37份龙眼种质资源亲缘关系的ISSR分析

本研究利用ISSR技术对37份龙眼种质资源进行遗传多样性检测.研究结果表明,从100条ISSR引物中筛选出7条重复性好,条带清晰的引物对37份龙眼品种基因组DNA进行扩增,共扩增出54条带,其中43条具有多态性,比率为79.6%.不同龙眼品种间遗传相似系数变幅为0.69～0.97,平均达0.83,说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性.UPGMA聚类结果表明,ISSR标记能将37份龙眼品种完全区分开,并能将来源于中国、越南和泰国的37份龙眼品种分别聚类到中国、越南和泰国三大品种群,说明龙眼品种资源的亲缘关系与地理因素有关,三个国家的龙眼品种之间存在较大的遗传差异.本研究结果将为为龙眼品种资源的研究利用提供参考.     

绿豆种质资源的ISSR遗传多样性分析

利用ISSR标记对33份绿豆种质进行了遗传差异和亲缘关系分析。 结果表明,从46条ISSR引物中筛选出10条扩增条带清晰、多态性高的引物,利用这10条引物从33份绿豆种质中共扩增出118条条带,其中多态性条带115条,多态性位点比例98.18%。遗传相似性与聚类分析结果表明,供试绿豆种质间的遗传相似系数范围为0.50～0.98之间,平均0.68。当遗传相似性系数为0.682时,供试33份绿豆种质资源分为4个ISSR类群( ISSR Groups,IGs),第Ⅰ类群包括产地为黑龙江、吉林共9份和河北的1份绿豆种质资源,第二类群包括河南、山西和陕西的所有和河北的4份绿豆种质资源,第三类群为来自泰国的5份绿豆抗虫资源,第四类群包括山东和内蒙各2份绿豆资源;当遗传相似系数为0.98时,供试的33份绿豆种质资源可被全部区分开。 ISSR分析结果表明, ISSR类群划分与绿豆的地理来源存在一定相关性;而同一类群中,地理来源相同的绿豆种质间也存在一定的遗传差异。     

乌塌菜种质资源遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR技术对48份乌塌菜种质资源进行遗传多样性分析。从60条随机引物中筛选出稳定性强、条带清晰且多态性丰富的9条引物进行PCR扩增,共扩增出103条谱带,平均每个引物扩增出11.4条带,其中多态性带85条,多态性位点百分率为82.68%。不同乌塌菜种质间遗传相似系数变幅为0.59~0.97,说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。利用UPGMA聚类分析,ISSR标记能将48份乌塌菜品种完全区分开,48份乌塌菜种质被划分为4个类群,聚类结果与叶片颜色相关,为乌塌菜品种资源的研究利用提供参考。     

云南大叶种茶树种质资源ISSR指纹图谱构建及遗传多样性分析

利用ISSR标记构建了40份大叶种茶树资源的指纹图谱,用3种独立的方法（特殊的标记、特异的谱带类型、不同引物提供的谱带类型组合）可以有效地鉴别大叶种茶树种质资源,证明ISSR标记是鉴定茶树资源的有效方法。15条ISSR引物共扩增出275条谱带,其中274条具有多态性,占99．6％。40份材料间平均遗传相似系数、Nei＇s基因多态性（gene diversity）和Shannon＇s信息指数分别为0．4180、0．3797、0．5586。材料间的遗传多样性较高,说明材料间的遗传距离较远,亲缘关系较远。遗传基础较宽。ISSR聚类分析表明,40份种质资源被聚为3个类群,其中Ⅲ类群又聚为3个亚群。亲缘关系树状图在分子水平上清楚地显示了云南大叶种茶树资源间的亲缘关系,为今后茶树育种和杂交亲本的选择提供了依据。     

叶子花种质资源遗传多样性及亲缘关系的RAPD和ISSR分析

利用RAPD和ISSR标记对48份叶子花种质进行遗传多样性及亲缘关系分析。结果显示:(1)筛选出具有多态性的RAPD引物7条、ISSR引物11条,RAPD引物共扩增97条多态性条带,ISSR引物共扩增140条多态性带,多态性百分率均达100%。(2)根据两种标记的扩增结果,用UPGMA法对48份叶子花种质的聚类分析显示,48份供试材料间具有较丰富的遗传多样性,其品种间遗传相似系数RAPD为0.318 8～0.955 6,ISSR为0.349 5～0.900 0;两种分子标记均能清楚地将48份种质材料区分开来,对种质类群的划分结果基本一致,仅有些许差异。(3)聚类分析结果显示,48份种质可分为两大种系:1)B.glabra种系,其品种大多以其种内来源为主;2)涵盖了B.spectabilis、B.peruviana、B.×buttiana和B.×spectoglabra等4个种的种系,种质构成较为复杂。(4)两种标记聚类结果呈显著相关关系,相关系数为0.752 3。研究表明,对一些形态上无法细分的叶子花种质(类群),RAPD和ISSR分子标记是可靠的鉴别方法。     

西瓜种质资源遗传亲缘关系的RAPD分析

利用 RAPD 技术对国内外32份西瓜主栽品种与其骨干亲本及野生类型的遗传亲缘关系进行了研究。从720个随机引物(10bp)中筛选出15个能产生稳定多态性的引物用于 RAPD 反应,共扩增出104条 DNA 带,其中多态性 DNA 条带43条,占41.35%,平均每个引物扩增的 DNA 条带的数目为7.0条。聚类分析将供试材料分为6个类群:1个东亚生态型类群、1个美国生态型类群、2个中间生态型类群和2个非洲野生型类群,与传统的西瓜生态型分类基本吻合。每个生态型类群都有其特有的扩增(缺失)条带,同时分析了同一生态型中各个品种之间的亲缘关系及其品种的特异条带。本实验结果不仅从分子水平验证了西瓜是遗传基础狭窄的作物,而且在分子水平对西瓜传统分类与地理生态型分类进行了分析。     

西瓜种质资源遗传亲缘关系的RAPD分析

利用RAPD技术对国内外32份西瓜主栽品种与其骨干亲本及野生类型的遗传亲缘关系进行了研究。从720个随机引物（10bp)中筛选出15个能产生稳定多态性的引物用于RAPD反应,共扩增出104条DNA带,其中多态性DNA条带43条,占41．35％,平均每个引物扩增的DNA条带的数目为7．0条。聚类分析将供试材料分为6个类群：1个东亚生态型类群、1个美国生态型类群、2个中间生态型类群和2个非洲野生型类群,与传统的西瓜生态型分类基本吻合。每个生态型类群都有其特有的扩增（缺失）条带,同时分析了同一生态型中各个品种之间的亲缘关系及其品种的特异条带。本实验结果不仅从分子水平验证了西瓜是遗传基础狭窄的作用,而且在分子水平对西瓜传统分类与地理生态型分类进行了分析。     

福建省野牡丹属种质资源的ISSR分析

为探讨福建省野牡丹属(Melastoma L.)植物的亲缘关系,运用ISSR分子标记技术对源自福建省的野牡丹属野生种质及部分实生后代共34份材料进行分析。结果表明,11条多态性引物对34份种质DNA进行扩增,共获得112条完整、清晰的谱带,其中多态性条带104条,多态性比率为92.9%,表明野牡丹属种质资源具有较高的遗传多样性。34份种质材料的相似系数为0.55~0.93,平均相似系数为0.71,表明这些材料间的亲缘关系较近。聚类分析表明34份材料可划分为3个类群5个亚类,主坐标散点分析可分为4个类群,这与亲缘关系分析的结果基本一致。这从分子水平上揭示了福建省野牡丹属野生种质及部分具备优良园艺性状实生后代的亲缘关系,为该属植物的良种选育工作提供了理论依据。     

利用SRAP标记分析海南旱稻地方品种的遗传多样性及其分子身份证的构建

利用SRAP标记对来自海南省的28份旱稻种质进行了亲缘关系分析。从255对引物组合中筛选出46对扩增条带清晰、多态性高的引物组合,并选用其中的18对引物组合对28份材料进行SRAP扩增,共扩增出180个条带,其中多态性条带160条,多态性比率为87.75%,平均每对引物组合产生10个条带和8.9个多态性条带。并且,运用UPMGA方法进行的聚类分析结果表明,供试旱稻种质的遗传相似系数范围为0.687 0-0.921 2,在遗传相似系数0.687 0处分为两大类群,第I类群全部为海南山栏稻种质,第Ⅱ类群为海南地方旱稻坡压和本研究组自育旱稻品种。对海南旱稻地方品种的划分表明,山栏稻种质间亲缘关系较近,海南地方旱稻坡压可能与籼型水稻种质具有一定的遗传相似性。此外,还构建了28份海南省旱稻种质的SRAP标记分子身份证,可为山栏稻种质的遗传亲缘关系,种质鉴定及新品种选育等方面提供依据。     

紫、红黄肉甘薯种质遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记,分析了21份紫肉、28份红黄肉甘薯种质遗传多样性。结果表明：17对引物共扩增出154条谱带,其中多态性谱带138条,占89.6%,平均每个引物扩增出8.12条多态性谱带,表现出丰富的多态性。聚类分析和主成分分析将49份甘薯种质聚为4大类,类型间遗传差异较大,将红黄薯单独聚为1类,说明紫薯和红黄薯分别具有明显不同的来源和系统演化关系。种质间的遗传相似系数变幅为0.58~0.93,其中,0.61~0.70之间的种质占51.4%,0.71~0.80之间的占44.0%。而邻近地域育种单位或同一育种单位的品种亲缘关系较近。文章对如何在育种中利用这些优异种质进行了讨论。     

Comparative proteomic analysis of longan (Dimocarpus longan Lour.) seed abortion

Two-dimensional gel electrophoresis (2-DE), coupled with mass spectroscopy, was used to study seed abortion in Dimocarpus longan Lour. (cv. Minjiao 64-1) by comparing normal and aborted seeds at three developmental stages. More than 1,000 protein spots were reproducibly detected in 2-DE gels, with 43 protein spots being significantly altered in their intensity between normal and aborted seeds at least at one stage. Thirty-five proteins were identified by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight-tandem mass spectrometry (MALDI-TOF-MS/MS) analysis and protein database searching. Most of the identified proteins were associated with a variety of functions, including energy and metabolism (30%), programed cell death (9%), antioxidative processes (14%), chaperonin (23%), cell division, amino acid metabolism, secondary metabolism, and other functional classes. Furthermore, the expression patterns of HSP70 and cytosolic ascorbate peroxidase (cAPX) were validated by immunoblotting analysis. This study provides a novel, global insight into proteomic differences between normal and aborted seeds in longan. We anticipate that identification of the differentially expressed proteins may lead to a better understanding of the molecular basis for seed abortion in longan.     

生长调节剂调控龙眼冲梢的研究

为高效、安全地调控龙眼冲梢,在龙眼花芽形态分化开始期(露红点期)和花穗主轴长6～9 cm的花穗展叶期,施用生长调节剂,比较了不同方法调控龙眼冲梢的效果。结果发现龙眼花芽形态分化开始期树冠喷施200 mg/kg乙烯利+150 mg/kg多效唑混合液和土施多效唑每株4 g处理控冲梢效果都显著高于对照,冲梢率分别是10.5%和7.6%,在花穗小叶处于展叶期虹吸输300 mg/kg乙烯利防控龙眼冲梢有效且安全。     

Cloning and molecular characterization of phospholipase D (PLD) delta gene from longan (Dimocarpus longan Lour.)

Longan (Dimocarpus longan Lour.) is a non-climacteric fruit with a short postharvest life. The regulation of phospholipase D (PLD) activity closely relates to postharvest browning and senescence of longan fruit. In this study, a novel cDNA clone of longan PLDδ (LgPLDδ) was obtained and registered in GenBank (accession No. JF791814). The deduced amino acid sequence possessed all of the three typical domains of plant PLDs, a C2 domain and two catalytic HxKxxxxD motifs. The tertiary structure of LgPLDδ was further predicted. The western blot result showed that the LgPLDδ protein was specifically recognized by PLDδ antibody. The Q-RT-PCR (real-time quantitative PCR) result showed that the level of LgPLDδ mRNA expression was higher in senescent tissues than in developing tissues, which was also high in postharvest fruit. The western-blotting result further certified the different expression of LgPLDδ. These results provided a scientific basis for further investigating the mechanism of postharvest longan fruit adapting to environmental stress.     

龙眼果肉化学成分的研究

从龙眼(Dimocarpus longan Lour.)果肉的乙醇提取物中分离出9个化合物,分别鉴定为:二十四碳酸(1)、7,8-二甲基咯嗪(2)、(2S,3S,4R,10E)-2-[(2'R)-2'-羟基二十四碳酰胺]-10-十八碳烯-1,3,4-三醇(3)、尿嘧啶(4)、丁二酸(5)、腺苷(6)、甘露醇(7)、β-谷甾醇(8)和β-胡萝卜苷(9),其中化合物1～3、5和7为首次从龙眼果肉中分离得到.     

龙眼叶片冻害症状及细胞超微结构变化

以石硖龙眼为试材,于霜冻期间取叶片作超薄切片电镜透射观察,同时对叶片冻害症状进行观察,结果表明:龙眼叶片结霜时细胞结构尚未受到明显破坏,叶片外部亦未表现出明显的冻害症状。在霜晶快速溶化后细胞结构受破坏,出现质壁分离、细胞膜破裂等现象,从而导致细胞液大量外流,叶片出现褐色或黑褐色冻斑。随着阳光照射和气温继续升高,受冻害的叶片进一步失水,导致细胞壁破裂,细胞质、细胞器等原生质裂解、互溶,使细胞结构发生不可逆转的变化,致使细胞死亡。     

龙眼园节肢动物群落结构及其时空格局

通过对龙眼园节肢动物群落结构及时空格局12次的调查,结果表明,龙眼园节肢动物群落由2纲21目127科334种组成,其中昆虫纲的植食性昆虫8目69科159种（类群）;腐生性昆虫4目9科9种（类群）;捕食性昆虫7目20科47种（类群）;寄生性昆虫1目9科11种（类群）;蛛形纲1目20科108种。各亚群落个体数分别为：植食性昆虫占31．21％,腐生性昆虫占27．15％,捕食性昆虫占25．49％,寄生性昆虫占1．28％,蜘蛛占14．87％;种类数则分别占47．60％,2．69％,14．07％,3．29％,32．34％。群落结构分层明显,树冠上下层皆有的优势类群是黄立毛蚁（Paratrechina flavipes）,多色金蝉蛛（Phintella vesicolor）、啮虫科（Psocidae）,小蜂总科（Chalcidoidea）。树冠上层的优势类群有白蛾蜡蝉（Lawana imitata）,荔蝽（Tessaratoma papillosa）,龙眼角颊木虱（Cornegenapsylla sinica）,折翅蠊科（Blaberidae）,姬蜂科（Ichneumonidae）,下层有矢尖蚧（Unaspis citri）,黑刺粉虱（Aleurocanthus spiniferus）,蚊总科（Culicoidea）,长角跳虫科（Entomobryidae）,细蜂总科（Proctotrupoidea）,咸丰球蛛（Theridion xianfengensis）和灵川丽蛛（Chrysso lingchuanensis）和常见类群小叶蝉（Japananus spp．）。地面杂草层优势类群是比罗举腹蚁（Crematogaster biroi）,黄斑弓背蚁（Camponotus albosparsus）,哀弓背蚁（Camponotus dolendus）,斜纹猫蛛（Oxyopes sertatus）,长角跳虫科,蚊总科,小蜂总科,茧蜂科（Braconidae）,姬蜂科和常见类群幼豹蛛（Pardosa pusiola）。树冠上、下层的植食性和寄生性昆虫亚群落的相似性小,捕食性昆虫和蜘蛛的相似性大。龙眼树冠上的5个亚群落的数量时间格局从1月至10月份是由低到高,然后逐渐下降,其中蜘蛛亚群落的数量波动较平缓,高峰在4月份,其余的群落数量季节波动较大,植食性昆虫数量最高峰在5月份,捕食性昆虫的数量高峰在8月份,寄生性昆虫数量高峰在5月份和7月份。地面杂草层的群落数量波动比树冠层平缓。植食性昆虫与蜘蛛的数量相关显著。     

Structural features and immunomodulatory activities of polysaccharides of longan pulp

An aqueous extract of polysaccharides from longan pulp was chromatographed on a DEAE anion-exchange column to yield four fractions (LPI-IV). Immunomodulatory activities of these polysaccharides were also evaluated in vitro. The purified products, neutral polysaccharide LPI, polysaccharide-protein complex LPII and acidic polysaccharides LPIII and LPIV, exhibited conspicuous differences in their monosaccharide composition, molecular mass and glycosidic linkages. Except for LPI, the other three significantly stimulated lymphocyte proliferation in the dose range of 100-400 μg/mL compared with the normal control (P < 0.05), and might electively stimulate B cells, but not T cells. Furthermore, their stimulations on normal/lipopolysaccharide-induced proliferation and depressions on concanavalin A-induced proliferation could be ordered as LPIII > LPIV > LPII > LPI. All the fractions had the optimal dose of 100 μg/mL on enhancing macrophage phagocytosis. Among them, LPII had the considerable yield and activity for exploiting as a potential immunoadjuvant.     

药剂输液滴干对龙眼成花的影响

虹吸输液滴干技术作为一种新型的输液技术,能显著提高龙眼对调节剂的利用率。该研究利用虹吸输液滴干技术来研究氯酸钾与多效唑对龙眼成花的影响,同时探索从花芽生理分化期开始控制龙眼冲梢的方法。结果表明：氯酸钾输液滴干不但能够促使龙眼提早开花,而且能够提高其成花率、抽穗率、雌雄花比例与坐果率。不同品种龙眼对氯酸钾的敏感度不同,‘石硖’对氯酸钾最为敏感,但稳定性低;‘储良’对氯酸钾的敏感性低,但稳定度高;‘桂香’对氯酸钾的敏感性与稳定度居中。从整体上看,‘石硖’的处理效果最好,最佳处理次数为3次,每次施用7.5 L浓度为1 g·L-1的氯酸钾,处理后枝梢成花率、枝梢抽穗率、雌雄花比例、坐果率分别为53.67％、59.38％、16.01和19.58％。多效唑输液滴干对‘桂龙1号’的控梢效果显著,有效促进了龙眼成花,并以160 mg·L-1的多效唑溶液处理效果最佳,抽梢率为15.16％,抽穗率、雌花率、花穗长、花穗宽和坐果率分别为96.53％、10.36％、21.95 cm、12.96 cm和38.37％。药剂输液滴干技术施用氯酸钾和多效唑对于龙眼成花坐果有积极作用,该研究结果为实现高效、省工、环保的果园管理模式提供了借鉴。