支原体污染增加人肿瘤细胞外泌体生成并改变其小RNA表达模式

目的:研究支原体污染对肿瘤细胞外泌体生成的影响,探讨支原体导致的外泌体量和质的变化。方法:应用荧光显微镜及荧光共振能量转移观察支原体污染导致的胞内膜脂质向胞膜再分布及跨细胞传输变化,应用western blotting检测污染细胞上清中外泌体标记物CD81蛋白含量,应用芯片检测污染细胞上清外泌体中小RNA的表达变化模式。结果:支原体污染导致Rab11和胞膜脂质染料信号强度上升2倍以上,提示胞内膜脂质向胞膜再分布增强;支原体污染导致Di O和Di I双染细胞胞内膜泡的FRET指数上升4倍,提示膜脂质由支原体污染细胞向未污染细胞的跨细胞传输增强;污染细胞的上清中外泌体标志物CD81明显升高;污染导致外泌体内小RNA表达模式改变。结论:体外实验显示支原体污染可造成外泌体质和量的改变。     

支原体抑制宿主肿瘤细胞酪氨酸激酶受体c-kit降解

目的：研究支原体污染对宿主肿瘤细胞酪氨酸激酶受体c-kit降解的影响,探讨支原体污染对肿瘤细胞增殖的影响。方法：应用激光共聚焦荧光显微镜及透射电镜观察支原体污染HeLa细胞后内吞体的改变,间接反映外膜受体经内吞后的转运动力学改变：应用westernblot直接检测c-kit总量变化,泛素化水平及磷酸化水平;应用MTT法观察HeLa细胞污染支原体后细胞的增殖受到何种影响。结果：支原体污染后,内吞体聚集于核周,其膜表面积增大;支原体污染导致c—kit总量增加,同时泛素化磷酸化水平均增加,反映降解受抑制;支原体对肿瘤细胞增殖表现为双向影响,少量支原体污染促进HeLa细胞增殖,过量支原体污染则抑制增殖。结论：支原体污染在一定范围内可以通过抑制受体降解促进肿瘤细胞增殖,有可能是肿瘤进展中的一个加重因素,在将来需要引起临床工作者诊断和治疗上的重视。     

隐匿性乳腺癌的诊断和治疗方式分析

目的:探讨隐匿性乳腺癌的术前诊断方法和最佳治疗方式。方法:回顾性分析我院2005年1月-2016年5月收治的26例隐匿性乳腺癌患者的临床资料,包括治疗方法和预后情况。结果:26例女性患者,在患侧腋窝淋巴结清扫的基础上,14例行患侧乳房切除术+术后放疗,5例仅行患侧乳房切除术,4例行患侧乳腺外上象限局部切除术+术后放疗,3例患者仅行患侧乳房象限切除术。23例患者行术后化疗,根据激素受体情况决定内分泌治疗及靶向治疗。乳房切除与未切除患者术后局部无复发率(P=0.005)及总生存率(P=0.006)比较差别均有明显统计学意义。术后放疗组与未放疗组局部无复发率比较差异有明显统计学意义(p=0.02),而总生存率比较差异无明显统计学意义(P=0.11)。结论:隐匿性乳腺癌患者术前需完善乳腺彩超、钼靶及MRI等检查,也可选择乳腺核素显像。在患侧腋窝淋巴结清扫的基础上,患侧全乳切除+局部放疗是更加合适的治疗方式。     

不同年龄乳腺癌基因分型的对比研究

目的:对不同年龄乳腺癌患者基因分型的分布特点进行分析,为乳腺癌的治疗和预后判断提供参考依据。方法:回顾性分析青年、中年、老年乳腺癌患者的临床资料,对其基因分型分布进行对比分析。结果:不同年龄(≤40岁、40岁-60岁、≥60岁)乳腺癌的基因分型分布比较有显著性差异,存在统计学意义(P0.05),年轻乳腺癌患者中≤35岁与35-40岁患者的基因分型的分布也存在显著性差异(P0.05)。结论:不同年龄乳腺癌人群的基因分型不同,需结合其他临床和病理指标综合评估患者病情及预后;老年乳腺癌患者基因分型的分布并不乐观,需强调早期诊断和治疗。     

CAFs外泌体通过上调ABCB5诱导乳腺癌细胞化疗耐药

目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)诱导乳腺癌细胞耐药及其作用机制。方法:从临床样本中分离培养CAFs,获取条件培养基,并纯化外泌体。使用CAFs条件培养基或CAFs外泌体与CD44+的乳腺癌干细胞(CSCs)和CD44-的非干细胞亚群共培养,并用5氟尿嘧啶(5-FU)处理共培养的细胞,通过成球实验和CCK8实验检测细胞的自我更新能力和存活能力。抑制细胞中ABCB5的表达,检测5-FU对细胞存活能力的影响。结果:CAFs条件培养或外泌体处理的CSCs自我更新能力和对5-FU的耐药能力更强,成球能力和对5-FU耐药性上升约1.5-2倍。CAFs外泌体可提高CSCs中ABCB5的表达水平约4-5倍,抑制ABCB5可降低CSCs的耐药性至原来的约60-80%。结论:CAFs通过旁分泌外泌体增强CSCs的自我更新能力并通过上调CSCs中ABCB5的表达水平促进其对化疗药物的抵抗。     

单核苷酸多态性SNP（rs34040607）与中国人胃癌相关性的研究

目的：探讨胃癌组织中17号染色体q25-3区单核甘酸多态性位点rs34040607与人胃癌的相关性。并初步探索其可能的生物学机制和效应。方法：应用Taqman探针实时定量PCR分型法,检测50例胃癌患者及对照非胃癌患者基因组中此位点的多态性。应用RT．PCR法,检测胃癌组织中此位点转录产物及转录方向。应用最小自由能方法预测此位点突变对非编码RNA发夹结构形成的影响。结果：中国人胃癌患者中此位点多态性存在高变异。与正常对照人群存在显著差异。该位点存在转录活性,且转录方向为单向,由着丝粒向端粒方向转录。该点突变导致转录的非编码RNA发夹结构改变。结论：SNP位点rs34040607变异可以作为胃癌易感性预测的靶点,在未来的基因筛查中可作为一个重要候选位点,对该位点的转录及对RNA发夹结构的改变揭示了其发挥功能的一个可能的机制。     

乳腺内不可触及病灶的定位活检应用价值

目的:探讨乳腺内不可触及病灶(NPBL)的定位活检技术及其在乳腺癌早期诊断中的临床应用价值。方法:对彩超发现的4459个和钼靶发现的25个NPBL分别行麦默通旋切和钩丝定位活检,确定病灶的病理类型。结果:4459个NPBL中3196个病灶为乳腺腺病或伴纤维腺瘤样结节(71.7%),1198个为纤维腺瘤(26.9%),11个为分叶状肿瘤(0.2%),17个为导管内乳头状瘤(0.4%),9个为乳腺导管原位癌,5个为导管原位癌伴微浸润,23个为浸润性癌(恶性占0.8%)。25个钼靶发现的NPBL中乳腺腺病13例(52%),导管原位癌7例,导管原位癌伴微浸润2例,浸润性癌3例(恶性占48%)。结论:超声引导下麦默通和钼靶引导下钩丝定位切除可以对NPBL做出定性诊断,具备创伤小、手术时间短和定位精准等特点,对提高乳腺癌的早期诊断率、降低死亡率具有一定的临床应用价值。