洁净室环境监测用培养基贮存效期的验证及方法学确认

目的验证洁净室环境监测用培养基的贮存效期,同时对环境监测浮游菌、沉降菌及表面微生物检测方法进行确认。方法对连续3批次贮存0、90、120 d洁净室环境监测用胰酪大豆胨琼脂(Tryptose soya agar,TSA)培养皿和TSA(L-80)接触皿进行相应菌液适用性检查(包括促生长能力和无菌检查)验证试验;并对贮存120 d TSA培养皿和TSA(L-80)接触皿分别进行环境浮游菌和沉降菌、表面微生物最长采样时间检测,然后再进行促生长能力测试。结果 TSA培养皿和TSA(L-80)接触皿贮存120 d (2～8℃90 d,25℃30 d)的适用性检查结果均符合《中国药典》2015版(三部)对培养基质量控制的要求。贮存120 d TSA培养皿进行洁净室环境浮游菌(主动采样10 min)、沉降菌(暴露采样4 h),以及TSA(L-80)接触皿进行表面微生物(接触采样10 s)检测后均具有良好的促生长能力。结论通过验证试验,确定了环境监测用TSA培养皿和TSA(L-80)接触皿的贮存效期120 d(2～8℃90 d,25℃30 d),并确认了贮存后TSA培养皿进行洁净室环境浮游菌、沉降菌检测的有效性,以及TSA(L-80)接触皿进行表面微生物检测的有效性。     

国产聚酰胺薄膜在生化分析中的应用

聚酰胺薄膜是利用聚酰胺作为涂料固定在载片(涤纶片)上,制成质地均匀含有紧密多孔的薄膜。它是一种新的薄层层析材料。由于它具有分辨力强、灵敏度高、分析速度快、操作方便等优点,今天已广泛应用于各种化合物的分析。国内过去聚酰胺薄膜都由各实验室自己制备,由于受条件限制,质量不能保证,浪费很大,因而无法大量推广。最近,上海生化所与浙江黄岩化学实验厂协作,试制了聚酰胺薄膜,质量较好,能成批生产,从而为此种薄膜在各分析领域中的广泛应用提供了有利条件。前文已报道了聚酰胺薄膜的层析原理及其在蛋白质化学分析中的应用。本文介绍用上述国产聚酰胺薄膜对生化中常用的氨基酸、核     

人CXCL9重组腺病毒的制备及其表达产物生物活性检测

目的构建携带人CXCL9基因的重组腺病毒,分析其表达产物的生物学活性。方法采用PCR法从pBLAST2-hCXCL9质粒上扩增出hCXCL9基因,再将其克隆至pENTR11载体上,构建pENTR11-hCXCL9质粒,通过同源重组将hCXCL9基因片段重组至pAd/CMV/V5-DEST上,最后在293A细胞内进行包装、扩增后得到携带hCX-CL9基因的重组腺病毒。用包装好的病毒感染Hela细胞,分析目的基因的表达及其生物学活性。结果成功地将hCXCL9基因片段克隆至重组腺病毒载体上,并经293A细胞包装出病毒颗粒。该病毒感染Hela细胞后,可在培养上清液中检测到显著表达的hCXCL9。通过趋化活性分析发现,该表达产物对T淋巴细胞具有明显的趋化活性。结论成功构建了hCXCL9重组腺病毒,并可在体外高效表达具有生物活性的目的产物。     

输卵管性不孕患者IVF助孕后自然妊娠--附13例临床分析

目的:探讨输卵管性不孕患者进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后自然妊娠的可能性以及与发生自然妊娠相关的临床条件。方法:对1999年11月至2007年6月于本院生殖中心因输卵管因素不孕进行IVF的患者进行随访,回顾性分析IVF后发生自然妊娠的13例患者的临床特征、IVF助孕情况和自然妊娠情况。结果:13例输卵管因素不孕患者行IVF治疗时的年龄为31.8±4岁(27-41岁),不孕年限5.2±2.2年(2-8年)。行IVF治疗发生生化妊娠1例,流产1例,单胎足月分娩1例。11例患者在IVF后6月内发生自然妊娠,另2例分别在IVF后2年和8年发生自然妊娠。其中,2例有异位妊娠史的患者发生对侧输卵管妊娠,1例发生流产,7例已生育健康后代,3例正处于中孕期。结论:输卵管因素不孕患者行IVF后仍有可能发生自然妊娠,尤其是年轻(<35岁)患者。IVF失败或放弃IVF治疗后患者心理状态的变化,也可能有助于激发其生育潜能,促成自然妊娠的发生。     

基于ATP生物发光法的微生物数量快速检测技术的研究进展

微生物数量的快速检测一直是工业生产与食品行业需要解决的问题,腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)生物发光法具有操作简便、检测周期短等优点,可满足一般微生物检测的需求。然而,ATP生物发光法的准确性也受到不同因素的影响,如微生物的ATP检测限值较高、微生物自身及其他因素(如非微生物ATP、提取剂种类、荧光素酶活性等)均对微生物数量的检测产生影响。本文简述了不同微生物数量检测方法的优缺点,介绍了ATP生物发光法的发展历程及原理,综述了非微生物ATP与游离ATP、微生物量、ATP提取剂、荧光素酶等因素对ATP生物发光法灵敏度与稳定性的影响,归纳总结了ATP生物发光法及检测设备在食品、医疗、污水处理等领域的应用现状,并就ATP生物发光法体系的优化及ATP在线检测的应用等方面进行了展望,以期为ATP生物发光法的高效应用提供新的思路。