尿培养中病原菌分布及耐药性分析

目的研究大连市中心医院2007年1月至2012年9月尿培养中常见病原菌（真菌除外）的分布及其耐药性,为临床治疗尿路感染提供诊断及用药依据。方法采用MicroScan—Walkaway40全自动微生物鉴定药敏分析仪和ATBExpression自动细菌鉴定仪及K—B纸片法药敏试验,应用WHONET5．4软件对结果进行回顾性统计分析。结果五年间尿培养中共分离出病原菌1012株（真菌除外）,其中革兰阴性菌802株（79．2％）,主要是大肠埃希菌538株（53．2％）、肺炎克雷伯菌95株（9．5％）、铜绿假单胞菌51株（5．1％）、奇异变形杆菌30株（2．9％）、鲍曼不动杆菌26株（2．6％）。革兰阳性菌210株（20．8％）,主要是粪肠球菌86株（8．6％）,屎肠球菌83株（8．2％）,凝固酶阴性葡萄球菌21株（2．1％）,金黄色葡萄球菌13株（1．3％）。抗生素敏感试验中碳青霉烯类（亚胺培南及美洛培南）对肠杆菌科细菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌抗菌活性最强,无耐药菌株,对非发酵菌中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药率为30％～40％,革兰阳性菌对糖肽类（万古霉素、替考拉宁）和利奈唑胺等抗菌药物高度敏感。结论应当根据主要易感菌种类及其抗生素敏感试验结果指导临床合理使用抗生素。     

16S DNA用于结核性胸膜炎的快速诊断

目的建立聚合酶链反应—毛细管电泳（PCR-CE）的方法直接检测结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌,以达到快速诊断结核性胸膜炎的目的。方法在大连市结核病医院收集2006年11月至2007年2月结核性胸膜炎患者的胸水120份,所有标本都经过结核分枝杆菌抗酸染色镜检和结合菌培养,其中115份为阴性标本,5份为阳性标本。利用16S DNA集保守性和变异性于一体的特点,设计合成通用引物G1：5′-FAM-GGC GGACGG GTG AGTAA-3′,G2：5′-ROX-GGA CTG CTG CCTCCC GTA G-3′,然后将标本进行DNA提取并进行PCR扩增,扩增产物用限制性内切酶HaeⅢ消化,用毛细管电泳来检测结核分枝杆菌。结果115份阴性标本中检测出结核分枝杆菌的有19份,未检测出结核分枝杆菌的有96份,其阳性率为16.52%;5份阳性标本中检测出结核分枝杆菌的有5份,阳性率为100%。结论PCR-CE方法检测结核分枝杆菌具有快速、准确、灵敏的特点,可用于结核性胸膜炎的快速诊断。     

铜绿假单胞菌的MALDI-TOF-MS检测方法的建立

目的 建立利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪( MALDI-TOF-MS)对铜绿假单胞菌的快速检测方法.方法 通过MALDI-TOF-MS法对铜绿假单胞菌进行检测分析,并与生化鉴定方法相比较.结果 MALDI-TOF-MS对铜绿假单胞菌的检测后得到肽指纹图片及相关质谱数据,建立MALDI-TOF-MS对铜绿假单胞菌的快速检测方法.结论 MALDI-TOF-MS方法检测铜绿假单胞菌准确快速、操作简单等特点,可发展成为食品检验铜绿假单胞菌的重要(辅助)工具.     

利用胞内代谢物变化预测大肠埃希菌耐药性

目的利用胞内代谢物量的差异达到预测大肠埃希氏菌的药物敏感性结果。方法收集临床分离大肠埃希菌120株,在头孢他啶存在条件下培养4 h。收集菌体,测定细胞内化合物然后进行多变量分析。结果 120株大肠埃希菌的聚类分析结果很好地体现了药物敏感性特征,57株耐药菌中,有5株被误判,准确率为91%;47株中敏菌株中,有8株被误判,准确率为83%;16株敏感菌中有2株被误判;准确率为88%。结论该方法能够有效预测菌株的药敏结果,而且快速可靠。     

940株血培养分离菌的临床分布及抗菌药物敏感性分析

目的定期对医院血流感染分离菌的分布和抗菌药物敏感性进行分析,为菌血症的治疗提供可靠的药敏结果,提高治愈率。方法对大连市中心医院2010年1月至2013年12月8 277份血标本采用全自动血培养仪Bac T/Alert3D和Micro Scan Walk Away-40全自动细菌鉴定仪进行细菌培养、鉴定和抗生素敏感性试验。结果 8 277份血标本中检出病原菌940株,阳性率为11.4%。940株病原菌中革兰阳性菌441株,占46.9%;以金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌和肺炎链球菌为主;革兰阴性杆菌486株,占51.7%,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌为主;真菌13株,占1.4%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美洛培南高度敏感;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素高度敏感;粪肠球菌、屎肠球菌、葡萄球菌对达托霉素、万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀高度敏感。结论血液培养意义重大,病原菌分布呈多样化趋势,且表现为多重耐药。     

血清(1,3)-β-D葡聚糖与尿真菌培养联合检测对泌尿系侵袭性真菌感染的诊断价值

目的探讨血清(1,3)-β-D葡聚糖与尿真菌培养联合检测对泌尿系侵袭性真菌感染(IFI)的诊断价值。方法选取疑似泌尿系IFI患者157例,根据临床诊断,分为IFI组(48例)和非IFI组(109例),进行血清(1,3)-β-D葡聚糖检测(G试验)和尿真菌培养,比较两种方法单独和联合检测对泌尿系IFI诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Youden指数。结果 G试验和尿真菌培养的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Youden指数依次为(87.5%、89.6%)、(77.1%、78.9%)、(62.7%、65.2%)、(93.3%、94.5%)和(0.646、0.685);联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Youden指数依次为79.2%、98.2%、95.0%、91.5%和0.774。三者均具有较高阴性预测值,而联合检测的特异度、阳性预测值和Youden指数明显高于单独检测,差异有统计学意义(Ps0.05)。结论 G试验与尿真菌培养联合检测诊断泌尿系IFI具有较高的阴性预测值和阳性预测值,减少了假阳性结果,较单独检测具有更大的诊断价值。