改良组织块消化法建立大鼠气道平滑肌细胞模型

目的：建立改进大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的体外培养方法,为相关研究提供实验材料。方法：将组织块连续贴壁进行细胞原代培养,胰酶消化传代培养,差速贴壁进行细胞纯化,形态学及免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。MTT法检测PDGF-BB诱导的ASMC增殖。结果：成功培养大鼠ASMC,以改良组织块消化法最为理想。第四代平滑肌细胞纯度可达95％以上。相差显微镜下培养细胞呈典型“峰谷状”生长。免疫荧光化学染色显示特异性平滑肌肌动蛋白阳性表达。随着PDGF浓度的升高（2-80ng／ml）,MTT比色A490值呈上升趋势。与对照组相比较,80ng／ml、20ng／ml PDGF—BB组有统计学意义（P〈0．01）。结论：改良组织块消化法可缩短培养周期,在充分利用标本的基础上获得大量气道平滑肌细胞。     

姜黄素抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖和诱导凋亡的作用

目的:探讨姜黄素对大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖和凋亡的影响.方法:采用改良组织块消化法培养原代大鼠气道平滑肌细胞,以PDGF诱导ASMCs增殖建立模型.MTT法检测不同浓度姜黄素抑制ASMCs增殖情况.Hoechst 33342染色和DNA Ladder检测细胞凋亡,Western Blot检测ERK1/2和磷酸化ERK1/2的表达.结果:①MTT检测给予姜黄素处理12 h后,与模型组相比较,10 μmol/l组、20μmol/l组和40 μmol/l组的细胞平均抑制率均增加显著.P<0.05;48 h后各浓度组抑制率均升高.②Hoechst 33342观察到10μmol/I、20μmol/1和40 μmol/l姜黄素组中强荧光细胞比例随姜黄素刺量增大而增多,细胞核内多个不均一蓝染现象.③DNA Ladder观察到40μmol/l组姜黄素处理组出现梯状分布.④姜黄素(40 μmol/1)与PDGF(20 ng/m1)共同处理30 min和60 min后P-ERK1/2蛋白表达水平显著降低.结论:姜黄素对ASMCs增殖有抑制作用,同时高浓度的姜黄素可促进AsMCs凋亡,可能与下调ERK1/2的表达有关.     

两种不同手术方式治疗恶性梗阻性黄疸患者的临床疗效比较研究

目的:探讨经皮肝穿刺胆管引流术(PTCD)与经内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)治疗恶性梗阻性黄疸的治疗效果,并进行比较分析。方法:选取2016年1月~2018年5月期间我院收治的127例恶性梗阻性黄疸患者。根据治疗术式的不同将患者分为ERCP组(n=63,采用ERCP联合金属支架置入术进行治疗)和PTCD组(n=64,采用PTCD进行治疗),比较两组患者术后5d黄疸缓解率,比较两组患者术前、术后2周肝功能指标[血清总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)、直接胆红素(DBIL)],比较两组患者术后舒适度量表评分情况及并发症发生情况。结果:两组患者术后黄疸总缓解率比较差异无统计学意义(P0.05);PTCD组低位梗阻患者黄疸缓解率低于ERCP组,而高位梗阻患者黄疸缓解率高于ERCP组(P0.05)。两组患者术前、术后2周TBIL、ALT、DBIL比较差异无统计学意义(P0.05);两组患者术后2周TBIL、ALT、DBIL水平较术前比较均下降(P0.05)。ERCP组患者术后舒适度量表评分总分低于PTCD组,差异有统计学意义(P0.05)。PTCD组术后并发症总发生率14.06%(9/64),低于ERCP组的41.27%(26/63)(P0.05)。结论:ERCP与PTCD治疗恶性梗阻性黄疸均可改善患者肝脏功能、疗效满意,但ERCP对低位梗阻患者治疗效果优于PTCD,且术后舒适度优于PTCD,但术后并发症较多,临床应根据患者情况选择具体术式。