拟南芥AtGA3OX1和AtGA3OX2基因影响茎秆次生细胞壁增厚的分子机理

赤霉素不仅对植物的种子萌发、叶片伸展和开花结果有重要的影响, 而且在茎秆的发育过程中扮演关键的角色。它的生物合成受到多种酶的调控, 其中赤霉素3-氧化酶(GA3OX)是关键的限速酶, 备受重视。拟南芥AtGA3OX 基因由4个成员组成, 其中A3OX1 和 AtGA3OX2 基因在茎中超量表达, 可能与茎的发育有关。目前, 尚未见到AtGA3OX1、AtGA3OX2基因调控次生细胞壁增厚的报道。文章以拟南芥AtGA3OX1 和 AtGA3OX2 基因双突变体atga3ox1atga3ox2为材料, 系统研究了AtGA3OX1和AtGA3OX2 基因对次生细胞壁的影响。结果表明：同时突变 AtGA3OX1和AtGA3OX2基因不仅显著抑制了茎秆次生细胞壁纤维细胞的增厚(对导管细胞没有影响), 而且也明显降低了次生细胞壁3个组分(纤维素、半纤维素和木质素)的含量。利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 进一步分析次生细胞壁3个组分生物合成基因及相关的转录因子的表达情况, 结果显示这些基因在双突变体中均受到显著影响, 表明拟南芥AtGA3OX1和 AtGA3OX2 基因可能是通过调控这些转录因子进而调控了次生细胞壁的加厚。研究结果为基因工程调控拟南芥AtGA3OX1、AtGA3OX2 基因(或其他物种同源基因), 进而增强粮食作物抗倒伏性和提高能源植物纤维生物质量提供了理论依据。     

槲皮素对人脑胶质瘤干细胞生物学行为及miR-29s家族的影响分析

目的探讨分析槲皮素对人脑胶质瘤干细胞（BGSCs）生物学行为及miR-29s家族的影响。 方法使用干细胞培养液对U87人脑胶质瘤细胞进行培养,采用CCK-8法检测槲皮素对BGSCs细胞增殖抑制率,采用流式细胞技术检测槲皮素对BGSCs细胞凋亡影响,并采用real-time PCR鉴定槲皮素对BGSCs细胞中miR-29a、miR-29b以及miR- 29c表达的影响。采用t检验以及方差分析进行统计学分析。 结果随着槲皮素浓度的增加,BGSCs细胞增殖抑制率增加24 h 0 μg/ml（0.00±0.12）%、10 μg/ml（1.36±0.38）%、20 μg/ml（15.33±3.01）%、40 μg/ ml（29.50±4.57）%、80 μg/ml（40.21±6.42）%、160 μg/ml（61.21±7.48）,F = 76.273,P < 0.05;48 h 0 μg/ml （0.09±0.05）%、10 μg/ml（9.84±2.17）%、20 μg/ml（28.57±3.84）%、40 μg/ ml（43.59±5.21）%、80 μg/ml（59.50±3.28）%、160 μg/ ml（70.21±9.48）%,F = 85.392,P < 0.05,且同浓度槲皮素作用48 h对BGSCs细胞增殖抑制率高于作用24 h（P < 0.05）。随着槲皮素浓度的升高,BGSCs细胞凋亡率升高[0 μg/ml（13.42±1.21）%、20 μg/ml（38.47±9.28）%、40 μg/ml（59.34±7.20）%、80 μg/ml（71.42±9.47）%,F = 57.493,P < 0.05]。不同浓度槲皮素处理BGSCs细胞后,可促进BGSCs细胞miR-29s家族miR- 29a/ b/ c相对表达量,且随着槲皮素浓度的增加,BGSCs细胞miR-29s家族相对表达量增加[miR-29a 0 μg/ml（1.04±0.08）、20 μg/ml（1.16±0.05）、40 μg/ml（1.30±0.10）、80 μg/ ml（1.41±0.09）,F = 19.281,P < 0.05;miR-29b 0 μg/ml（1.06±0.09）、20 μg/ml（1.13±0.05）、40 μg/ml（1.25±0.07）、80 μg/ml（1.30±0.09）,F = 13.427,P < 0.05;miR-29c 0 μg/ml（1.03±0.07）、20 μg/ml（1.15±0.03）、40 μg/ml（1.22±0.06）、80 μg/ml（1.31±0.08）,F = 14.502,P < 0.05]。 结论槲皮素可有效抑制人脑BGSCs增殖,促进人脑BGSCs凋亡,并促进人脑BGSCs中miR- 29s家族表达。