谷胱甘肽生物合成及代谢相关酶的研究进展

谷胱甘肽是广泛存在于生物体内的一个含有γ-肽键的生物活性三肽,其中游离的巯基是其活性中心。在生物体内谷胱甘肽主要是由GSH I和GSH II两个酶依次催化合成,而GSH I和GSH II的进化过程复杂,由此衍生出多条生物合成途径,其代谢过程在不同生物体内也复杂多样。本文主要综述了谷胱甘肽生物合成及代谢相关酶的研究进展和利用基因工程手段提高胞内谷胱甘肽含量的策略。     

CRISPR-Cas9研究进展及在基因治疗上的应用

CRISPR-Cas9[Clustered regularly interspaced short palindromic repeats（CRISPR）/CRISPR-associated （Cas）9]是近年兴起的一种高特异性和高效的基因编辑新技术,由向导RNA（single guide RNA,sgRNA）和cas9（CRISPR-associated 9）蛋白组成,引起DNA位点特异性双链断裂（double-strand breaks,DSBs）,引发同源重组修复（homology-directed repair,HDR）或非同源末端连接修复（non-homologous end joining,NHEJ）,达到靶基因修饰的作用。CRISPR-Cas9技术自发现以来,因其便于操作、花费较低、高特异性、可同时打靶任意数量基因等优点而被应用。近年研究显示,对于一些遗传性疾病,可通过CRISPR-Cas9精确的基因编辑破坏致病的内源基因、改正引起疾病的突变体或插入新的保护性基因进行治疗,该技术为基因治疗开启了一个新方向。主要从CRISPR-Cas9结构、作用机制及在疾病基因治疗上的应用等方面进行了综述。     

临床产ESBLs大肠埃希菌整合子检测及基因型分析

了解临床分离的产ESBLs大肠埃希菌(ESBLs-producing Escherichia coli,ESBL-EC)中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子及ESBL-EC基因型的分布。收集2014年1月至12月某三甲医院住院患者分离的大肠埃希菌,经全自动细菌分析系统鉴定并检测其对临床常用抗菌药物的耐药性,双纸片协同试验确定ESBL-EC,采用聚合酶链反应(PCR)对整合子基因和ESBLs基因进行检测。K-B法比较整合子阳性菌株与阴性菌株的耐药率。结果发现,98株临床非重复ESBL-EC对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、单环酰胺类和庆大霉素耐药率均大于50%,对妥布霉素耐药率为31.62%,对呋喃妥因、阿莫西林/克拉维酸和阿米卡星较敏感,分别为11.11%、13.4%和6.12%;对碳青霉烯类抗菌素、替加环素和哌拉西林/他唑巴坦敏感率为100%。98株菌中检出47株含Ⅰ类整合子(47.96%),3株含Ⅱ类整合子(3.06%),所有菌株中有1株同时含Ⅰ类和Ⅱ类整合子,未检出Ⅲ类整合子。整合子阳性菌株对四环素和复方新诺明的耐药率高于整合子阴性菌株(P0.05)。98株菌中β-内酰胺酶基因TEM、CTX-M-9、CTX-M-1、CTX-M-2和SHV阳性率分别为62.24%、53.06%、32.65%、4.08%和3.06%,ESBL-EC基因分型分布以TEM合并CTX-M-9型(共30株)最多见,占30.61%。结果表明,Ⅰ类整合子在产ESBLs大肠埃希菌中分布广泛,本研究尚不足以证明整合子的存在可影响ESBL-EC菌株抗生素耐药水平。同时携带TEM和CTX-M-9基因是安徽医科大学解放军174临床学院产ESBLs大肠埃希菌临床耐药菌株产生的主要原因。     

磁共振动态对比增强联合血清TSGF、ICTP、ALP对骨肿瘤良恶性鉴别和骨恶性肿瘤治疗后的疗效评估价值

摘要 目的：探讨磁共振动态对比增强（DCE-MRI）联合血清肿瘤相关物质（TSGF）、I型胶原羧基吡啶末端肽（ICTP）、碱性磷酸酶（ALP）对骨肿瘤良恶性鉴别和骨恶性肿瘤治疗后的疗效评估价值。方法：选择2020年12月至2022年4月本院收治的骨肿瘤患者163例为研究对象，根据骨肿瘤良恶性分为良性组（74例）和恶性组（89例），恶性组治疗后根据实体肿瘤疗效评价标准分为疗效良好组和疗效不良组，比较良性组与恶性组、疗效良好组与疗效不良组容量运转常数（Ktrans）、速率常数（Kep）、血管外细胞外间隙容积分数（Ve）及1分钟内初始曲线下面积（iAUC）、TSGF、ICTP、ALP，分析Ktrans、Kep、Ve、iAUC与血清TSGF、ICTP、ALP的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析各指标对骨肿瘤良恶性的预测价值。结果：不同组间Ktrans、Kep、iAUC、TSGF、ICTP、ALP比较，良性组低于恶性组（P＜0.05），疗效良好组低于疗效不良组（P＜0.05）；DCE-MRI定量参数中的Ktrans、Kep、iAUC与血清TSGF、ICTP、ALP呈正相关（P＜0.05）；Ktrans、Kep、iAUC、TSGF、ICTP、ALP及联合预测骨肿瘤良恶性的曲线下面积（AUC）分别为0.794、0.804、0.744、0.747、0.773、0.828和0.986，各项指标联合预测骨肿瘤良恶性的AUC大于各指标单独预测。结论：DCE-MRI定量参数Ktrans、Kep、iAUC联合血清TSGF、ICTP、ALP对骨肿瘤良恶性具有较高的鉴别价值，此外Ktrans、Kep、iAUC、TSGF、ICTP、ALP越高，恶性骨肿瘤患者治疗后的临床疗效越差。