基于生物信息学分析研究miR-182-5p通过靶向调控EP300促进乳腺癌细胞的侵袭和转移

近期研究表明,miR-182-5p对多种癌症的侵袭和转移具有重要作用,但其在乳腺癌侵袭转移中的研究相对较少。本研究通过网上在线microRNA分析工具下载乳腺癌组织及正常乳腺组织表达比较的数据集,分析发现在GSE4589、GSE38167、GSE61438等3个数据库中,在乳腺癌组织中存在26个相同的microRNA,其中8个上调,而我们实验验证发现hsa-miR-182在8例病理组织中的表达上调差异最显著(P=0.001),选定目的基因hsa-miR-182;qRT-PCR检测细胞中miR-182-5p的表达,结果显示,与MCF-10A相比,miR-182-5p在MDA-MB-231、T47D、MDA-MB-453、MCF-7中表达上调(P<0.05);转染miR-182-5p干扰质粒,qRT-PCR检测细胞中miR-182-5p的表达情况。结果显示,miR-182-5p表达显著降低(P=0.003),提示转染成功;Transwell侵袭结果显示,MDAMB-231细胞敲低miR-182-5p,与对照组相比,体外侵袭能力明显降低(P=0.002);Western印迹检测转染miR-182-5p干扰质粒时,MDA-MB-231中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的表达情况,结果显示,与对照组相比,敲低miR-182-5p使细胞中上皮-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达上调,神经-钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达下调。为研究探讨miR-182-5p的靶蛋白,采用在线预测软件预测可能与miR-182-5p结合的靶蛋白,cytoscape构建蛋白质互作网络图并筛选出hub基因;双荧光素酶结果证实,miR-182-5p可与EP300靶向结合(P=0.001);采用qRT-PCR、Western印迹检测转染miR-182-5p干扰质粒后EP300在mRNA及蛋白质水平的表达,结果显示,与对照组相比,在敲低miR-182-5p组中EP300在mRNA及蛋白质的表达上调(P=0.001)。综上所述,miR-182-5p可靶向调节EP300,促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。     

核呼吸因子1调控NF-κB介导LPS诱导的小鼠急性肺损伤

本文旨在研究核呼吸因子1 (nuclear respiratory factor 1, NRF1)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的肺上皮细胞炎症应答中关键分子核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)的影响,以阐明NRF1对肺上皮细胞炎性应答的调控作用及机制。在体内水平上,雄性BALB/c小鼠经呼吸道转染NRF1小干扰RNA,LPS (4 mg/kg)或生理盐水经呼吸道雾化给药,48 h后取肺组织。采用免疫印迹(Western blot, WB)及real-time PCR法检测肺组织NRF1、NF-κB p65及其靶基因表达变化,免疫荧光染色法检测NRF1及NF-κB p65核转位情况。体外培养L132肺上皮细胞,转染NRF1小干扰RNA,或给予BAY 11-7082 (5μmol/L)处理24 h后,给予1 mg/L LPS刺激6 h,用real-time PCR法检测NRF1、NF-κB p65及其靶基因表达变化。采用染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay, Ch...     

口腔种植体周围细菌感染病原菌分布特点及细菌感染的危险因素分析

摘要 目的：观察口腔种植体周围细菌感染病原菌分布特点,分析细菌感染的危险因素。方法：选择360例于2018年7月~2021年5月在我院行口腔种植术的患者。根据是否发生口腔种植体周围细菌感染将患者分为感染组和未感染组。分离鉴定感染组病原菌种类。收集患者的临床资料,引起口腔种植体周围细菌感染的影响因素采用单因素及多因素Logistic回归分析。结果：360例患者中共有35例发生口腔种植体周围细菌感染,发生率为9.72%。共分离出49株病原菌,其中需氧菌14株（28.57%）、厌氧菌32株（65.31%）、有益菌3株（6.12%）;厌氧菌中又以口腔链球菌11株（22.45%）、牙龈卟啉单胞菌9株（18.37%）、产黑色素普雷沃菌7株（14.29%）为主。单因素分析结果显示：口腔种植体周围细菌感染的发生与吸烟史、慢性牙周炎病史、饮酒史、是否合并糖尿病、种植体周围牙槽骨情况以及口腔健康习惯有关（P＜0.05）;多因素Logistic回归分析显示口腔种植体周围细菌感染的危险因素是口腔健康习惯不良、种植体周围牙槽骨不良、合并糖尿病、有饮酒史、有慢性牙周炎病史、有吸烟史（P＜0.05）。结论：口腔种植体周围细菌感染的病原菌以厌氧菌为主,种植体周围牙槽骨不良、有慢性牙周炎病史、有吸烟史、合并糖尿病、饮酒史、口腔健康习惯不良是感染发生的危险因素,应针对上述因素进行适当干预。     

取食不同寄主植物的灰飞虱对药剂敏感性和解毒酶活性的影响

为了探索取食不同寄主植物的灰飞虱Laodelphax striatellus对药剂敏感性和体内解毒酶活性的影响,本研究在室内采用稻苗浸渍法分别测定了4种杀虫剂对取食水稻、小麦和稗草后的灰飞虱3龄若虫的毒力,同时比较了灰飞虱体内酯酶(ESTs)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的活性.结果表明,用5种寄主植物连续饲养灰飞虱3代后,灰飞虱对三氟苯嘧啶的敏感性无明显变化,对吡虫啉、噻虫嗪和溴氰虫酰胺的敏感性存在一定差异但不显著.取食不同寄主植物的灰飞虱体内3种解毒酶活性存在明显差异,取食稗草的灰飞虱体内ESTs和MFO活性最高,取食水稻紫香糯2315的灰飞虱体内GSTs活性最高.研究结果表明取食不同寄主植物可影响灰飞虱对杀虫剂的敏感性和体内解毒酶的活性.     

异丙酚联合地氟烷麻醉对颅脑损伤患者脑保护及脑供氧平衡的影响

目的:探讨异丙酚联合地氟烷麻醉对颅脑损伤患者脑保护及脑供氧平衡的影响。方法:选取我院2018年1月至2019年1月接受手术治疗的80例颅脑损伤患者,按照双盲随机原则将入选对象分为研究组和对照组各40例,两组患者采取相同的术前麻醉诱导,术中对照组患者采取异丙酚维持麻醉,研究组患者采取异丙酚联合地氟烷维持麻醉,对比两种麻醉方案对颅脑损伤患者脑保护及脑供氧平衡的影响。结果:研究组患者苏醒时间、定力恢复时间明显短于对照组(P0.05);两组患者诱导前脑氧分压(Pbr O2)对比差异无统计学意义(P0.05),术中及术后,研究组患者PbrO2水平明显高于对照组(P0.05);术毕及术后1 h,研究组患者丙二醛(MDA)、谷氨酸(Glu)均明显低于对照组(P0.05),而血浆超氧化物歧化酶(SOD)明显高于对照组(P0.05);T0时刻,两组患者脑氧摄取率(OER)、动-静脉血氧含量差(Da-jvO2)、脑灌注压(CPP)、平均动脉压(MAP)对比无统计学差异(P0.05),T1-T3时刻,两组患者OER、Da-jvO2、CPP、MAP对比差异有统计学意义(P0.05)。结论:异丙酚联合地氟烷用于颅脑损伤患者的麻醉,具有稳定的麻醉效果,并可保护患者脑组织,维持脑供氧平衡,确保手术顺利开展,且预后效果良好。     

肠球菌CRISPR-Cas系统基因结构的分析及其与耐药基因的关系

CRISPR-Cas系统是一种细菌的适应性免疫系统,参与特异性防御不同类型的可移动遗传元件,如质粒、噬菌体、转座子等的入侵。旨在分析肠球菌（Enterococcus）基因组中该系统的基因结构,并探讨其与细菌耐药基因之间的关系。NCBI数据库中下载10种肠球菌的全基因组信息,利用软件对CRISPR-Cas系统的分布、cas1基因、重复序列、间隔序列等进行比对分析;查找耐药相关基因,分析其与CRISPR-Cas系统之间的关系。235株肠球菌中含完整CRISPR-cas系统的有35株（14.9%）,含确定CRISPR阵列196个和cas基因簇46个。肠球菌基因组中CRISPR系统主要为II-A型（80.4%）,其次是II-C型（15.2%）,cas1基因序列的系统发育分析结果与CRISPR-cas系统的分型基本一致。肠球菌CRISPR-Cas系统的分布在不同菌种之间差异较大;CRISPR-Cas系统可能阻碍肠球菌某些耐药基因的水平转移。     

ABCA1和PPARγ与糖尿病动脉粥样硬化关系的研究

目的：研究ATP结合盒转运体A1（ABCA1）在多种糖尿病特有因素刺激下在巨噬细胞中的表达,以及PPARγ激动剂干预后其表达的变化,探讨ABCA1及PPARγ在糖尿病大血管并发症发展中的作用机制。从而为研究糖尿病大血管并发症的发生机制及防治提供一定的理论依据。方法：以巨噬细胞为研究对象,体外模拟糖尿病状态,分别以高葡萄糖、高胰岛素和糖基化终末产物刺激巨噬细胞,检测细胞中ABCA1表达的变化;以PPARγ激动剂预处理巨噬细胞后,再以上述因素刺激细胞,分别检测巨噬细胞中ABCA1的表达并比较。结果：高葡萄糖、高胰岛素和糖基化终末产物（AGE）可作为独立因素,导致细胞中ABCA1表达减少（P〈0.05）。PPARγ激动剂预处理后,ABCA1表达量增加（P〈0.05）。结论：糖尿病状态下,一些糖尿病特有的刺激因素如：高葡萄糖、高胰岛素和糖基化终末产物等作为独立因素使ABCA1表达减少,可能是糖尿病患者动脉粥样硬化发生率较非糖尿病人群增高的原因。PPARγ激动剂干预后,糖尿病状态下ABCA1的表达增加,这提示我们应用PPARγ激动剂可能延缓糖尿病患者动脉硬化进展。     

白细胞介素-1α及IL-1RA与多发性硬化关系的研究

目的:探讨白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1),尤其是白细胞介素-1αa(IL-1α)和白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)基因多态性与东北地区汉族人群多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的关系.方法:多聚酶链反应(PCR)进行IL-1a和IL-1RA基因多态性检测.结果:IL-1α和IL-1RA基因型分布及等位基因频率在MS和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结论:IL-1α和IL-1RA基因多态性与MS易感性无相关性.