小胶质细胞在脂多糖引起的热高敏中的作用

目的探讨小胶质细胞在脂多糖引起的热高敏中的作用。方法清洁级雄性昆明小鼠,随机分成两组,每组5只,腹腔注射LPS组和注射PBS组,在注射前及后30、60、120、240 min测量小鼠足底的热痛阈;每组于注射前及后4h各处死5只取脑组织检测IL-1β、TNF-α;每组于腹腔注射4h时处死动物,免疫荧光确定脑组织中小胶质细胞的激活情况。然后分为四组,米诺环素+PBS组,米诺环素+LPS组,PBS+PBS组,PBS+LPS组,每组5只,连续三天腹腔注射米诺环素或PBS,第三天注射LPS或PBS,在注射前及后30、60、120、240 min测量小鼠足底的热痛阈;每组于注射前及后4h各处死5只取脑组织检测IL-1β、TNF-α。结果与注射PBS相比,注射LPS导致IL-1β、TNF-α分泌增加,注射60、120、240 min小鼠的热痛阈降低;与米诺环素+PBS组、米诺环素+LPS组、PBS+PBS组相比,PBS+LPS组导致IL-1β、TNF-α分泌增加,注射60、120、240 min小鼠的热痛阈降低。结论LPS激活小胶质细胞分泌促炎细胞因子导致热高敏。     

β-淀粉样蛋白对BV2小胶质细胞促炎作用的研究

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)促进BV2小胶质细胞产生炎性因子IL-1β和TNFα的作用机制。方法体外培养BV2小胶质细胞,应用Aβ1-42作用于BV2小胶质细胞,或用吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)预孵育再给予Aβ1-42刺激,实时荧光定量反转录聚合酶链反应法(RT–PCR)检测IL-1β和TNFαmRNA表达;免疫印迹法(Western blot)检测胞核中NF-κB p65及其抑制蛋白胞浆中IkBα的表达。结果 Aβ1-42作用于BV2小胶质细胞后,Westernblot显示胞浆内IkBα表达下降,胞核内NF-κB p65表达明显增加,RT-PCR测定IL-1β和TNFαmRNA的表达增加;给予NF-κB信号通路特异阻断剂PDTC后,胞浆IkBα的下降和胞核内NF-κB p65的增加均被抑制,同时IL-1β和TNFαmRNA的表达亦受到抑制,PDTC的抑制效果呈剂量依赖性。结论 Aβ可通过激活小胶质细胞NF-κB信号通路促进IL-1β和TNFα的表达。