水稻线粒体DNA的电镜观察

从黑暗条件下培养的岗比亚水稻芽中提取线粒体DNA(mtDNA),电泳时发现除mtDNA主带外,还存在一些小分子DNA带,其中1.1和1.6kb(0.34和0.53μm)的两条DNA带含量最高。用电镜观察所提取的mtDNA时,发现有十多种大小不同的环型分子,其中0.34μm,0.53μm的两种环型分子出现频率最高,这两种DNA分子的大小与电泳时看到的两条明显DNA小分子带基本上相吻合,此外在mtDNA中,还观察到套索结构和D-环。     

沙眼衣原体感染诱导小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达情况

建立小鼠生殖道沙眼衣原体感染模型,观察小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达。将小鼠生物型沙眼衣原体C. muridarum 1＆#215;104 IFU阴道接种于C57B6背景雌性小鼠,取感染后阴道拭子做沙眼衣原体培养,计算IFU,监测小鼠感染和病原体清除情况;80 d后处死小鼠,检测子宫输卵管病理改变;ELISA检测感染过程中小鼠生殖道促炎性细胞因子IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α产生情况。小鼠感染在第3至第15天维持较高水平,然后病原体被逐渐清除,整个病程约3~5周;病理检测显示子宫输卵有严重炎症、管腔扩张积水,狭窄等;于感染后第3天检测到局部IL-1α、IL-6、MIP-2分泌,第7天达高峰,然后逐渐下降至正常水平（ IL-6于11 d恢复正常,IL-1α和 MIP-2于15 d恢复正常）。 TNF-α仅在第7天检测到高水平表达。相对于TNF-α和IL-6,IL-1α和MIP-2维持时间较长。成功建立沙眼衣原体感染小鼠生殖道模型,沙眼衣原体急性感染可诱导小鼠生殖道局部分泌IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α。     

靶向白介素-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系的构建

目的：构建针对IL-1α基因的shRNA表达载体,筛选能够抑制Hela229细胞内源性IL-1α表达的shRNA,建立无内源性IL-1d表达的Hela229稳定细胞系.方法：根据shRNA的设计原则,以IL-1 αcDNA oligo为模板设计一段21 bp核苷酸目标序列,构建成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制IL-1α基因的重组shRNA质粒,转染Hela229细胞,经G418筛选后获得单克隆稳定细胞株,用ELISA方法在蛋白水平上检测IL-1α基因的沉默效果.结果：经酶切鉴定和测序分析确定IL-1 α-shRNA重组质粒构建正确,ELISA筛选出能够显著抑制内源性IL-1α表达的shRNA,获得沉默内源性IL-1 α表达的单克隆稳定的Hela229细胞株.结论：靶向IL-1α基因的重组shRNA表达质粒可显著抑制Hela229细胞内源性IL-1α的表达,成功构建靶向IL-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系.     

一种快速、无损大豆种子DNA提取方法的建立和应用

基因分型是进行植物基因功能的遗传分析和分子标记辅助育种的重要环节。该研究以大豆(Glycine max)成熟种子为材料, 建立了通过钻孔采集样品、快速提取DNA进行基因型鉴定的方法。用此方法, 一个熟练的工作人员可以在1个小时内完成120个样品的采集和DNA提取; 同时种子钻孔取样后, 不会对大豆种子的萌发造成影响。利用该方法获得的DNA可满足PCR扩增的要求。实验重复性好, 成功率在98%以上。这种快速且无损的大豆种子基因型鉴定方法可以用于鉴定杂交种子、品种纯度以及遗传分析等研究工作。     

心肌肌钙蛋白I与AMI诊断及其检测方法研究综述

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是一种仅存在于心肌细胞中,骨骼肌内含量是极低的蛋白.当心肌损伤发生时,cTnI能够快速释放进入血液,4-6h即可检测出浓度的上升,12-24h浓度达到峰值,并可以以较高浓度的形式在血液内维持6-8天,故诊断窗口期较长.用于急性心肌梗死(AMI)的诊断时,其特异性和灵敏度均高于其它血清标记物,已经替代了CK-MB成为诊断AMI的"金标准",具有重要的临床研究价值.本文就cTnI蛋白在急性心肌梗死诊断中的应用及其临床检测方法作以简要综述.     

水稻线粒体DNA的电镜观察

从黑暗条件下培养的岗比亚水稻芽中提取线粒体DNA (mtDNA),电泳时发现除二DNA 主带 外,还存在一些小分子DNA带,其中1.1和1.6 kb (0.34和。.53 ltm）的两条DNA带含量最高。J1 电镜观察所提取的二DNA时,发现有十多种大小不同的环型分子,其中。.34 pm,0.531tm的两种环型 分子出现频率最高,这两种DNA分子的大小与电泳时看到的两条明显DNA小分子带基本上相吻合, 此外在mtDNA中,还观察到套索结构和D一环。     

玉米黑粉菌mtDNA的研究 Ⅱ.限制性内切酶酶切图谱

本文报道玉米黑粉菌mtDNA的限制性内切酶酶切图谱。分别将mtDNA的Bam HI各片段制成探针,与mtDNA分别用8种酶酶切后的Southern膜进行杂交,用片段重叠法得出各套片段的排列次序,再将克隆化的Bam HI片段进行第二酶切,按分子量拼排出各酶酶切位点在mtDNA上分布的图谱。此外,片段重叠分析时,还发现玉米黑粉菌mtDNA为环状结构;杂交分析时还发现mtDNA内没有明显的重复序列。DNA总长60.7kb。     

超声造影引导下行微波消融术治疗肝癌的临床效果分析

目的：评估超声造影（CEUS）gl导下微波消融（MwA）治疗肝癌的有效性及应用价值。方法：108例肝癌患者,共147个病灶经MWA治疗。根据患者在做常规超声检查时,是否有扫查不清晰的结节或其他影像学检查提示可能存在多发结节等,分成CEUS族和对照组。CEUS组41名患者,年龄（57．9±7．8）岁,共57个病灶,平均直径（2．4±1．5）cm,经超声造影引导下行微波消融治疗。对照组67名患者,年龄（55．5±8．9）岁,共90个病灶,平均直径（2．6±1．7）cm,常规超声引导下同种条件行微波消融治疗。治疗后对两组患者进行6～12个月随访。结果：CEUS组的57个病灶均清晰显示其位置、数目、大小、边界、形态,完全消融的结节为55个,未完全消融的结节为2个。对照组67名患者的90个病灶,完全消融的病灶78个;未完全消融的结节12个。CEUS组完全消融率高于病例对照组（96．49％VS86．67％;P〈0．05）。随访6～12个月后发现,CEUS组完全消融率高于病例对照组（P〈0．05）,差异有统计学意义。结论：CEUS能更好的显示病灶的位置、数目、大小,更精确显示病灶边界、范围,造影引导下MWA是一种有效提高完全消融效率的方法,具有较大应用价值。