的鉴定、生理学特性及抗菌活性研究

为进一步开发利用耐热海洋真菌,以1株近江牡蛎共附生耐热真菌C051为出发菌株,对其进行系统鉴定、生理学特性及抗菌活性研究。采用形态学鉴定并结合18S rRNA序列分析,确定菌株C051为烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。3种培养基比较,适合基础培养基为PDA;生长温度范围为15～50℃,最适生长温度45℃,具有明显的耐热真菌特性;生长pH范围3～9,最适生长pH 6;生长盐浓度0%～16%,最适生长盐浓度3.5%,具兼性海洋真菌的特点。其发酵产物对铜绿假单胞菌(Pseudomons aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、交替假单胞菌属SL-1(Pseudoalteromonas sp.)、金黄杆菌属SL-4(Chryseobacterium sp.)均有良好的抑菌效果,最大抑菌圈直径达22.15 mm,为耐热海洋真菌的开发与研究提供参考。     

高产不饱和油脂海鞘真菌桔青霉Asc-2-4的诱变选育

诱变育种是获得高产菌株,实现微生物工业化生产油脂的重要措施。以前期获得的高产不饱和油脂菌株桔青霉（Penicillium citrinum）Asc-2-4为出发菌株,利用丙二酸建立快速筛选高产不饱和脂肪酸突变菌的方法,通过紫外线 氯化锂复合诱变得到1株高产油脂突变菌Asc-2-4-1,油脂含量比出发菌株提高了92.98%。经过初步的培养基无机盐优化,其油脂得率和不饱和脂肪酸产量达到了7.10 g/L和3.84 g/L,与Asc-2-4相比,分别提高了84.42%和77.78%。结果表明,通过复合诱变选育技术可选育出高产突变菌株,选育的Asc-2-4-1可望作为产油微生物被开发利用。     

抗菌豆豉发酵菌株的筛选及其脂肽组分鉴定和特性研究

目的:从豆豉中分离广谱抗菌活性菌株,并鉴定其发酵产物中的抗菌成分.方法:采用生理生化实验结合16SrRNA序列测定法鉴定目标分离株,通过LC-MS和ESI/CID技术对其抗菌组分进行鉴定.结果:从8个豆豉样品中分离出7株具有抗菌活性菌株,其中抗菌活性较强的分离株NT-6为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其发酵液抗菌提取物的主要成分是抗菌脂肽类物质iturin、fengycin、surfactin同系物的混合物.该提取物对供试革兰氏阳性、阴性细菌、霉菌等指示菌具有广谱的抗菌活性,在pH 2～ 12、121℃条件下加热30min活性不丧失,说明具有广泛的pH适应范围和良好的耐热性.结论:该菌株产生多组分抗菌脂肽,其抑菌谱宽,适应性好,显示了在食品、农业、医药等领域具有良好的应用前景.     

抗菌脂肽制备羧甲基壳聚糖纳米粒稳定混悬液及其抑菌活性

利用抗菌脂肽解决羧甲基壳聚糖纳米粒制备过程中出现的团聚问题,并考察其对羧甲基壳聚糖纳米粒的抑菌效果影响.通过抗菌脂肽乳化分散离子交联法制备羧甲基壳聚糖纳米粒,静置观察其稳定性,乌氏粘度计测定其粘度变化,扫描电镜考察其形态改变,比浊法测定不同浓度纳米粒溶液对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑制作用.实验发现,加入抗菌脂肽制备的纳米粒稳定性好,粘度降低,形态均一,并能显著增强对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑制作用.结果表明,抗菌脂肽的加入能很好的解决纳米粒制备过程中出现的团聚现象,而且其抑菌效果也有很大改善.     

一株耐热珊瑚共附生真菌的鉴定及抗氧化活性的研究

珊瑚共附生真菌及其代谢产物研究活跃，产物种类多样，活性丰富，但珊瑚中的耐热真菌未见报道。对耐热珊瑚共附生真菌C21-5B进行鉴定，研究其生理学特性及代谢产物的抗氧化活性，为该菌的深入研究及利用提供依据。通过形态学观察、18S rRNA序列分析鉴定菌株；通过测量不同海精盐浓度、pH、温度条件下的菌落直径研究该菌生理特性；根据DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率测定该菌抗氧化活性；通过薄层层析和高效液相色谱分析代谢产物活性成分。珊瑚真菌C21-5B经鉴定为土曲霉（Aspergillus terreus）。生理特性研究表明，菌株C21-5B能够生长的条件：海精盐浓度0.0%~20.0%、pH值 2.0~12.0、温度15~45 ℃；最适生长条件：海精盐浓度0.5%~3.5%、pH值6.0~8.0、温度35 ℃。该菌代谢产物的乙酸乙酯萃取物具有较高的抗氧化活性，DPPH和ABTS自由基的EC50分别为0.113、0.504 mg/mL。经薄层层析和高效液相色谱分析，发现该菌代谢产物的中性极性成分偏多，含有生物碱、类脂化合物、还原性物质、黄酮类物质、芳香胺类。菌株C21-5B为耐热、兼性海洋真菌，具有极强的耐酸碱能力，代谢产物种类丰富，并具有明显的抗氧化活性，具有开发利用潜力。     

1株来自丛生盔形珊瑚的球托霉鉴定及生理学特性研究

在丛生盔形珊瑚中分离得到1株形态特殊的共附生真菌XWC14-13,对其鉴定并进行生理学特性研究,为该类珊瑚共附生真菌的进一步研究提供参考。通过观察菌株XWC14-13在CA和PDA培养基的生长特性及个体特征,结合r DNA ITS1-ITS4基因序列的系统发育分析,将其鉴定为卵形孢球托霉(Gongronella butleri)。该菌株菌丝宽度为3.62~8.09μm,有膈膜,不产厚垣孢子,孢子囊大小为(5.15~7.57)μm×(23.53~25.74)μm,孢囊孢子大小为(2.02~3.03)μm×(1.52~2.01)μm。其生长温度、酸碱度和盐度的适应性研究结果表明,该菌最适生长条件为温度30℃,pH 8~8.5,盐度1%,具有一定的耐盐性及酸碱耐受性,属兼性海洋真菌。