一株新的类猪圆环病毒因子的核苷酸全序列和体外感染性

在中国猪血清中分离到一新因子,命名为P2．P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸．序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关．随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究．结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子的双拷贝串联分子克隆具有感染性,表现为可在细胞的胞浆和胞核中形成包涵体,胞浆包涵体为圆形或不规则形,直径0．1～0．4gm;胞核包涵体有两种类型,一种为小而圆、直径约0．1μm的包涵体,另一种为大而呈六角性的包涵体,直径约为0．5～1．4μm．胞浆包涵体和胞核包涵体都没有外膜,相比较而言,后者有更高的电子密度．将转染后的细胞连续传代,对第5代细胞培养物抽提DNA,进行PCR,结果也只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞培养物中检测到P2的DNA．而转染空载体、P2因子单分子克隆和未转染的PK-15细胞微观结构未见变化,在第5代细胞培养物中也未能检测到P2的DNA．同样,只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞和随后传代的细胞中能检测到P2抗原．这是首次报道如此小基因组的类猪圆环病毒P2的全序列和其在体外具有感染性．