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一株新的类猪圆环病毒因子的核苷酸全序列和体外感染性
引用本文:温立斌,何孔旺,杨汉春,倪艳秀,张雪寒,郭容利,潘群兴.一株新的类猪圆环病毒因子的核苷酸全序列和体外感染性[J].中国科学C辑,2008,38(5):430-435.
作者姓名:温立斌  何孔旺  杨汉春  倪艳秀  张雪寒  郭容利  潘群兴
作者单位:江苏省农业科学院兽医研究所 南京210014(温立斌,何孔旺,倪艳秀,张雪寒,郭容利,潘群兴),中国农业大学动物医学院 北京100094(杨汉春)
基金项目:国家重点基础研究发展计划前期研究专项课题(批准号:2007CB116308)、江苏省博士后基金(批准号:5910602)和江苏省农业科学院博士后基金(批准号:6510501)资助项目
摘    要:在中国猪血清中分离到一新因子,命名为P2.P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸.序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关.随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究.结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子的双拷贝串联分子克隆具有感染性,表现为可在细胞的胞浆和胞核中形成包涵体,胞浆包涵体为圆形或不规则形,直径0.1~0.4gm;胞核包涵体有两种类型,一种为小而圆、直径约0.1μm的包涵体,另一种为大而呈六角性的包涵体,直径约为0.5~1.4μm.胞浆包涵体和胞核包涵体都没有外膜,相比较而言,后者有更高的电子密度.将转染后的细胞连续传代,对第5代细胞培养物抽提DNA,进行PCR,结果也只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞培养物中检测到P2的DNA.而转染空载体、P2因子单分子克隆和未转染的PK-15细胞微观结构未见变化,在第5代细胞培养物中也未能检测到P2的DNA.同样,只有在转染P2因子双拷贝串联分子克隆的细胞和随后传代的细胞中能检测到P2抗原.这是首次报道如此小基因组的类猪圆环病毒P2的全序列和其在体外具有感染性.

关 键 词:P2因子  猪圆环病  毒分子克隆  PK-15细胞
收稿时间:2007-08-26
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