α1-肾上腺素受体对胶原诱导性关节炎小鼠Treg细胞功能的影响*

目的: 利用胶原诱导性关节炎 (CIA) 模型小鼠,探讨去甲肾上腺素 (NE) 及其α1-肾上腺素受体 (AR ) 对CIA小鼠Treg细胞的作用。方法: 雄性DBA/1小鼠 32 只,随机分为对照组 (n=8) 和CIA模型组 (n=24)。II型胶原 (CII) 乳剂100 μl 尾根部注射DBA/1小鼠制备CIA小鼠模型,在初次免疫后第 41 日,用免疫荧光法检测小鼠脾脏中CD4⁺T与α1-AR的共定位情况;用Western blot法检测小鼠踝关节和脾脏中α1-AR的蛋白表达。分离纯化CIA小鼠脾脏中CD4⁺ T细胞,用抗CD3和抗CD28的单克隆抗体刺激CD4⁺T细胞,进行细胞培养,分为未加药组和加药组,加药组用NE或α1-AR激动剂苯肾上腺素 (phenylephrine) 处理细胞,用流式细胞术检测CIA小鼠CD4⁺T细胞中Treg的细胞数;用Western blot法检测CIA小鼠CD4⁺T中转化生长因子-β (TGF-β) 和IL-10的蛋白表达。结果: CD4⁺ T细胞能够表达α1-AR;与对照组相比,CIA小鼠踝关节和脾脏中α1-AR的蛋白表达显著降低(P＜0.01);与未加药的CIA小鼠的CD4⁺ T细胞相比,NE加入后的CIA小鼠CD4⁺ T细胞中Treg细胞的功能显著增强(P＜0.01);α1-AR激动剂phenylephrine加入后的CIA小鼠CD4⁺ T细胞中Treg细胞的功能显著增强(P＜ 0.01)。结论: 激活CIA小鼠CD4⁺ T细胞上的α1-AR可增强Treg细胞的功能,促进CD4⁺ T细胞向Treg细胞方向分化,发挥抗炎作用。     

湖北黄冈大崎山药用苔藓植物调查研究

对湖北黄冈大崎山药用苔藓植物资源进行了初步调查研究,结果表明:黄冈大崎山共有药用苔藓植物17种,隶属13科15属,约占全国药用苔藓植物总数的29.3%;本文还记述了黄冈大崎山药用苔藓植物的分布及药用功能,并提出了合理性开发利用的思路。     

含非天然氨基酸定点突变的MLL3SET蛋白表达与纯化

在组蛋白H3K4甲基转移酶MLL3的催化结构域(MLL3SET)中定点引入非天然氨基酸N-炔丙基赖氨酸(N-propargyl-lysine,PrK),表达、纯化该突变蛋白(MLL3SET*),并评估突变蛋白的酶活,为后续进一步利用单分子荧光共振能量转移技术(smFRET)表征MLL3的作用机制奠定基础.将MLL3SE...     

蓝杆藻ATCC51142中琥珀酸半醛脱氢酶的原核表达及生化表征

【背景】蓝藻中生成琥珀酸的三羧酸循环途径与其他物种不同。由于α-酮戊二酸脱羧酶和琥珀酸半醛脱氢酶的存在使得蓝藻的三羧酸循环途径变得完整。琥珀酸半醛脱氢酶催化琥珀酸半醛氧化为琥珀酸,在蓝藻中广泛存在。【目的】克隆、表达和纯化蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码蛋白,并对其进行生化表征。【方法】以蓝杆藻ATCC51142基因组为模板克隆得到cce4228基因,将其插入到原核表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行异源表达,利用Ni-NTA树脂纯化cce4228蛋白。运用紫外分光光度法和生物信息学方法表征重组cce4228蛋白生化特性。【结果】构建了pET-28a-cce4228重组表达质粒,重组cce4228蛋白在大肠杆菌中得到可溶性表达,获得了纯度大于90%的cce4228蛋白。酶动力学测试和生物信息学分析结果显示,cce4228蛋白是一个NADP+-依赖型的琥珀酸半醛脱氢酶。【结论】蓝杆藻ATCC51142中cce4228基因编码一个偏好NADP+辅因子的琥珀酸半醛脱氢酶,cce4228蛋白的生化表征结果为进一步深入研究cce4228蛋白的结构功能关系及催化机制奠定了基础。     

胶原诱导性关节炎小鼠CD4^＋T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶的作用

目的：本研究应用胶原诱导性关节炎（CIA）的动物模型,通过研究CD4＋T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶（TH）的变化与作用,探讨CIM＋T细胞亚群来源的儿茶酚胺与CIA的炎症反应之间的关系。方法：雄性DBA／1小鼠36只随机分为对照组、35天模型组和55天模型组（n=12）。用Ⅱ型胶原（cⅡ）乳剂免疫DBA／1小鼠诱导CIA,在初次免疫后第35天和55天进行关节临床评分并检测血清中抗cⅡ IgG抗体水平的变化。用Western blot法检测肠系膜淋巴结中1h1、Th17、Th2和Treg细胞的特异性转录因子及其细胞因子以及TH表达的变化。用流式细胞术检测肠系膜淋巴结中表达TH的CD4＋T细胞亚群数目的变化。结果：CIA小鼠在发病早期（初次免疫后第35天）和发病晚期（初次免疫后第55天）临床评分和血清中抗cⅡ IgG抗体水平显著升高。CIA小鼠肠系膜淋巴结中1h1和Th17细胞的特异性转录因子和细胞因子表达增加而Th2和Treg细胞的细胞因子表达减少。CIA小鼠肠系膜淋巴结中TH的表达增加,且CD4＋T细胞中TH＋的细胞数目增多,这主要是来自CD4＋T细胞亚群中Thl和rIh17细胞的作用。结论：CIA小鼠肠系膜淋巴结中存在CIM＋T细胞亚群来源的儿茶酚胺的增加,可能在cn的发展过程中具有一定的抗炎作用。     

外源钙对甘肃贝母倒苗特性和抗氧化酶活性的影响

对甘肃贝母(Fritillaria przewalskii Maxim.)鳞茎播种后2年生苗喷施不同浓度CaCl_2溶液(5、10、15、20和25mmol·L~(-1)),以喷施等量蒸馏水为对照(CK),通过测定倒苗率变化和倒苗期地下部分生理特性,探讨外源钙对甘肃贝母倒苗特性的影响。结果显示:(1)外源CaCl_2处理均可推迟甘肃贝母倒苗高峰期,有效延长甘肃贝母生长期,从而提高鳞茎产量;各CaCl_2浓度处理的倒苗延迟效应基本表现为15 mmol·L~(-1)20 mmol·L~(-1)25mmol·L~(-1)10mmol·L~(-1)5mmol·L~(-1)CK。(2)不同CaCl_2溶液喷施后倒苗期较CK推迟效应显著,比CK倒苗高峰期推迟3~7d,并推迟3~6d结束倒苗高峰,其中以喷施15mmol·L~(-1) CaCl_2处理的倒苗延迟效应最佳。(3)10~25mmol·L~(-1) CaCl_2处理均可有效增强甘肃贝母倒苗期根系活力和鳞茎的抗氧化能力,其中以15mmol·L~(-1) CaCl_2处理的倒苗期根系TTC活力最高,鳞茎SOD、POD和CAT活性最强。(4)隶属函数法综合分析结果显示,不同浓度CaCl_2处理下甘肃贝母倒苗期鳞茎抗性及生活力由强至弱依次为15mmol·L~(-1)20mmol·L~(-1)25mmol·L~(-1)10mmol·L~(-1)5mmol·L~(-1)CK。研究表明,15mmol·L~(-1) CaCl_2为甘肃贝母延迟倒苗期、增强苗期鳞茎抗逆性、提高鳞茎产量的最佳处理。     

川西北高原不同海拔高度披碱草与垂穗披碱草核型分析

目的：为研究不同海拔居群染色体核型变异及进化程度,为披碱草的分类及进化研究提供细胞学资料。方法：以川西北高原6个海拔梯度的披碱草居群和5个海拔梯度的垂穗披碱草居群为材料,采用滴片法制片对染色体进行核型分析。结果：披碱草居群D3057（海拔3 057 m）、D2682（海拔2 682 m）的核型公式为2n=6x=42=42m,为1B型;D2384（海拔2 384 m）核型公式为2n=6x=42=42m(4sat),为1A型;D2143（海拔2 143 m）、D1747（海拔1 747 m）的核型公式为2n=6x=42=40m+2sm,为1B型;D1589（海拔1 589 m）的核型公式为2n=6x=42=36m+6sm,为2B型。垂穗披碱草Y2126（海拔4 050 m）、Y2117（海拔3 800 m）、Y2291a(4 150 m)居群的核型公式为2n=6x=42m,ZY3034（海拔3 200 m）的居群核型公式为2n=6x=40m+2M,Y2122（海拔4 800 m）核型公式为2n=6x=40m+2sm,5个居群的核型类型均为1B型。基于核型对称性与进化指数,披碱草居群D158...     

四川鸟类一新记录--白鹈鹕

2003年9月27日早晨6:00左右,村民在四川省南充市西北郊外舞凤山下发现16只白鹈鹕(Pelecanus onocrotalus),经驱赶到南充市北干道一建筑物周围(彩版见封面),由于围观人群影响,于10∶02飞离.该鸟在四川是首次记录,国内近年亦未有野外记录报道.据1990年和1992年国际水禽研究局组织的亚洲隆冬水鸟调查,我国未见到;据1992年调查,在整个亚洲的越冬种群数量为5666只,其中西亚547只,南亚5119只[1];20世纪60年代在我国青海湖与大天鹅混群越冬,每年约4～6只,70年代以后青海湖未再见有越冬个体,国内无驯养繁殖记录[2].本次四川首次发现该鸟,对研究其迁徙通道和国内分布及保护有一定的意义.     

神农架国家级自然保护区药用苔藓植物的研究

对神农架国家级自然保护区药用苔藓植物进行了初步研究,结果表明,共有20种药用苔藓植物,隶属于14科18属,其中苔类3种,藓类17种.