异源表达多巴脱羧酶促进大肠杆菌从头合成多巴胺

多巴胺是多种天然抗氧化药物生物合成的前体物质,在人体内作为神经递质调控中枢神经系统的多种生理功能,常用于多种类型休克的临床治疗。目前,通过微生物合成技术已经实现了多巴胺的从头合成,但是合成效率很低。针对该问题,在左旋多巴 (l-DOPA) 大肠杆菌工程菌基础上,利用不同拷贝数质粒表达野猪Sus scrofa来源的多巴脱羧酶基因Ssddc,实现了葡萄糖到多巴胺的生产。为了进一步提高多巴胺合成效率,从100个候选基因中筛选出5个多巴脱羧酶基因进行测试,其中来源于人Homo sapiens多巴脱羧酶基因Hsddc的工程菌摇瓶发酵的多巴胺产量最高,达到3.33 g/L;而来源于果蝇Drosophila melanogaster多巴脱羧酶基因Dmddc的工程菌摇瓶发酵的左旋多巴残余量最低,仅有0.02 g/L;这两株工程菌分批补料发酵表明,多巴胺的产量可以分别达到13.3 g/L和16.2 g/L,左旋多巴残余量分别是0.45 g/L和0.23 g/L。将多巴脱羧酶基因Dmddc和Ssddc分别整合到基因组上,获得遗传稳定的工程菌,在分批补料发酵条件下,多巴胺产量最高达到17.7 g/L,是目前国内外报道的最高产量。     

腹腔镜手术治疗宫颈癌的临床效果及对生存质量的影响

探讨腹腔镜手术治疗宫颈癌的临床效果及对生存质量的影响。选取2010年2月至2012年3月在我院治疗的宫颈癌患者125例,根据患者最终选取的治疗方式分为观察组(n=68)和对照组(n=57),观察组给予腹腔镜手术,对照组给予开腹手术,观察两组手术时间、淋巴结切除数目、术中出血量等,检测两组手术前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和IL-6水平;随访患者术后5年生存情况和癌症治疗功能总体评价量表(FACT-G)评分。结果显示,观察组手术时间和淋巴结清除数目分别为(224.19±45.28)min和(24.59±3.01)枚,明显多于对照组(p0.05),而术中出血量、排气时间和住院时间分别为(301.02±40.47)m L、(2.19±0.50)d和(17.01±5.11)d,明显少于对照组(p0.05);观察组术后1 d IFN-γ、TNF-α和IL-6分别为(40.01±9.91)pg/m L、(17.30±6.43)pg/m L和(14.01±4.22)pg/m L,明显低于对照组(p0.05);两组手术前后IL-4比较差异无统计学意义(p0.05);观察组术后1年、3年和5年总生存率分别为91.94%、87.10%和80.65%,与对照组比较差异无统计学意义(p0.05);观察组术后1年、3年和5年FACT-G评分分别为(65.37±10.03)分、(75.28±12.13)分和(84.46±12.01)分,明显高于对照组(p0.05)。腹腔镜手术在宫颈癌治疗中有较好的应用价值,对患者全身免疫系统干扰小,患者术后生存质量好。     

芳香族化合物微生物代谢工程研究进展

代谢工程从20世纪90年代初期发展至今已有近30年历史,对微生物菌种改良和选育工作起到了极大的推动作用。芳香族化合物是一类可以通过微生物发酵生产的化学品,广泛应用于医药、食品、饲料和材料等领域。利用代谢工程手段对莽草酸和芳香族氨基酸合成途径进行理性改造,微生物细胞可以定向地大量积累人们需要的各种芳香族化合物。笔者对近30年来国内外代谢工程改造微生物合成各种芳香族化合物的研究策略和生物合成途径进行了梳理和总结,以期为开展相关研究提供参考。